【摘要】：目的探討富集AT序列的特異性結合蛋白1(SATB1)參與人絨毛外滋養(yǎng)細胞株(HTR8/SVneo)氧化應激損傷的機制。方法收集2013年9月至2014年9月在重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院產科行選擇性剖宮產術的子癇前期孕婦(n=22)和正常足月妊娠行擇期剖宮產術的孕婦的胎盤組織(n=22)。采用免疫組化和Western blotting(WB)檢測正常晚孕期及子癇前期胎盤組織中SATB1的表達。構建SATB1過表達慢病毒載體(LV-SATB1)和陰性對照載體(LV-NC)。將滋養(yǎng)細胞分為正常培養(yǎng)對照組、缺氧/復氧(H/R)培養(yǎng)組、LV-SATB1+H/R培養(yǎng)組、LV-NC+H/R培養(yǎng)組。利用免疫熒光和WB法檢測SATB1在各組細胞中的表達。采用流式細胞儀檢測細胞凋亡指數及細胞內活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平。利用Transwell小室模型檢測細胞的體外侵襲率。結果 SATB1在子癇前期中的表達顯著低于正常晚孕組(0.24±0.02 vs.0.12±0.01,t=9.35,P0.05)。轉染LV-SATB1可顯著提升H/R培養(yǎng)組的SATB1蛋白水平(0.92±0.17 vs.0.58±0.15,P0.01)。LV-SATB1可抑制H/R導致的細胞凋亡率上升及ROS聚集(P0.01)。H/R組細胞侵襲能力低于正常培養(yǎng)組;上調SATB1的表達可提升H/R組細胞的體外侵襲能力(34.33±10.08 vs.19.33±6.52,P0.05)。結論過表達SATB1可以逆轉滋養(yǎng)細胞氧化應激損傷,其有望成為研究子癇前期發(fā)病機制的新靶點。
[Abstract]:Objective to investigate the mechanism of oxidative stress injury in extracorporeal trophoblastic cell line (HTR8/SVneo) enriched with AT sequence specific binding protein 1 (SATB1). Methods from September 2013 to September 2014, the placental tissues of preeclampsia pregnant women undergoing selective cesarean section in the first affiliated Hospital of Chongqing Medical University and normal full-term pregnant women undergoing elective cesarean section were collected. Immunohistochemistry and Western blotting (WB) were used to detect the expression of SATB1 in placenta of normal late pregnancy and preeclampsia. SATB1 overexpression lentiviral vector (LV-SATB1) and negative control vector (LV-NC) were constructed. Trophoblast cells were divided into normal culture control group, hypoxia / reoxygenation (H / R) culture group, LV-SATB1 H / R culture group and LV-NC H / R culture group. The expression of SATB1 was detected by immunofluorescence and WB assay. Apoptosis index and intracellular reactive oxygen species (reactive oxygen species,ROS) were measured by flow cytometry. Transwell chamber model was used to detect the invasiveness of cells in vitro. Results the expression of SATB1 in preeclampsia was significantly lower than that in normal late pregnancy group (0.24 鹵0.02 vs.0.12 鹵0.01 vs.0.12 鹵9.35). Transfection of LV-SATB1 significantly increased the level of SATB1 protein in H / R culture group (0.92 鹵0.17 vs.0.58 鹵0.15). LV-SATB1 could inhibit the increase of apoptosis rate induced by H / R and the aggregation of ROS (P0.01). The invasiveness of cells in H / R group was lower than that in normal culture group. Upregulating the expression of SATB1 could enhance the invasiveness of H- R cells in vitro (34.33 鹵10.08 vs.19.33 鹵6.52 vs.19.33, P0.05). Conclusion overexpression of SATB1 can reverse oxidative stress injury of trophoblast, and it may be a new target to study the pathogenesis of preeclampsia.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院產科;重慶醫(yī)科大學病理科;廣州醫(yī)科大學附屬第三醫(yī)院婦產科;
【基金】：國家自然科學基金(81300509,81300508,81471472)
【分類號】：R714.244

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本文編號：2388426