【摘要】：第一部分生物可降解高分子的合成 目的 合成可以在體內(nèi)降解的具有雙親性的生物高分子材料,為后續(xù)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備載體材料。 方法 1,從帶羧基的MPEG-b-P(LA-co-MCC-COOH)出發(fā),通過活化劑二環(huán)己基碳二亞胺/N-羥基琥珀酰亞胺(DCC/NHS)活化羧基,再將已活化的羧基與氨基乙醇反應(yīng)得到側(cè)鏈含羥基-OH的聚碳酸酯高分子載體MPEG-b-P(LA-co-MCC-OH)。 2,通過MPEG引發(fā)己內(nèi)酯開環(huán)得到MPEGG-b-PCL-OH;再依次活化羥基,疊氮根取代活化的端羥基得到MPEG-b-PCL-N3；還原疊氮根得到末端含胺基的MPEG-b-PCL-NH2；再引發(fā)賴氨酸NCA聚合,最后脫胺基保護(hù)得到側(cè)鏈含胺基的MPEG-b-PCL-b-PLL。 結(jié)果 1,經(jīng)核磁鑒定,得到了基于聚碳酸酯的兩親性高分子載體,側(cè)鏈含羥基的聚碳酸酯—聚乙二醇-b-聚(乳酸-co-2-甲基-2-羧基-1,3-丙二醇碳酸酯)分子式為MPEG114-b-P(LA10-co-MCC10)。 2,經(jīng)核磁鑒定,得到了另外一個(gè)基于聚氨基酸的兩親性高分子載體,聚甲氧基聚乙二醇-聚己內(nèi)酯-聚賴氨酸,分子式為MPEG114-b-PCL20-b-PLL1o。 結(jié)論 成功制備了兩個(gè)雙親性的生物高分子載體。 第二部分生物可降解高分子-鉑(Ⅳ)納米膠束治療耐藥性卵巢癌的研究 目的 制備生物可降解高分子-鉑(Ⅳ)納米膠束研究其治療固有性耐藥的卵巢癌的效用 方法1,將順鉑的四價(jià)衍生物cisPt(Ⅳ)-COOH通過酰胺鍵連接到高分子載體MPEG-b-PCL-b-PLL上,得到高分子-鉑(Ⅳ)鍵合物,并制備成納米膠束。 2,對(duì)該納米膠束進(jìn)行表征及體外釋放模擬實(shí)驗(yàn) 3,MTT實(shí)驗(yàn)研究其對(duì)卵巢癌耐藥細(xì)胞SKOV3的殺傷作用 4,原子吸收光譜法對(duì)細(xì)胞內(nèi)鉑藥積聚以及ICP-MS對(duì)DNA-鉑加合物濃度進(jìn)行測(cè)定 結(jié)果 1,高分子-鉑(Ⅳ)納米膠束呈球形,粒徑150-160nm左右,zeta電位+6.9mV,鉑的載藥量能達(dá)到13%。 2,高分子-鉑(Ⅳ)納米膠束釋放50%的藥物,在pH5.0酸性環(huán)境下僅需20個(gè)小時(shí),在pH7.4時(shí)需要40個(gè)小時(shí),而在10mM抗壞血酸鈉的還原環(huán)境下僅需5小時(shí)。 3,對(duì)于SKOV3細(xì)胞,納米膠束的24小時(shí)IC50為5.25ug/ml,順鉑為36ug/ml 4,納米膠束組細(xì)胞內(nèi)鉑濃度是順鉑組的10倍,DNA-鉑加合物濃度是順鉑組的3倍。 結(jié)論 成功制備了比較理想的納米膠束,粒徑、zeta電位以及載藥量都符合要求,并且具有長(zhǎng)效循環(huán)和降低系統(tǒng)副作用的潛能,其體外抗癌效果優(yōu)于順鉑,其可能是通過增加細(xì)胞內(nèi)鉑的積聚以及DNA-鉑加合物的形成。 第三部分生物可降解高分子-環(huán)己二胺鉑(Ⅱ)納米膠束治療耐藥性卵巢癌的研究 目的 制備生物可降解高分子-環(huán)己二胺鉑(Ⅱ)納米膠束研究其治療獲得性耐藥的卵巢癌的效用 方法 1,將奧沙利鉑前體化合物DACH-Pt-CL2與聚碳酸酯載體MPEG-b-P(LA-co-MCC)螯合,得到螯合物高分子-DACHPt, P(Pt),再制備成納米膠束 2,對(duì)該納米膠束進(jìn)行表征及體外釋放模擬實(shí)驗(yàn) 3,MTT實(shí)驗(yàn)研究其對(duì)卵巢癌細(xì)胞A2780及其耐藥株A2780DDP的殺傷作用 4,原子吸收光譜法對(duì)細(xì)胞內(nèi)鉑藥積聚以及ICP-MS對(duì)DNA-鉑加合物濃度進(jìn)行測(cè)定 結(jié)果 1,高分子-環(huán)己二胺鉑(Ⅱ)納米膠束呈球形,粒徑30-40左右,zeta電位+13mV,鉑的載藥量10% 2,高分子-環(huán)己二胺鉑納米膠束釋放50%的藥物,在pH5.0酸性環(huán)境下僅需20個(gè)小時(shí),在pH7.4時(shí)需要100個(gè)小時(shí)。 3,在親本株A2780及耐藥株A2780DDP中,高分子-環(huán)己二胺鉑納米膠束的IC50為5.2uM和15.2uM,都要小于對(duì)應(yīng)的奧沙利鉑。 4,高分子-環(huán)己二胺鉑納米膠束組細(xì)胞內(nèi)鉑濃度以及DNA-鉑加合物濃度都要高于奧沙利鉑。 結(jié)論 1,成功制備了比較理想的高分子-環(huán)己二胺鉑納米膠束,體外實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)于卵巢癌細(xì)胞親本株以及耐藥株,其藥效都比對(duì)應(yīng)的奧沙利鉑好,其可能機(jī)制是納米膠束增加了藥物進(jìn)入細(xì)胞的量。 第四部分生物可降解高分子-鉑／利尿酸聯(lián)合用藥納米膠束的研究 目的 針對(duì)腫瘤細(xì)胞對(duì)鉑類藥物“解毒”致失活這一耐藥機(jī)制,我們?cè)O(shè)計(jì)利用一個(gè)高分子納米膠束共同擔(dān)載利尿酸和鉑藥的策略,利尿酸抑制GST,從而降低細(xì)胞對(duì)鉑藥的解毒作用,起到鉑藥增敏的左右。 方法 1,通過DCC/DMAP將高分子載體MPEG-b-P(LA-co-MCC)與利尿酸鍵合,得到高分子-利尿酸鍵合物P(EA) 2,納米沉淀法P(EA)及P(Pt)共組裝成一個(gè)擔(dān)載兩個(gè)藥物的復(fù)合納米膠束 3,MTT實(shí)驗(yàn)研究其對(duì)卵巢癌細(xì)胞A2780及其耐藥株A2780DDP的殺傷作用 4,原子吸收光譜法對(duì)細(xì)胞內(nèi)鉑藥積聚以及ICP-MS對(duì)DNA-鉑加合物濃度進(jìn)行測(cè)定 5,昆明小鼠H22皮下移植瘤模型研究在體水平抗癌效果及毒性 結(jié)果 1,高分子-環(huán)己二胺鉑／利尿酸復(fù)合納米膠束M(EA/Pt)呈球形,粒徑120左右,zeta電位-5.6mV,鉑的載藥量10%,利尿酸載藥量14%,在酸性環(huán)境下釋放更快。 2,在親本株A2780及耐藥株A2780DDP中,M(EA/Pt)納米膠束的IC50分別為3.2uM和12.9uM,其數(shù)值小于對(duì)應(yīng)的奧沙利鉑與利尿酸聯(lián)合應(yīng)用。在耐藥株A2780中聯(lián)合指數(shù)CI=0.41,也要小于小分子聯(lián)合的0.53 3,高分子-環(huán)己二胺鉑復(fù)合納米膠束M(EA/Pt)組細(xì)胞內(nèi)鉑濃度要高于小分子聯(lián)合；DNA-鉑加合物濃度沒有增加。 4,高分子-環(huán)己二胺鉑復(fù)合納米膠束M(EA/Pt)能更有效的抑制腫瘤生長(zhǎng),并且沒有出現(xiàn)小鼠死亡,而相等劑量的小分子奧沙利鉑組的小鼠則在一周內(nèi)死亡。 結(jié)論 本部分成功制備了高分子-環(huán)己二胺鉑復(fù)合納米膠束M(EA/Pt),其在體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中都顯示了優(yōu)于小分子聯(lián)合的藥效以及安全性。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.31

