發(fā)布時(shí)間：2019-03-03 17:16

【摘要】：目的:探討RANKL對(duì)人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移和上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響。方法:體外構(gòu)建針對(duì)細(xì)胞核因子κB受體活化因子(RANK)的過(guò)表達(dá)質(zhì)粒載體(p IRES2-3FLAG-EGFP-RANK),脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染人子宮內(nèi)膜癌HEC-1A細(xì)胞株,形成HEC-1ARANK細(xì)胞(過(guò)表達(dá)質(zhì)粒組),并與HEC-1A~Control細(xì)胞(空白質(zhì)粒組)相對(duì)照。給予1μg/ml可溶性細(xì)胞因子sRANKL處理后,細(xì)胞劃痕試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞遷移能力,CCK-8試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的增殖能力,實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot技術(shù)分別檢測(cè)EMT相關(guān)指標(biāo)E-cadherin、N-cadherin及Vimentin mRNA及蛋白的表達(dá)變化。結(jié)果:經(jīng)1μg/ml sRANKL刺激后,HEC-1ARANK細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)(P0.01),增殖效應(yīng)沒(méi)有明顯改變(P0.05),上皮性標(biāo)記物E-cadherin mRNA及蛋白的表達(dá)水平下降,間質(zhì)性標(biāo)記物N-cadherin、Vimentin mRNA及蛋白的表達(dá)水平顯著上調(diào)(P0.01)。結(jié)論:RANKL可通過(guò)誘導(dǎo)HEC-1A細(xì)胞發(fā)生上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化促進(jìn)子宮內(nèi)膜癌的轉(zhuǎn)移。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of RANKL on metastasis and epithelial stromal transformation of human endometrial carcinoma cells. Methods: the overexpression plasmid vector (p IRES2-3FLAG-EGFP-RANK) targeting nuclear factor 魏 B receptor activating factor (RANK) was constructed in vitro and transfected into human endometrial carcinoma cell line HEC-1A by lipofectamine method. HEC-1ARANK cells (overexpressed plasmid group) were formed and compared with HEC-1A~Control cells (blank plasmid group). After treated with 1 渭 g / ml soluble cytokine sRANKL, the cell migration ability was detected by cell scratch test, the proliferation ability was detected by CCK-8 assay, and the EMT related indexes were detected by real-time fluorescence quantitative PCR (qRT-PCR) and Western blot, respectively. The expression changes of N-cadherin, Vimentin mRNA and protein. Results: after stimulation with 1 渭 g / ml sRANKL, the migration ability of HEC-1ARANK cells was enhanced (P0.01), the proliferation effect was not significantly changed (P0.05), the expression level of E-cadherin mRNA and protein was decreased, and the interstitial marker N-cadherin was decreased. The expression of Vimentin mRNA and protein were up-regulated significantly (P0.01). Conclusion: RANKL can promote the metastasis of endometrial carcinoma by inducing epithelial stromal transformation of HEC-1A cells.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬國(guó)際和平婦幼保健院婦科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(No:81172477) 上海市科委自然基金(No:11ZR1440800) 上海市衛(wèi)生系統(tǒng)優(yōu)秀學(xué)科帶頭人培養(yǎng)計(jì)劃(No:XBR2013097)
【分類號(hào)】：R737.33

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 劉瑤;王玉東;;子宮內(nèi)膜癌的孕激素拮抗及增敏機(jī)制[J];國(guó)際婦產(chǎn)科學(xué)雜志;2015年01期

2 李鵬;王志啟;趙麗君;李小平;郝娟;王建六;;17β-雌二醇對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化誘導(dǎo)作用的研究[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展;2014年07期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 徐伶玲;安廣宇;;晚期結(jié)直腸癌靶向治療研究進(jìn)展[J];癌癥進(jìn)展;2014年02期

2 陳楊;耿培亮;;非小細(xì)胞肺癌新型治療靶點(diǎn)的研究進(jìn)展[J];國(guó)際藥學(xué)研究雜志;2014年02期

3 葛曉曉;姜麗巖;;肺癌與TTF-1分子標(biāo)志物研究進(jìn)展[J];中國(guó)肺癌雜志;2014年06期

4 李培;康曉征;陳克能;;ERCC1、RRM1和TS在非小細(xì)胞肺癌中的臨床意義[J];中國(guó)肺癌雜志;2014年06期

5 劉明;周承志;鄭麗霞;歐陽(yáng)銘;;自噬在表皮生長(zhǎng)因子受體酪氨酸激酶抑制劑耐藥中的作用[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2014年16期

