【摘要】：宮頸癌是世界上女性最常見的三大惡性腫瘤之一，發(fā)展中國家女性第二大死亡原因。全球范圍內(nèi)每年大約有53萬的新發(fā)病例及27.5萬的死亡病例。我國每年有約13.7萬左右新發(fā)病例，約占世界宮頸癌發(fā)病率的1/5。復(fù)發(fā)病例約占35%，復(fù)發(fā)于首次發(fā)病3年內(nèi)的占90%。近年來發(fā)病率不斷上升，且呈現(xiàn)年輕化趨勢。目前認(rèn)為，高危型人乳頭瘤樣病毒是宮頸癌發(fā)生的最主要因素。 近幾十年由于宮頸癌篩查的廣泛開展，使許多宮頸癌得以早期發(fā)現(xiàn)和及時治療，治療方法有手術(shù)、放療、化療等綜合治療方案。早期宮頸癌的5年生存率約90%以上，但晚期和復(fù)發(fā)性宮頸癌的5年生存率僅為3.2%-13%，中國每年約2-3萬婦女死于宮頸癌。晚期和復(fù)發(fā)患者生存率低的原因在于宮頸癌的常規(guī)治療手段雖能殺滅大部分腫瘤細(xì)胞，但卻無法根除耐藥的腫瘤干細(xì)胞，而成為腫瘤復(fù)發(fā)的根源。 腫瘤組織中的腫瘤細(xì)胞是一個異質(zhì)性的群體。其中腫瘤干細(xì)胞是腫瘤組織中少量具有自我更新、分化潛能、侵襲、轉(zhuǎn)移能力的干細(xì)胞樣細(xì)胞。腫瘤干細(xì)胞往往在藥物治療時處于休眠狀態(tài)，在藥物治療后繼續(xù)產(chǎn)生新的腫瘤細(xì)胞，導(dǎo)致癌癥復(fù)發(fā)。因而，如何通過特異性標(biāo)志物來鑒定腫瘤干細(xì)胞具有重要科學(xué)意義。 LGR5是近年新發(fā)現(xiàn)的腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物，LGR5信號能抑制腫瘤細(xì)胞凋亡、促進(jìn)細(xì)胞增殖，與腫瘤的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。LGR5一度被認(rèn)為是孤兒受體，新近發(fā)現(xiàn)，R-spondin可作為配體與之結(jié)合，進(jìn)而激活Wnt信號通路，調(diào)節(jié)干細(xì)胞分化發(fā)育和腫瘤的發(fā)生發(fā)展過程。 本文通過組織芯片和免疫組化法檢測LGR5在宮頸癌組織中的表達(dá)，進(jìn)而檢測LGR5在宮頸癌細(xì)胞系中的表達(dá)，并以LGR5+SiHa細(xì)胞株為模型，探討了R-spondin1/LGR5信號對SiHa細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期、細(xì)胞因子產(chǎn)生以及裸鼠體內(nèi)成瘤的影響，闡述了LGR5分子在宮頸癌組織中的表達(dá)規(guī)律以及對宮頸癌腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響，這有助于靶向腫瘤干細(xì)胞進(jìn)行宮頸癌的診斷和治療。 一、LGR5分子在宮頸癌組織中的表達(dá)情況 【目的】檢測人宮頸癌組織及癌旁組織中LGR5分子的表達(dá)，分析其表達(dá)與宮頸癌臨床病理因素的關(guān)系。 【方法】采用組織芯片和免疫組化法，對宮頸癌、癌旁鱗狀上皮組織中LGR5表達(dá)進(jìn)行檢測評分和統(tǒng)計學(xué)分析，，探討LGR5在宮頸癌中表達(dá)規(guī)律及臨床意義。 【結(jié)果】LGR5的表達(dá)在宮頸癌、癌旁組織中鱗狀上皮有顯著性差異，在宮頸癌中呈高表達(dá)且隨著病理級別的增加表達(dá)逐漸增強(qiáng)，與病理分級密切相關(guān)。 【結(jié)論】LGR5在宮頸鱗狀上皮癌組織中異常高表達(dá)，與腫瘤的惡性程度密切相關(guān)。有望為宮頸癌的檢測和治療提供新思路。 二、R-spondin1/LGR5信號對宮頸癌細(xì)胞株SiHa生物學(xué)行為的影響 【目的】研究R-spondin1/LGR5信號對宮頸癌細(xì)胞株SiHa體外增殖、細(xì)胞因子產(chǎn)生和裸鼠體內(nèi)成瘤等生物學(xué)行為的影響。 【方法】采用FCM檢測SiHa細(xì)胞膜LGR5的表達(dá)；采用細(xì)胞計數(shù)和FCM法檢測R-spondin1/LGR5信號對SiHa細(xì)胞增殖和細(xì)胞周期的影響；ICC法檢測SiHa細(xì)胞內(nèi)IL-6、TGF-β的產(chǎn)生；采用裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證R-spondin1/LGR5信號對SiHa細(xì)胞裸鼠體內(nèi)成瘤及腫瘤生長的影響。 【結(jié)果】①FCM顯示SiHa細(xì)胞高表達(dá)LGR5分子。②細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)R-spondin1/LGR5信號能促進(jìn)SiHa細(xì)胞體外增殖。③細(xì)胞周期檢測結(jié)果提示R-spondin1/LGR5信號刺激可增加SiHa細(xì)胞S期細(xì)胞比例，減少G1/G0期細(xì)胞比例。④細(xì)胞內(nèi)染色結(jié)果顯示R-spondin1/LGR5信號能刺激促進(jìn)SiHa細(xì)胞IL-6產(chǎn)生，效應(yīng)呈劑量依賴性，但不影響SiHa細(xì)胞TGF-β合成。⑤裸鼠體內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)顯示：與對照組相比，R-spondin1處理組宮頸癌細(xì)胞株SiHa在裸鼠體內(nèi)成瘤時間短、成瘤數(shù)量多、腫瘤生長速度快。 【結(jié)論】宮頸癌細(xì)胞株SiHa高表達(dá)LGR5分子。這提示了腫瘤干細(xì)胞表面標(biāo)記分子LGR5及其信號能促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞SiHa體外增殖、IL-6產(chǎn)生和裸鼠體內(nèi)腫瘤形成等惡性生物學(xué)行為，這為靶向?qū)m頸癌干細(xì)胞生物治療提供了潛在靶點(diǎn)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：蘇州大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R737.33

