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沉默Nek2基因?qū)β殉舶㏒KOV3細(xì)胞周期的影響

發(fā)布時(shí)間:2018-07-31 11:45
【摘要】:目的研究RNA干擾NIMA相關(guān)激酶2(Nek2)表達(dá)對(duì)卵巢癌細(xì)胞SKOV3細(xì)胞周期的影響及其相關(guān)的分子機(jī)制。方法將針對(duì)Nek2基因的siRNA轉(zhuǎn)染至SKOV3細(xì)胞中,采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)SKOV3細(xì)胞周期變化,并用Western blot技術(shù)檢測(cè)Nek2-siRNA轉(zhuǎn)染入卵巢癌SKOV3細(xì)胞48h后,與細(xì)胞周期相關(guān)的因子cyclinB1、CDK1及P27蛋白表達(dá)水平以及ERK1/2磷酸化水平的變化。結(jié)果空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組和RNA干擾組中處于G2/M期的細(xì)胞比例分別為13.72%、12.27%和1.56%,與兩對(duì)照組比較,處于G2/M期的干擾組細(xì)胞明顯減少(P0.05)。Nek2基因沉默后,與兩對(duì)照組比較,SKOV3細(xì)胞內(nèi)cyclinB1和CDK1的蛋白表達(dá)水平明顯下降,P27的蛋白表達(dá)水平明顯上調(diào),SKOV3細(xì)胞內(nèi)ERK1/2磷酸化水平明顯下降(P0.05)。結(jié)論沉默Nek2基因,可阻止卵巢癌SKOV3細(xì)胞啟動(dòng)有絲分裂,從而抑制其增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of RNA interference on the expression of NIMA associated kinase 2 (Nek2) in ovarian cancer cell line SKOV3 and its molecular mechanism. Methods siRNA targeting Nek2 gene was transfected into SKOV3 cells. The cell cycle changes of SKOV3 cells were detected by flow cytometry and Nek2-siRNA was detected by Western blot technique for 48 h after transfection into SKOV3 cells of ovarian cancer. The expression of cyclin B 1, CDK1 and P27 protein and the phosphorylation of ERK1/2 in the cell cycle. Results the percentage of cells in G _ 2 / M phase in blank control group, negative control group and RNA interference group were 13.72% and 1.56%, respectively. Compared with the two control groups, the number of cells in G _ 2 / M phase interference group was significantly decreased (P0.05). Compared with the control group, the expression of cyclinB1 and CDK1 in SKOV3 cells decreased significantly (P0.05). Conclusion silencing Nek2 gene can inhibit the proliferation of ovarian cancer SKOV3 cells by preventing mitosis.
【作者單位】: 重慶市合川區(qū)人民醫(yī)院婦科;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】:教育部博士點(diǎn)基金資助項(xiàng)目(20080631001) 重慶市衛(wèi)生局重點(diǎn)項(xiàng)目(2009-1-59)
【分類(lèi)號(hào)】:R737.31

【共引文獻(xiàn)】

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