6 房念珍;谷俊東;魏慧君;尤嘉琮;周清華;;MGMT基因啟動(dòng)子甲基化與非小細(xì)胞肺癌關(guān)系的meta分析[J];中國(guó)肺癌雜志;2014年08期

7 張丹;黃艷;王紅陽(yáng);;非小細(xì)胞肺癌驅(qū)動(dòng)基因突變及靶向治療的研究進(jìn)展[J];中國(guó)肺癌雜志;2014年10期

8 薛劍;袁芳;于農(nóng);張孝忠;;胸腺肽β4對(duì)乳腺癌化療相關(guān)心臟毒性的診斷價(jià)值[J];標(biāo)記免疫分析與臨床;2014年05期

9 劉仁旺;劉京豪;李昕;李穎;趙青春;李作生;劉紅雨;陳軍;;EGFR 19和21外顯子突變肺癌患者的臨床特征比較和預(yù)后分析[J];中國(guó)肺癌雜志;2014年11期

10 Maimon C.Rose;Elina Kostyanovskaya;R.Stephanie Huang;;Pharmacogenomics of Cisplatin Sensitivity in Non-small Cell Lung Cancer[J];Genomics,Proteomics & Bioinformatics;2014年05期

相關(guān)會(huì)議論文 前6條

1 鄧勇;張煒飛;張成斌;林金明;;液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法定量檢測(cè)前列腺癌細(xì)胞肌氨酸代謝[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)第29屆學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集——第38分會(huì)：質(zhì)譜分析[C];2014年

2 支修益;;亞肺葉切除治療早期肺癌[A];中國(guó)腫瘤內(nèi)科進(jìn)展 中國(guó)腫瘤醫(yī)師教育（2014）[C];2014年

3 張蕾;王崇薇;史天陸;張圣雨;孫言才;姜玲;;2004-2013年我院腫瘤患者嚴(yán)重藥品不良反應(yīng)分析[A];第十三屆全國(guó)青年藥師成才之路論壇暨抗腫瘤藥物合理應(yīng)用與臨床藥學(xué)實(shí)踐國(guó)家級(jí)繼教會(huì)議論文集[C];2014年

4 鄧勇;張煒飛;張成斌;林金明;;姜黃素對(duì)前列腺癌細(xì)胞肌氨酸代謝和AR/TMPRSS2-ERG信號(hào)通路的影響[A];中國(guó)化學(xué)會(huì)首屆全國(guó)質(zhì)譜分析學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2014年

5 謝蕓;王文杰;;肺癌患者手術(shù)后心律失常原因及護(hù)理對(duì)策分析[A];中國(guó)轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)和整合醫(yī)學(xué)研討會(huì)（廣州站）論文綜合刊[C];2015年

6 劉瑞;何姝霖;鄭紅剛;李衛(wèi)東;花寶金;齊鑫;裴迎霞;張蕓;;肺瘤平膏及其聯(lián)合塞來(lái)昔布干預(yù)時(shí)間對(duì)Lewis肺癌小鼠不同腫瘤微環(huán)境中COX-2表達(dá)的影響[A];第一屆青年中西醫(yī)結(jié)合腫瘤學(xué)術(shù)論壇論文集[C];2015年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 李陽(yáng);人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞向雪旺細(xì)胞的誘導(dǎo)分化及對(duì)外周面神經(jīng)損傷修復(fù)的實(shí)驗(yàn)研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

2 嚴(yán)慧;化療藥物誘導(dǎo)胃癌SGC7901細(xì)胞向腫瘤干細(xì)胞轉(zhuǎn)化的EMT機(jī)制研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 徐琰;SRC-1和Twist1蛋白表達(dá)與人乳腺癌臨床預(yù)后的關(guān)系以及誘導(dǎo)性敲除Twist1基因?qū)π∈笊砉δ苡绊懙某醪窖芯縖D];第三軍醫(yī)大學(xué);2013年

4 李柏鈞;趨化因子受體CCR9在非小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及作用研究[D];武漢大學(xué);2014年

