【摘要】：目的:探討RANKL對人子宮內(nèi)膜癌細胞轉(zhuǎn)移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響。方法:體外構(gòu)建針對細胞核因子κB受體活化因子(RANK)的過表達質(zhì)粒載體(p IRES2-3FLAG-EGFP-RANK),脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染人子宮內(nèi)膜癌HEC-1A細胞株,形成HEC-1ARANK細胞(過表達質(zhì)粒組),并與HEC-1A~Control細胞(空白質(zhì)粒組)相對照。給予1μg/ml可溶性細胞因子sRANKL處理后,細胞劃痕試驗檢測細胞遷移能力,CCK-8試驗檢測細胞的增殖能力,實時熒光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot技術(shù)分別檢測EMT相關(guān)指標E-cadherin、N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白的表達變化。結(jié)果:經(jīng)1μg/ml sRANKL刺激后,HEC-1ARANK細胞遷移能力增強(P0.01),增殖效應(yīng)沒有明顯改變(P0.05),上皮性標記物E-cadherin mRNA及蛋白的表達水平下降,間質(zhì)性標記物N-cadherin、Vimentin mRNA及蛋白的表達水平顯著上調(diào)(P0.01)。結(jié)論:RANKL可通過誘導(dǎo)HEC-1A細胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進子宮內(nèi)膜癌的轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of RANKL on metastasis and epithelial stromal transformation of human endometrial carcinoma cells. Methods: the overexpression plasmid vector (p IRES2-3FLAG-EGFP-RANK) targeting nuclear factor 魏 B receptor activating factor (RANK) was constructed in vitro and transfected into human endometrial carcinoma cell line HEC-1A by lipofectamine method. HEC-1ARANK cells (overexpressed plasmid group) were formed and compared with HEC-1A~Control cells (blank plasmid group). After treated with 1 渭 g / ml soluble cytokine sRANKL, the cell migration ability was detected by cell scratch test, the proliferation ability was detected by CCK-8 assay, and the EMT related indexes were detected by real-time fluorescence quantitative PCR (qRT-PCR) and Western blot, respectively. The expression changes of N-cadherin, Vimentin mRNA and protein. Results: after stimulation with 1 渭 g / ml sRANKL, the migration ability of HEC-1ARANK cells was enhanced (P0.01), the proliferation effect was not significantly changed (P0.05), the expression level of E-cadherin mRNA and protein was decreased, and the interstitial marker N-cadherin was decreased. The expression of Vimentin mRNA and protein were up-regulated significantly (P0.01). Conclusion: RANKL can promote the metastasis of endometrial carcinoma by inducing epithelial stromal transformation of HEC-1A cells.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬國際和平婦幼保健院婦科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金面上項目(No:81172477) 上海市科委自然基金(No:11ZR1440800) 上海市衛(wèi)生系統(tǒng)優(yōu)秀學(xué)科帶頭人培養(yǎng)計劃(No:XBR2013097)
【分類號】：R737.33

【參考文獻】

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本文編號：2433926