發(fā)布時間：2018-08-12 11:06

【摘要】：目的 :觀察從卵巢癌SKOV3細胞中篩選獲得的全克隆(holoclone)細胞的特性及其形成血管生成擬態(tài)(vasculogenic mimicry,VM)的能力。方法 :通過有限稀釋法對SKOV3細胞進行單細胞培養(yǎng),形成3種單細胞克隆[全克隆、部分克隆(meroclone)和亞克隆(paraclone)];通過裸鼠體內(nèi)成瘤實驗和軟瓊脂克隆形成實驗比較3種單克隆的生物學特性,并通過三維細胞培養(yǎng)模型觀察其形成VM的能力。蛋白質印跡法檢測全克隆細胞中CD133、基質金屬蛋白酶2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)及MMP-9的表達水平。結果 :SKOV3細胞單細胞培養(yǎng)10~14 d后,全克隆、部分克隆和亞克隆細胞所占的比例分別為(17.4±0.8)%、(30.1±0.4)%和(52.5±1.1)%。裸鼠體內(nèi)成瘤率結果顯示,全克隆細胞的成瘤率為80%,部分克隆和亞克隆細胞在裸鼠中均未有腫瘤形成。軟瓊脂克隆形成實驗結果提示,全克隆細胞的克隆形成率為(16.7±3.8)%,顯著高于部分克隆及亞克隆細胞的(6.5±1.5)%和(1.2±0.7)%(F=4.085,P0.05)。三維培養(yǎng)中,全克隆組可以形成VM,部分克隆和亞克隆細胞不能形成VM。全克隆細胞中CD133、MMP-2和MMP-9蛋白的表達水平均高于親本SKOV3細胞(P值均0.05),并高于部分克隆和亞克隆細胞(P值均0.05)。結論 :SKOV3細胞中單細胞克隆在形態(tài)和生物學特性上存在異質性,其中全克隆細胞亞群具有腫瘤干細胞樣細胞特性,具有形成VM的能力。全克隆是SKOV3細胞中具有較高復發(fā)能力的細胞亞群。
[Abstract]:Aim: to observe the characteristics of fully cloned (holoclone) cells isolated from ovarian cancer SKOV3 cells and their ability to form vasculogenic mimicry VM. Methods: SKOV3 cells were cultured by finite dilution method to form three kinds of single cell clones. Partial cloning of (meroclone) and subcloning of (paraclone)], the biological characteristics of three kinds of monoclonal clones were compared by tumorigenesis in nude mice and soft Agar clone formation, and the ability of VM formation was observed by three-dimensional cell culture model. The expression of CD133, matrix metalloproteinases-2 (MMP-2) and MMP-9 were detected by Western blot. Results after 10 ~ 14 days of single cell culture, the percentage of cloned, partially cloned and subcloned cells were (17.4 鹵0.8)%, (30.1 鹵0.4)% and (52.5 鹵1.1)%, respectively. The results of tumorigenesis in nude mice showed that the tumorigenic rate of all cloned cells was 80%, and no tumor formation was found in some cloned and subcloned cells in nude mice. The results of soft Agar clone formation test showed that the clone formation rate of the whole cloned cells was (16.7 鹵3.8), significantly higher than that of the partial and subcloned cells (6.5 鹵1.5)% and (1.2 鹵0.7)% (P 0.05). In three dimensional culture, the whole clone group could form VM, and some cloned and subcloned cells could not form VM. The expression levels of CD133mMMP-2 and MMP-9 protein in the whole cloned cells were higher than those in the parental SKOV3 cells (P < 0. 05), and were higher than those in some cloned and subcloned cells (P < 0. 05). Conclusion there is heterogeneity in morphology and biological characteristics of single cell clones in SKOV3 cells, in which the whole clone subsets have the characteristics of tumor stem cell like cells and have the ability to form VM. Full cloning is a subgroup of SKOV3 cells with high relapse ability.
【作者單位】： 解放軍白求恩國際和平醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【分類號】：R737.31

【參考文獻】

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【共引文獻】

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