RUNX2在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)及其siRNA對Hela229細(xì)胞RUNX2表達(dá)及細(xì)胞增殖與凋亡的影響
本文選題:宮頸癌 + Hela; 參考:《鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年06期
【摘要】:目的:探討RUNX2蛋白在宮頸鱗癌組織中的表達(dá)情況及RUNX2 siRNA對宮頸鱗癌Hela229細(xì)胞RUNX2基因表達(dá)、細(xì)胞增殖及凋亡的影響。方法:應(yīng)用免疫組化技術(shù)檢測50例宮頸鱗癌、30例宮頸高級別鱗狀上皮內(nèi)病變(HSIL)及30例正常宮頸黏膜組織中RUNX2蛋白的表達(dá)情況,并分析宮頸鱗癌組織中RUNX2蛋白表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。設(shè)計(jì)合成RUNX2 siRNA,通過脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)染至Hela229細(xì)胞,同時設(shè)立空白對照(不轉(zhuǎn)染)和陰性對照(轉(zhuǎn)染非特異性siRNA)細(xì)胞組。轉(zhuǎn)染24、48、72 h后,采用MTT法檢測各組細(xì)胞增殖,計(jì)算增殖抑制率;轉(zhuǎn)染72 h后,采用RT-PCR及Western blot技術(shù)檢測細(xì)胞中RUNX2 mRNA及蛋白的表達(dá),采用流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果:宮頸鱗癌組織中RUNX2陽性表達(dá)率高于HSIL及正常宮頸組織(P0.001);宮頸鱗癌組織中RUNX2蛋白的表達(dá)與腫瘤的臨床分期有關(guān)(P=0.004)。與空白對照組和陰性對照組比較,RUNX2 siRNA組Hela229細(xì)胞增殖抑制率、RUNX2 mRNA及蛋白的表達(dá)均降低(P0.05),細(xì)胞凋亡率升高(P0.05)。結(jié)論:RUNX2基因的高表達(dá)與宮頸鱗癌細(xì)胞的增殖關(guān)系密切。
[Abstract]:Objective: to investigate the expression of RUNX2 protein in cervical squamous cell carcinoma (SCC) and the effect of RUNX2 siRNA on RUNX2 gene expression, cell proliferation and apoptosis in Hela229 cells. Methods: the expression of RUNX2 protein in 30 cases of high grade squamous intraepithelial lesions (HSIL) of cervix and 30 cases of normal cervical mucosa were detected by immunohistochemical technique. The relationship between the expression of RUNX2 protein and clinicopathological features of cervical squamous cell carcinoma was analyzed. RUNX2 siRNAs were designed and synthesized and transfected into Hela229 cells by liposome. After transfection for 72 h, the proliferation of the cells was detected by MTT assay, and the expression of RUNX2 mRNA and protein was detected by RT-PCR and Western blot, and apoptosis was detected by flow cytometry. Results: the positive expression rate of RUNX2 in cervical squamous cell carcinoma was higher than that in HSIL and normal cervix (P0.001), and the expression of RUNX2 protein was related to the clinical stage of cervical squamous cell carcinoma (P0. 004). Compared with the control group and the negative control group, the inhibitory rate of proliferation and the expression of RUNX2 mRNA and protein of Hela229 cells in RUNX2 siRNA group were decreased (P0.05), and the apoptosis rate was increased (P0.05). Conclusion the high expression of RUNX2 gene is closely related to the proliferation of cervical squamous carcinoma cells.
【作者單位】: 鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院病理科;廣東醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院病原生物實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:河南省高等學(xué)校重點(diǎn)科研計(jì)劃項(xiàng)目17A310027
【分類號】:R737.33
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,本文編號:2072427
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