【摘要】：目的：卵巢癌是女性生殖系統(tǒng)致死率最高的惡性腫瘤，由于早期缺乏有效的診斷方法，大約70%的病人在首次就診時已是晚期，5年生存率徘徊于30%-40%。上皮性卵巢癌占卵巢惡性腫瘤的85%-90%，因此早期診斷已成為卵巢癌診治中最重要的問題。目前CA125是診斷上皮性卵巢癌最常用的腫瘤標(biāo)志物，但是CA125的早期診斷率較低，只有50%的早期上皮性卵巢癌患者和70-90%的晚期上皮性卵巢癌患者可以檢測到CA125升高，同時在一些非惡性疾病中和非卵巢惡性腫瘤中也能檢測到不同程度的升高，如子宮內(nèi)膜癌、肺癌、乳腺癌和腸癌等，由于CA125的假陽性率較高，而且對上皮性卵巢癌的特異性不高，因此，尋找一種或多種腫瘤標(biāo)志物聯(lián)合CA125檢測上皮性卵巢癌，以提高上皮性卵巢癌的早期診斷率及敏感度、特異度，已成為目前研究的熱點。人類線粒體DNA（mtDNA）是細(xì)胞核外重要的遺傳物質(zhì)，由于其缺乏組蛋白的保護(hù)，而且缺乏損傷修復(fù)系統(tǒng)，線粒體DNA突變在人類退行性疾病和腫瘤疾病中廣泛存在，大多數(shù)突變和多態(tài)性集中在線粒體DNA D-LOOP區(qū)，我們的實驗研究表明線粒體DNA D-LOOP區(qū)單核苷酸多態(tài)性與上皮性卵巢癌發(fā)病密切相關(guān)，可作為上皮性卵巢癌的一種非侵入性檢測方法，本文擬通過研究線粒體DNA D-LOOP區(qū)單核苷酸多態(tài)性聯(lián)合CA125的檢測實驗方法為上皮性卵巢癌的早期診斷提供一種新的檢測方法。 方法： 1研究對象：①病例組：收集2005年-2009年在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院因上皮性卵巢癌行手術(shù)治療并隨訪到的93例河北籍女性患者的石蠟標(biāo)本，患者術(shù)前未接受過任何治療，患者病理類型均由河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院病理科兩名以上主任醫(yī)師確診。②對照組：在河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院體檢的93例健康河北籍女性血液標(biāo)本的線粒體DNAD-LOOP區(qū)DNA序列。 2提取病例組和對照組的線粒體DNA，并對其純度進(jìn)行檢測。 3用PCR擴增方法擴增線粒體DNA D-LOOP區(qū)。 4瓊脂糖凝膠電泳分析，證實PCR產(chǎn)物為其目的產(chǎn)物。 5PCR產(chǎn)物結(jié)果送往北京英維捷基生物工程技術(shù)服務(wù)有限公司進(jìn)行測序，并對其序列進(jìn)行分析。 6使用卡方檢驗分析病例組和對照組之間的年齡、孕產(chǎn)次、CA125之間的差別，并根據(jù)FIGO分期分析上皮性卵巢癌與CA125的關(guān)系，用行乘列表卡方檢驗分析mtDNA單核苷酸多態(tài)性聯(lián)合CA125在診斷早期上皮性卵巢癌的優(yōu)勢。 結(jié)果： 1上皮性卵巢癌患者組與對照組臨床資料對比：年齡、孕產(chǎn)次在兩者之間無差異（P值均大于0.05），CA125在兩者之間有明顯差異（P=0.000.05）。 2在93例上皮性卵巢癌外周血中有187個位點發(fā)生了變化，176個屬于基因多態(tài)性，11個屬于基因突變。93例上皮性卵巢癌患者中60例在線粒體DNAD-LOOP區(qū)發(fā)生了突變。位點73A/G（OR，123.760；95%CI，28.338-540.495；P=0.000），207G/A（OR，4.875；95%CI，1.024-23.213；（P=0.030），523C/del（OR，1.982；95%CI，1.089-3.605；P=0.024）與上皮性卵巢癌發(fā)病密切相關(guān)，位點254T/G，，259A/G，275G/A，366G/A，411C/G，414T/G，418C/G，441C/A，476C/A，524C/del，530C/T增加了上皮性卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險。位點249A/缺失（OR，2.406；95%CI，1.207-4.797；P=0.011）和263A/G（OR，3.616；95%CI，1.133-11.541；P=0.022）降低了上皮性卵巢癌的發(fā)病風(fēng)險。 3通過行乘列表卡方檢驗，兩兩比較CA125、不同位點線粒體DNA多態(tài)性及兩種檢測方法的聯(lián)合對于診斷早期上皮性卵巢癌的檢出率，線粒體DNAD-LOOP區(qū)單核苷酸多態(tài)性聯(lián)合CA125的檢測方法明顯提高了早期上皮性卵巢癌的檢出率。 結(jié)論： 1線粒體DNA D-LOOP區(qū)單核苷酸多態(tài)性與上皮性卵巢癌發(fā)病密切相關(guān)，可作為上皮性卵巢癌的一種非侵入性檢測方法。 2線粒體DNA D-LOOP區(qū)單核苷酸多態(tài)性聯(lián)合CA125的檢測方法，為上皮性卵巢癌的早期診斷提供了一種新的檢測方法。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R737.31

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 李海霞;張淑蘭;;線粒體DNA在婦科惡性腫瘤中的研究進(jìn)展[J];國際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2009年01期

2 陳道楨,薛文群,張麗珊;線粒體DNA D-Loop區(qū)突變與腫瘤[J];中國優(yōu)生與遺傳雜志;2005年04期

本文編號：2530419