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過表達(dá)絲裂原誘導(dǎo)基因6對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞凋亡和侵襲力的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-09-07 21:12
【摘要】:目的 :觀察過表達(dá)絲裂原誘導(dǎo)基因6(mitogen-inducible gene 6,MIG6)對(duì)子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞(Ishikawa cell)增殖、凋亡和侵襲能力的影響。方法:脂質(zhì)體法介導(dǎo)MIG6過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Ishikawa細(xì)胞,采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR和Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染前、后MIG6表達(dá)變化;流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡的變化;Western blot檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白和周期蛋白的表達(dá);5-溴脫氧尿嘧啶核苷(Brd U)標(biāo)記法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況;Transwell檢測(cè)細(xì)胞侵襲能力的變化。結(jié)果:轉(zhuǎn)染MIG6過表達(dá)質(zhì)粒后,Ishikawa細(xì)胞中MIG6 m RNA和蛋白的水平分別為對(duì)照組的24.2倍和2.8倍,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。增加Ishikawa細(xì)胞中MIG6表達(dá)后,裂解的半胱氨酰天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved caspase 3)表達(dá)顯著上升(P0.05);早期凋亡率、晚期凋亡率分別較對(duì)照組升高1.7倍(P0.01)、2.7倍(P0.05);Cyclin D1蛋白表達(dá)明顯下降(P0.05),ERK蛋白磷酸化水平下降,p ERK/ERK比值降低(P0.05);細(xì)胞增殖率由(43.4±2.4)%下降至(30.5±4.3)%(P0.05);穿過Transwell膜的細(xì)胞數(shù)從(36.2±6.9)個(gè)下降至(26.2±3.8)個(gè)(P0.05)。結(jié)論 :MIG6表達(dá)上調(diào)能抑制Ishikawa細(xì)胞的增殖水平和侵襲能力,并促進(jìn)其凋亡。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of overexpression of mitogen inducible gene 6 (mitogen-inducible gene 6) on the proliferation, apoptosis and invasion of endometrial adenocarcinoma cell line (Ishikawa cell). Methods: MIG6 overexpression plasmids were transfected into Ishikawa cells by liposome method. The changes of MIG6 expression before transfection and after transfection were detected by real-time fluorescence quantitative PCR and Western blot. The expression of apoptosis-related protein and cyclin were detected by flow cytometry and the expression of apoptosis-related protein and cyclin were detected by Western blot. The proliferation of cells was detected by (Brd U) labeling method and the change of cell invasion ability was detected by Transwell. Results: the levels of MIG6 m RNA and protein in Ishikawa cells were 24.2 times and 2.8 times as much as those in the control group after transfection of MIG6 overexpression plasmid. The difference was statistically significant (P0.05). After increasing the expression of MIG6 in Ishikawa cells, the expression of cysteine aspartate protease-3 (cleaved caspase 3) increased significantly (P0.05), and the rate of early apoptosis increased significantly (P < 0.05). Compared with the control group, the late apoptotic rate increased 1.7-fold (P0.01) 2.7-fold (P0.05) the expression of Cyclin D1 protein decreased significantly (P0.05), the ratio of cell proliferation decreased from (43.4 鹵2.4)% to (30.5 鹵4.3)% (P0.05), the number of cells passing through the Transwell membrane decreased from (36.2 鹵6.9) to (26.2 鹵3.8) (P0.05), the cell proliferation rate decreased from (43.4 鹵2.4)% to (30.5 鹵4.3)% (P0.05), and the cell proliferation rate decreased from (43.4 鹵2.4)% to (30.5 鹵4.3)% (P0.05). Conclusion the upregulation of the expression of mig 6 can inhibit the proliferation and invasion ability of Ishikawa cells and promote its apoptosis.
【作者單位】: 南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院婦科;蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金(81070471) 江蘇省“十二五”興衛(wèi)工程重點(diǎn)人才資助(RC201161)
【分類號(hào)】:R737.33

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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