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前8條

1 Brittany C.Parker;Wei Zhang;;Fusion genes in solid tumors: an emerging target for cancer diagnosis and treatment[J];Chinese Journal of Cancer;2013年11期

2 王紅霞;;基于化學(xué)蛋白質(zhì)組學(xué)的激酶組學(xué)研究進(jìn)展[J];國際藥學(xué)研究雜志;2014年03期

3 毛星剛;章薇;章翔;;膠質(zhì)瘤干細(xì)胞與WNT信號通路[J];實(shí)用醫(yī)院臨床雜志;2013年05期

4 郭寧;施明;孫麗敏;;腫瘤干細(xì)胞及其治療抗性[J];中國藥理學(xué)與毒理學(xué)雜志;2013年06期

5 Nermin Sumru Bayin;Aram Sandaldjian Modrek;Dimitris George Placantonakis;;Glioblastoma stem cells:Molecular characteristics and therapeutic implications[J];World Journal of Stem Cells;2014年02期

6 戴夢源;陳晨;陶澤璋;;Lgr5在干細(xì)胞及腫瘤中的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2014年06期

7 葉利群;樓凱凌;陳嫣;蔣嬰;;扶正解毒法干預(yù)宮頸HR-HPV感染的臨床研究[J];中醫(yī)藥學(xué)報;2014年03期

8 郭絮飛;;姜黃素對C-33A人子宮頸癌細(xì)胞株增殖的影響及其相關(guān)機(jī)制[J];中國老年學(xué)雜志;2014年11期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前5條

1 王鑫鑫;SIRT1對胃癌惡性生物學(xué)行為的影響及作用機(jī)制研究[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2013年

2 韋潁昕;硒誘導(dǎo)胰腺癌細(xì)胞程序性死亡及作用機(jī)制研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 徐揚(yáng);R-spondin及其受體在Wnt信號通路中相互作用的研究[D];吉林大學(xué);2013年

4 王宇昕;IL-6受體與EGF受體相互作用增強(qiáng)IL-6誘導(dǎo)的STAT3信號轉(zhuǎn)導(dǎo)作用研究[D];蘭州大學(xué);2013年

5 祝文君;淋巴結(jié)組織成分對小鼠肝癌細(xì)胞高、低轉(zhuǎn)移株轉(zhuǎn)移能力的影響[D];大連醫(yī)科大學(xué);2013年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前8條

1 姜開菊;Wnt家族基因Wnt4-like以及FLNα在荒漠沙蜥皮膚中的原位表達(dá)研究[D];蘭州大學(xué);2013年

2 翁申達(dá);牙鲆性別相關(guān)基因的克隆與表達(dá)分析[D];中國科學(xué)院研究生院（海洋研究所）;2013年

3 平全紅;血漿纖維蛋白原在卵巢良、惡性腫瘤診斷的臨床價值[D];天津醫(yī)科大學(xué);2013年

4 梁遷;三條造血候選基因的克隆及在骨髓再生過程中作用的篩查[D];上海交通大學(xué);2007年

5 虞祝娟;宮頸癌3.0TMRI及血管通透性成像的應(yīng)用研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

6 章國亮;二甲雙胍對前列腺癌的抑制效應(yīng)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2013年

7 宋廣艷;幽門螺桿菌感染致炎癥微環(huán)境改變在萎縮性胃炎及胃癌中作用的研究[D];山東大學(xué);2013年

8 陸婷;Rspo1基因轉(zhuǎn)染間充質(zhì)干細(xì)胞修復(fù)小鼠腸上皮輻射損傷[D];蘇州大學(xué);2014年

本文編號：2268357