5 張玉人;扶正祛毒方及其單體成分貝母素經(jīng)干預(yù)乳腺癌干細(xì)胞所誘導(dǎo)上皮—間質(zhì)轉(zhuǎn)化防治乳腺癌轉(zhuǎn)移的機(jī)制研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

6 王偉琦;十七β羥脫氫酶抑制劑的乳腺癌細(xì)胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)及功能研究[D];吉林大學(xué);2014年

7 薛景;轉(zhuǎn)錄后調(diào)控SOD1增加腫瘤細(xì)胞放射效應(yīng)影響的研究[D];蘇州大學(xué);2014年

8 劉現(xiàn)芳;CDH1調(diào)控EGFR和DIRAS3表達(dá)及功能的機(jī)制研究[D];山東大學(xué);2014年

9 張順利;臨床常用蛋白類檢驗(yàn)項(xiàng)目檢測(cè)方法可比性與參考物質(zhì)互通性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

10 焦虎;瘢痕疙瘩自身免疫疾病特征和多聚嘧啶序列結(jié)合蛋白為治療靶點(diǎn)的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 王學(xué)良;乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中CD105~+/CD90~+細(xì)胞群的特性研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2013年

2 曹陽(yáng);ACAP4磷酸化抑制劑LCD313對(duì)肝癌轉(zhuǎn)移抑制作用的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2013年

3 趙朝芬;恩度與腫瘤微血管正�；瘯r(shí)間窗觀察聯(lián)合順鉑治療肺癌實(shí)驗(yàn)研究[D];川北醫(yī)學(xué)院;2014年

4 冉玉格;人食管鱗癌放射抗性細(xì)胞系TE13R120的放射抗性與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化關(guān)系的研究[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

5 肖立紅;8-溴-7-甲氧基白楊素對(duì)MHCC97-H細(xì)胞系肝癌干細(xì)胞特性和β-catenin表達(dá)的影響[D];湖南師范大學(xué);2014年

6 畢曉輝;c-Met抑制劑PHA665752聯(lián)合貝伐單抗或西妥昔單抗對(duì)結(jié)腸癌細(xì)胞HCT-116增殖的影響[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

7 王彩;319例晚期肺腺癌患者臨床預(yù)后因素分析[D];河北醫(yī)科大學(xué);2014年

8 馬齊襄;惡性腫瘤器官特異性轉(zhuǎn)移的中西醫(yī)臨床研究[D];北京中醫(yī)藥大學(xué);2014年

9 楊波波;不同腫瘤基因表達(dá)分析中內(nèi)參基因的選擇和研究[D];西北大學(xué);2014年

10 扈艷婷;低劑量輻射誘導(dǎo)人支氣管上皮細(xì)胞抗氧化作用及機(jī)制的研究[D];吉林大學(xué);2014年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 杜璇;李艷輝;王澤華;汪宏波;;胰島素對(duì)子宮內(nèi)膜癌化療增敏作用及誘導(dǎo)其細(xì)胞凋亡的研究[J];中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志;2010年09期

2 王志啟;王建六;郭健;魏麗惠;;內(nèi)分泌輔助治療子宮內(nèi)膜癌的臨床意義[J];中華醫(yī)學(xué)雜志;2005年34期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 高飛,霍建忠;不同齡小鼠成骨細(xì)胞OPG和RANKL表達(dá)的變化[J];中華風(fēng)濕病學(xué)雜志;2005年04期

2 鄭東輝;戴冽;韋秀寧;朱浪靜;莫穎倩;張白玉;鄒嬋娟;;類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎滑膜成纖維細(xì)胞通過(guò)高表達(dá)RANKL促進(jìn)破骨細(xì)胞分化及活化[J];中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版);2011年05期

3 王怡;劉偉;趙鴻雁;代楠楠;顧建紅;劉宗平;;鎘對(duì)大鼠成骨細(xì)胞OPG/RANKL表達(dá)的影響[J];揚(yáng)州大學(xué)學(xué)報(bào)(農(nóng)業(yè)與生命科學(xué)版);2014年01期

4 范慧潔;戴如春;廖二元;;OPG/RANK/RANKL系統(tǒng)與骨折和類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[J];國(guó)際內(nèi)分泌代謝雜志;2006年04期

5 唐林;邵s，

本文編號(hào)：2433926