發(fā)布時(shí)間：2018-08-26 20:35

【摘要】：目的:探討Klotho基因?qū)θ俗訉m頸鱗癌細(xì)胞株Si Ha生物學(xué)特性的影響及其作用機(jī)制。方法:實(shí)時(shí)熒光定量PCR及Western blotting檢測(cè)Klotho基因在子宮頸鱗癌細(xì)胞系Si Ha、He La和C33A及人永生化表皮細(xì)胞Ha Ca T細(xì)胞中的表達(dá)水平。構(gòu)建Klotho過表達(dá)載體并轉(zhuǎn)染Si Ha細(xì)胞,采用CCK-8法、Transwell侵襲實(shí)驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)Si Ha細(xì)胞增殖、凋亡和遷移能力的變化;Western blotting檢測(cè)Rho A和ROCK 1蛋白表達(dá)水平。結(jié)果:Klotho在子宮頸癌Si Ha、Hela、C33A細(xì)胞中表達(dá)水平低于Ha Ca T細(xì)胞(P0.05)。在Si Ha細(xì)胞中過表達(dá)Klotho后,(1)細(xì)胞的增殖能力顯著低于對(duì)照組[(67.37±5.04)%vs(100.34±7.62)%,P0.05)];(2)G0/G1期細(xì)胞百分率顯著增加[(82.56±3.89)%vs(61.37±3.28)%,P0.05]、S期細(xì)胞百分率顯著減少[(9.12±2.48)%vs(28.97±2.08)%,P0.01];(3)細(xì)胞早期凋亡率和晚期凋亡率均顯著增加(均P0.05);(4)細(xì)胞遷移率顯著降低(P0.01);(5)Rho A和ROCK 1蛋白表達(dá)水平均顯著下降(均P0.01)。結(jié)論:Klotho能夠抑制人子宮頸癌Si Ha細(xì)胞的增殖和遷移,并促進(jìn)其凋亡;作用機(jī)制可能與抑制Rho A/ROCK 1信號(hào)通路的活化有關(guān),提示Klotho可以作為診斷和靶向治療子宮頸癌的潛在作用位點(diǎn)。
[Abstract]:Objective: to investigate the effect of Klotho gene on the biological characteristics of human cervical squamous cell carcinoma cell line Si Ha and its mechanism. Methods: Real-time quantitative PCR and Western blotting were used to detect the expression of Klotho gene in cervical squamous cell carcinoma cell lines Si Ha,He La and C33A and in human immortalized epidermal cell line Ha Ca T. Klotho overexpression vector was constructed and transfected into Si Ha cells. The expression levels of Rho A and ROCK 1 protein were detected by CCK-8 assay and flow cytometry. The changes of cell proliferation, apoptosis and migration ability were detected by Western blotting. Results the expression of Klotho in Si Ha,Hela,C33A cells was lower than that in Ha Ca T cells (P0.05). After overexpression of Klotho in Si Ha cells, (1) the proliferative ability of the cells was significantly lower than that of the control group [(67.37 鹵5.04) vs (100.34 鹵7.62) P 0.05]; (2) the percentage of G0/G1 phase cells significantly increased [(82.56 鹵3.89) vs (61.37 鹵3.28) P 0.05] the percentage of S phase cells significantly decreased [(9.12 鹵2.48) vs (28.97 鹵2.08) P 0.01]; (3) the rate of early apoptosis and late apoptosis increased significantly (all); (4). Cell migration was significantly decreased (P0.01); (5) Rho A and ROCK 1 protein expression levels were significantly decreased (P0.01). Conclusion: Klotho can inhibit the proliferation, migration and apoptosis of human cervical carcinoma Si Ha cells, and the mechanism may be related to the inhibition of the activation of Rho A/ROCK 1 signaling pathway. The results suggest that Klotho can be used as a potential site for the diagnosis and targeted treatment of cervical cancer.
【作者單位】： 安陽(yáng)市腫瘤醫(yī)院內(nèi)五科;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院腫瘤科;
【分類號(hào)】：R737.33

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2206082