本文選題：人子宮內(nèi)膜細(xì)胞 + HCG��； 參考：《現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展》2015年12期

【摘要】：目的:探討人子宮內(nèi)膜細(xì)胞體外培養(yǎng)模型中,HCG對(duì)VEGF表達(dá)的調(diào)控作用和機(jī)制。方法:采用機(jī)械分離加梯度離心法分別獲得腺上皮與基質(zhì)細(xì)胞進(jìn)行體外原代細(xì)胞混合培養(yǎng);實(shí)驗(yàn)設(shè)對(duì)照組、HCG組(對(duì)照組使用常規(guī)DF/12培養(yǎng)液提取總蛋白;HCG組在DF/12培養(yǎng)液中加終濃度為20U/ml HCG)。采用Q-PCR測(cè)定子宮內(nèi)膜細(xì)胞中VEGF mRNA表達(dá)水平。免疫組化或熒光法進(jìn)行LH-R和VEGF蛋白質(zhì)定位表達(dá),Western blot法測(cè)定蛋白半定量表達(dá)。結(jié)果:子宮內(nèi)膜腺上皮與基質(zhì)細(xì)胞均存在LH/HCG-R和VEGF蛋白表達(dá)。HCG對(duì)子宮內(nèi)膜細(xì)胞VEGF蛋白的峰值作用時(shí)間點(diǎn)為24h。與對(duì)照組相比,20IU/ml HCG體外干預(yù)24h后,子宮內(nèi)膜細(xì)胞VEGF mRNA和蛋白質(zhì)水平均顯著上調(diào)(Q-PCR:1 vs 2.0132±0.6024;WB:0.4069±0.1897 vs 0.7781±0.1651)(P均0.05)。結(jié)論:成功建立了人子宮內(nèi)膜細(xì)的體外培養(yǎng)模型,并完成HCG的干預(yù)實(shí)驗(yàn)。HCG與HCG/LH-R結(jié)合后上調(diào)子宮內(nèi)膜細(xì)胞VEGF的基因和蛋白質(zhì)水平表達(dá)。
[Abstract]:Aim: to investigate the regulation and mechanism of HCG on VEGF expression in human endometrial cells in vitro. Methods: the glandular epithelium and stromal cells were obtained by mechanical separation and gradient centrifugation respectively. The control group was established as HCG group (the control group used the conventional DF- / 12 medium to extract total protein HCG and the final concentration of HCG was 20U / ml HCG in DF- / 12 medium). The expression of VEGF mRNA in endometrial cells was measured by Q-PCR. The expression of LH-R and VEGF protein was detected by immunohistochemistry or fluorescence method. Western blot method was used to detect the semi-quantitative expression of LH-R and VEGF protein. Results: the expression of LH / HCG-R and VEGF protein in endometrial glandular epithelium and stromal cells. Compared with the control group, the mRNA and protein levels of VEGF in endometrial cells were significantly up-regulated (Q-PCR: 1 vs 2.0132 鹵0.6024 WB: 0.4069 鹵0.1897 vs 0.7781 鹵0.1651) after intervention with 20IUU / ml HCG for 24 hours in vitro. Conclusion: the model of human endometrial fine culture in vitro was successfully established, and the HCG intervention experiment. HCG combined with HCG / LH-R upregulated the expression of VEGF gene and protein in endometrial cells.
【作者單位】： 中山大學(xué)附屬第一醫(yī)院生殖中心;湖北醫(yī)藥學(xué)院附屬人民醫(yī)院生殖中心;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No:2008-30,872,762)
【分類號(hào)】：R714

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本文編號(hào)：2086303