發(fā)布時間：2019-08-08 07:24

【摘要】：目的檢測胎盤相關(guān)長鏈非編碼RNA(placenta-related long noncoding RNA,prlncRNA)在子癇前期患者和正常孕婦胎盤和血漿中的表達水平,以評估其做為子癇前期(preeclampsia,PE)潛在生物標記物的價值。方法1.本研究采用病例對照研究方法,入選的研究對象包括:(1)52例晚發(fā)型子癇前期(late-onset PE,LOPE)患者,該組孕婦于妊娠34周后發(fā)病并明確診斷;52例孕齡相匹配的健康孕婦做為對照組(control group 1)。(2)58例早發(fā)型子癇前期(early-onset PE,EOPE)患者,該組孕婦妊娠滿20周,并于妊娠34周前明確診斷;58例孕齡相匹配的正常對照組孕婦(control group 2)。(3)30例與上述各組孕婦年齡相匹配的健康非妊娠婦女。2.應(yīng)用lncRNA基因芯片方法檢測LOPE患者胎盤組織中異常表達的lncRNA。根據(jù)基因芯片的結(jié)果對目標lncRNA進行初步篩選,最終篩選出9個異常表達的lncRNA進行定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶聯(lián)反應(yīng)(quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)驗證。3.應(yīng)用基因本體(Gene Ontology,GO)和京都基因及基因組百科(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)分析的方法探討胎盤組織中差異表達的lncRNA生物學(xué)功能及其在PE發(fā)病中的病理機制。4.應(yīng)用qRT-PCR的方法檢測PE(LOPE和EOPE)患者與其正常對照組孕婦血漿中prlncRNA的表達水平。分析血漿和胎盤組織中l(wèi)ncRNA表達水平的相關(guān)性,并評估循環(huán)胎盤相關(guān)lncRNA(circulating placenta-related long noncoding RNA,cprlncRNA)做為生物標記物檢測PE的潛在應(yīng)用價值。5.采用原位雜交(in situ hybridization,ISH)的方法確定prlncRNA在胎盤組織中的具體表達部位,進一步揭示其在PE發(fā)病中可能起到的生物學(xué)作用及做為生物標記物監(jiān)測PE的潛在價值。結(jié)果1.用基因芯片分析的方法,一個發(fā)現(xiàn)163個prlncRNA在LOPE患者胎盤組織中異常表達,并且發(fā)現(xiàn)它們中的一些可能參與了PE的發(fā)病機制。2.prlncRNA NONHSAT116812和NONHSAT145880在孕婦的血漿中也能檢測得到,并且與其胎盤組織中的表達水平呈正相關(guān)。3.與正常孕婦相比,PE患者血漿中prlncRNA NONHSAT116812表達水平明顯降低,而NONHSAT116812明顯升高。這兩個cprlncRNA對EOPE和LOPE均具有高的識別效率。4.prlncRNA NONHSAT116812和NONHSAT116812主要表達于胎盤絨毛滋養(yǎng)細胞及絨毛內(nèi)血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞。結(jié)論胎盤組織中異常表達的lncRNA可能在PE的發(fā)病機制中起到部分或者關(guān)鍵的作用,并且prlncRNA可以釋放入血液循環(huán)。更重要的是cprlncRNA,特別是NONHSAT116812和NONHSAT145880具有較高識別LOPE和EOPE的能力,具有潛在的生物標記物應(yīng)用價值。本研究為臨床進一步前瞻性研究cprlncRNA做為生物標記物預(yù)測和監(jiān)測PE的應(yīng)用打下了基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：廣州醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R714.244

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本文編號：2524226