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 楊湘云;那可汀可引起c-Jun氨基末端激酶介導(dǎo)的泰素耐藥性卵巢癌細(xì)胞凋亡[J];實(shí)用婦產(chǎn)科雜志;2003年02期

2 王超;譚文華;;米非司酮在耐藥性卵巢癌治療中的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2012年24期

3 王丹;陳超;惠寧;;不同化療耐藥性卵巢癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移特性的比較[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2011年02期

4 孫志華,吳強(qiáng),馮繼良,左連富,劉江惠,沈宗麗,張學(xué)光;細(xì)胞間隙連接蛋白43在耐藥性卵巢癌中的表達(dá)[J];徐州醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2004年04期

5 Markman M. ,Webster K. ,Zanotti K. ,李寧;拓?fù)涮婵甸L(zhǎng)期口服給藥治療順鉑/紫杉醇耐藥性卵巢癌、輸卵管癌和原發(fā)性腹膜癌的2期研究[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè));2005年02期

6 Clamp A. ,Adams M. ,Atkinson R. ,李寧;拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑依沙替康甲磺酸鹽(DX-8951f)兩種不同劑量給藥方案的IIA期研究:在順鉑/紫杉醇耐藥性卵巢癌患者中的應(yīng)用[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè));2005年02期

7 Miller D.S ,Blessing J.A ,Waggoner S ,朱國(guó)棟;評(píng)價(jià)9-氨基喜樹堿(9-AC,NSC#603071)治療鉑類耐藥性卵巢癌及腹膜原發(fā)腫瘤的II期臨床療效:一項(xiàng)婦科腫瘤人群研究[J];世界核心醫(yī)學(xué)期刊文摘(婦產(chǎn)科學(xué)分冊(cè));2005年05期

8 李雅靜;石紅;;HSP70、突變型P53在復(fù)發(fā)性、耐藥性卵巢癌中的表達(dá)及臨床意義[J];山西職工醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年06期

9 孫志華,吳強(qiáng),馮繼良,左連富,劉江惠,張學(xué)光;耐藥性卵巢癌中CX43和P-gp的檢測(cè)[J];南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)(自然科學(xué)版);2005年03期

10 ;[J];;年期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前1條

1 楊強(qiáng);生物可降解高分子—鉑藥納米膠束治療耐藥性卵巢癌的研究[D];華中科技大學(xué);2015年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 楊華;耐藥性卵巢癌的耐藥機(jī)制及治療的研究進(jìn)展[D];鄭州大學(xué);2006年

2 孫志華;耐藥性卵巢癌P-gp和CX43的檢測(cè)及意義[D];蘇州大學(xué);2004年

，

本文編號(hào)：2490714