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RNA干擾抑制EZH2基因表達(dá)對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-08-05 20:05
【摘要】:目的:利用RNA干擾技術(shù)靶向沉默EZH2基因,檢測(cè)其對(duì)子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞增殖、遷移能力及上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)的影響。方法:實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Western blot檢測(cè)EZH2在子宮內(nèi)膜細(xì)胞ESC及子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株ECC-1、RL95-2中的表達(dá)差異。利用化學(xué)技術(shù)合成小分子siRNA轉(zhuǎn)染子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞,靶向抑制EZH2基因表達(dá)。CCK-8、Transwell小室檢測(cè)干擾前后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株ECC-1、RL95-2增殖、遷移能力變化。Western blot檢測(cè)干擾前后子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株ECC-1、RL95-2中EMT相關(guān)蛋白E-cadherin、α-catenin、N-cadherin和Vimentin的表達(dá)變化。結(jié)果:(1)EZH2在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞株ECC-1、RL95-2中的表達(dá)明顯高于子宮內(nèi)膜細(xì)胞ESC(P0.01)。(2)RNA干擾抑制EZH2基因表達(dá)后,ECC-1、RL95-2細(xì)胞增殖、遷移能力降低(P0.01)。(3)RNA干擾抑制EZH2基因表達(dá)后,ECC-1、RL95-2細(xì)胞中上皮標(biāo)志物E-cadherin和α-catenin的蛋白表達(dá)水平上調(diào)(P0.05),間質(zhì)標(biāo)志物N-cadherin和Vimentin的蛋白表達(dá)水平下調(diào)(P0.01)。結(jié)論:EZH2在子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞中高表達(dá),siRNA靶向沉默EZH2基因可抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖、遷移和上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化。
[Abstract]:Aim: to investigate the effects of RNA interference targeting silencing EZH2 gene on the proliferation, migration ability and epithelial-mesenchymal transformation (EMT) of endometrial carcinoma cells. Methods: the expression of EZH2 in endometrial cell ESC and endometrial cancer cell line ECC-1 was detected by real-time quantitative PCR blot. Small molecule siRNA was synthesized and transfected into endometrial carcinoma cells by chemical technique, and the proliferation of endometrial cancer cell line ECC-1, RL95-2, was detected by inhibiting the expression of EZH2 gene. CCK-8 and Transwell chamber were used to detect the proliferation of endometrial cancer cell line ECC-1 and RL95-2 before and after interference. The expression of E-cadherin, 偽 -cateninin-N-cadherin and Vimentin in endometrial carcinoma cell line ECC-1rL95-2 before and after interference was detected by Western blot. Results: (1) the expression of EZH2 in the endometrial cancer cell line ECC-1 rL95-2 was significantly higher than that in the endometrial cell line ESC (P0.01). (2) RNA interference inhibited the proliferation of ECC-1 rL95-2 cells after EZH2 gene expression. Decreased migration ability (P0.01). (3) RNA interference inhibited the expression of E-cadherin and 偽 -catenin in ECC-1rL95-2 cells after EZH2 gene expression was inhibited (P0.05), and the expression levels of N-cadherin and Vimentin were down-regulated (P0.01). Conclusion the overexpression of EZH2 gene targeting by EZH2 in endometrial carcinoma cells can inhibit the proliferation, migration and epithelial-interstitial transformation of endometrial carcinoma cells.
【作者單位】: 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】:上海市科委基金資助項(xiàng)目(No:20134226)
【分類(lèi)號(hào)】:R737.33

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本文編號(hào):2166873

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