【摘要】：目的 :通過(guò)沉默腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)的蛋白8(tumor necrosis factor alpha induced protein 8,TNFAIP8,TIPE)的表達(dá),研究其對(duì)宮頸癌He La細(xì)胞生物學(xué)特性的影響,并探討TNFAIP8在He La細(xì)胞增殖、遷移及凋亡中可能的作用機(jī)制。方法 :構(gòu)建特異性針對(duì)TNFAIP8基因的慢病毒載體,感染He La細(xì)胞后沉默TNFAIP8基因的表達(dá),分別采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR及蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)TNFAIP8 m RNA及蛋白在He La細(xì)胞中的表達(dá)情況。劃痕實(shí)驗(yàn)及平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測(cè)沉默TNFAIP8基因表達(dá)對(duì)He La細(xì)胞的遷移和增殖能力的影響。MTT法及錐蟲(chóng)藍(lán)染色計(jì)數(shù)法檢測(cè)血清饑餓處理后He La細(xì)胞的存活能力,FCM法檢測(cè)血清饑餓狀態(tài)下He La細(xì)胞的凋亡情況。結(jié)果 :實(shí)時(shí)熒光定量PCR及蛋白質(zhì)印跡法檢測(cè)結(jié)果表明,TNFAIP8-shR NA轉(zhuǎn)入HeL a細(xì)胞后,TNFAIP8 mR NA(P0.05)及蛋白的表達(dá)水平均被明顯下調(diào)。劃痕實(shí)驗(yàn)和克隆形成實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,沉默TNFAIP8基因在HeL a細(xì)胞中的表達(dá),明顯抑制了HeL a細(xì)胞的遷移和增殖能力(P值均0.05)。血清饑餓處理后的HeL a細(xì)胞中,TNFAIP8沉默組細(xì)胞的存活能力顯著降低,而凋亡率顯著增加(P值均0.05)。結(jié)論 :TNFAIP8作為一種致癌基因能促進(jìn)人宮頸癌He La細(xì)胞的遷移和增殖,并抑制He La細(xì)胞的凋亡。
[Abstract]:Aim: to study the effects of tumor necrosis factor 偽 -induced protein 8 (tumor necrosis factor alpha induced protein 8 (TNFAIP8) on the biological characteristics of cervical cancer He La cells and to explore the possible mechanism of TNFAIP8 in the proliferation, migration and apoptosis of He La cells. Methods: a lentivirus vector specific for TNFAIP8 gene was constructed and the expression of TNFAIP8 gene was silenced in He La cells after infection. The expression of TNFAIP8 m RNA and protein in He La cells was detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting. The effect of silent TNFAIP8 gene expression on the migration and proliferation of He La cells by scratch assay and plate cloning assay. The viability of He La cells after serum starvation was detected by MTT assay and trypanosome blue staining method The apoptosis of He La cells was measured under the condition of serum starvation. Results: the results of real-time fluorescence quantitative PCR and Western blotting showed that the expression of TNFAIP8-shR NA and the expression of TNFAIP8 mR NA (in HeL a cells were significantly down-regulated. The results of scratch test and clone formation assay showed that silencing the expression of TNFAIP8 gene in HeL a cells significantly inhibited the migration and proliferation of HeL a cells (P < 0. 05). The survival ability and apoptosis rate of HeL a cells treated with serum starvation were significantly lower than those of control group (P < 0. 05, P < 0. 05). Conclusion as a kind of oncogene, the cell migration and proliferation of human cervical cancer He La cells can be promoted and the apoptosis of He La cells can be inhibited by 1: TNFAIP8.
【作者單位】： 河南大學(xué)醫(yī)學(xué)院抗體藥物河南省工程實(shí)驗(yàn)室 河南省細(xì)胞與分子免疫學(xué)醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;河南大學(xué)第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【分類號(hào)】：R737.33

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本文編號(hào)：2250283