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過表達和抑制miR-133a對JEG-3中HLA-G表達的影響

發(fā)布時間:2018-07-27 18:32
【摘要】:目的研究微小miR-133a在人絨癌細胞株(JEG-3)中對人類白細胞抗原G(HLA-G)的表達調控作用。方法用脂質體包裹化學合成的miR-133a前體分子并轉染JEG-3,從而過表達及抑制miR-133a,逆轉錄-聚合酶鏈反應技術(RT-PCR)檢測轉染后miR-133a及HLA-G在mRNA水平的表達情況。Western blot法檢測轉染miR-133a后細胞中HLA-G蛋白水平的表達。結果 JEG-3細胞中抑制miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表達增加;在JEG-3細胞中過表達miR-133a后HLA-G在mRNA及蛋白水平均表達下降,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論在JEG-3細胞中miR-133a能夠負性調控HLA-G的表達,進一步驗證了miR-133a與自然流產(chǎn)、子癇前期等疾病的相關性,并為進一步探索相關疾病機制及臨床診治提供了一定的實驗基礎。
[Abstract]:Objective to study the regulation of human leukocyte antigen G (HLA-G) expression in human choriocarcinoma cell line (JEG-3) by minimal miR-133a. Methods the chemically synthesized miR-133a precursor molecule was encapsulated by liposome and transfected into JEG-3 to overexpression and inhibit miR-133a. Reverse transcription-polymerase chain reaction (RT-PCR) was used to detect the expression of miR-133a and HLA-G at the mRNA level. Western blot assay was used to detect the miR-133a transfection. Expression of HLA-G protein in cells. Results after inhibition of miR-133a in JEG-3 cells, the expression of HLA-G in mRNA and protein increased, and the expression of HLA-G in mRNA and protein decreased after over-expression of miR-133a in JEG-3 cells, the difference was statistically significant (P0.05). Conclusion miR-133a can negatively regulate the expression of HLA-G in JEG-3 cells, which further verifies the correlation between miR-133a and spontaneous abortion, preeclampsia and other diseases, and provides a certain experimental basis for further exploring the mechanism of related diseases and clinical diagnosis and treatment.
【作者單位】: 西安醫(yī)學院第一附屬醫(yī)院婦科;西安交通大學醫(yī)學部法醫(yī)學院;中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院北京協(xié)和醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】:陜西省教育廳科研計劃項目(編號:12JK0767)
【分類號】:R714.2

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本文編號:2148771

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