【摘要】：目的：通過(guò)對(duì)ICP及正常孕婦胎盤組織GPR30的表達(dá)及其與外周血清膽汁酸、雌二醇水平以及胎兒預(yù)后的關(guān)系,初步探討GPR30與ICP病情發(fā)展及胎兒預(yù)后的關(guān)聯(lián)。 方法：利用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)技術(shù)檢測(cè)30例ICP孕婦(分輕度、重度組各15例)及15例正常妊娠對(duì)照組孕婦血清中雌二醇濃度；利用實(shí)時(shí)熒光定量(RT-PCR)和免疫印跡法(western blot)分別檢測(cè)三組孕婦胎盤中GPR30mRNA相對(duì)表達(dá)量和蛋白的表達(dá)水平,同時(shí)收集以上病例圍生兒不良結(jié)局相關(guān)指標(biāo),將以上數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果： 1.重度ICP組外周血清中TBA濃度為(48.51±8.39)μmol/L輕度ICP組為(22.04±7.11)μmol/L,正常孕婦組為(3.42±1.31)μmol/L;兩兩比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 2.重度ICP組外周血清中E2濃度為(33.58±1.70)ng/ml,輕度ICP組為(28.66±1.66)ng/ml,正常孕婦組為(23.83±1.16)ng/ml;兩兩比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；三組孕婦外周血清E2與TBA水平呈正相關(guān),r=0.862。 3.重度ICP組胎盤組織中GPR30mRNA的相對(duì)表達(dá)量(2.78±0.53),輕度ICP組為(1.99±0.27),正常孕婦組為(1.27+0.24)；兩兩比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 4.重度ICP組胎盤組織中GPR30蛋白的相對(duì)灰度值為(0.54±0.09),輕度ICP組為(0.40±0.55),正常孕婦組為(0.32±0.04)；兩兩比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 5.三組孕婦胎盤組織GPR30mRNA相對(duì)表達(dá)量與外周血E2水平呈正相關(guān),r=0.812；三組孕婦胎盤組織GPR30蛋白表達(dá)量與外周血E2水平呈正相關(guān),r=0.741。 6.三組孕婦胎盤組織GPR30mRNA相對(duì)表達(dá)量與外周血TBA水平呈正相關(guān),r=0.819；三組孕婦胎盤組織GPR30蛋白表達(dá)量與外周TBA水平呈正相關(guān),r=0.796 7.三組孕婦胎盤組織GPR30mRNA相對(duì)表達(dá)量與GPR30蛋白表達(dá)量呈正相關(guān),r=0.829。 8.出現(xiàn)圍生兒不良結(jié)局和無(wú)圍生兒不良結(jié)局孕婦胎盤組織GPR30mRNA相對(duì)表達(dá)量分別為(2.41±0.531)和(1.69±0.71),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)；兩組胎盤組織GPR30蛋白表達(dá)相對(duì)灰度值分別為(0.48±0.10)和(0.35±0.12),兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01)。 結(jié)論： 1.ICP孕婦外周血清E2水平升高,且升高程度與病情嚴(yán)重程度相關(guān)。 2.晚孕期胎盤組織中均有GPR30的表達(dá)；ICP患者胎盤組織GPR30在mRNA及蛋白水平均較正常孕婦升高,且均與外周血清TBA呈正相關(guān),提示GPR30可能與ICP病情發(fā)展相關(guān)。 3.胎盤組織GPR30的表達(dá)與外周血E2水平呈正相關(guān),提示ICP孕婦升高的雌激素水平可能通過(guò)促進(jìn)胎盤GPR30的表達(dá),進(jìn)一步增加了胎盤對(duì)雌激素的敏感性。 4.胎盤組織GPR30的表達(dá)與胎兒不良預(yù)后相關(guān),提示GPR30可能通過(guò)介導(dǎo)雌激素致母胎間膽酸轉(zhuǎn)運(yùn)失調(diào)的效應(yīng),從而導(dǎo)致了對(duì)胎兒的損害。
[Abstract]:Objective: to investigate the relationship between the expression of GPR30 in placenta of ICP and normal pregnant women and the levels of peripheral blood bile acid, estradiol and fetal prognosis, and the relationship between GPR30 and the development of ICP and fetal prognosis. Methods: the serum levels of estradiol in 30 pregnant women with ICP (15 cases in mild group, 15 cases in severe group) and 15 normal pregnant women (control group) were detected by enzyme linked immunosorbent assay (ELISA). Real time fluorescence quantitative (RT-PCR) and Western blot (western blot) were used to detect the relative expression of GPR30mRNA and the expression of protein in placenta of three groups of pregnant women, and the related indexes of perinatal adverse outcome were collected. The above data were analyzed statistically. Results: 1. The peripheral serum TBA levels in severe ICP group were (48.51 鹵8.39) 渭 mol/L, (22.04 鹵7.11) 渭 mol/L, and (3.42 鹵1.31) 渭 mol/L;, respectively (P0.01). 2. The level of serum E2 in severe ICP group was (33.58 鹵1.70) ng/ml, that in mild ICP group was (28.66 鹵1.66) ng/ml, and that in normal pregnant women group was (23.83 鹵1.16) ng/ml; (P0.01). There was a positive correlation between E _ 2 and TBA in peripheral blood of pregnant women in three groups, r = 0.862. 3. The relative expression of GPR30mRNA was (2.78 鹵0.53) in severe ICP group, (1.99 鹵0.27) in mild ICP group and (1.27 0.24) in normal pregnant women group (P0.01). 4. The relative gray value of GPR30 protein in placenta of severe ICP group was (0.54 鹵0.09), that of mild ICP group was (0.40 鹵0.55), and that of normal pregnant women was (0.32 鹵0.04). 5. The relative expression of GPR30mRNA in placenta of three groups was positively correlated with the level of E _ 2 in peripheral blood, and the expression of GPR30 protein in placenta of three groups was positively correlated with the level of E _ 2 in peripheral blood, and the expression of GPR30 protein in placenta of three groups was positively correlated with the level of E _ 2 in peripheral blood. 6. The relative expression of GPR30mRNA in placenta of three groups was positively correlated with the level of TBA in peripheral blood, and the expression of GPR30 protein in placenta of three groups was positively correlated with the level of peripheral TBA (r = 0.796 7). There was a positive correlation between the relative expression of GPR30mRNA and the expression of GPR30 protein in the placenta of the three groups (r = 0.829). 8. The relative expression of GPR30mRNA in placenta of pregnant women with adverse perinatal outcome and non-perinatal adverse outcome was (2.41 鹵0.531) and (1.69 鹵0.71), respectively, with significant difference between the two groups (P0.01). The relative gray values of GPR30 protein expression in placenta of the two groups were (0.48 鹵0.10) and (0.35 鹵0.12), respectively. The difference between the two groups was statistically significant (P0.01). Conclusion: the level of E _ 2 in peripheral blood of pregnant women with 1.ICP is increased, and the degree of increase is related to the severity of the disease. 2. The expression of GPR30 was found in placental tissues of late pregnancy, and the level of GPR30 in placenta of ICP patients was higher than that of normal pregnant women, and both had positive correlation with TBA in peripheral blood, suggesting that GPR30 might be related to the development of ICP. 3. The expression of GPR30 in placental tissue was positively correlated with the level of E 2 in peripheral blood, suggesting that the increased estrogen level of pregnant women with ICP might increase the sensitivity of placenta to estrogen by promoting the expression of GPR30 in placenta. 4. The expression of GPR30 in placenta is related to fetal poor prognosis, which suggests that GPR30 may cause fetal damage by mediating the effect of estrogen on the miscarriage of cholic acid between mother and fetus.
【學(xué)位授予單位】：中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R714.7

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本文編號(hào)：2428332