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CSA對(duì)流產(chǎn)模型鼠和先兆流產(chǎn)患者Th17、IL17mRNA及妊娠結(jié)局的調(diào)控作用研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-25 21:22

  本文選題:流產(chǎn) + 環(huán)孢素A; 參考:《青島大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:目的:研究妊娠早期注射環(huán)孢素A(CSA)對(duì)流產(chǎn)模型小鼠Th17細(xì)胞及妊娠結(jié)局的作用及白介素-17(IL-17)在早期自然流產(chǎn)發(fā)展中的作用及其臨床意義。方法:構(gòu)建正常妊娠小鼠模型(A組)及自然流產(chǎn)模型(B組),B組再隨機(jī)分為5組,其中BO組為自然流產(chǎn)組,B1-4組為給藥組)。在妊娠第4天給予B1、B2、B3、B4各組孕鼠行單次腹腔注射CSA,劑量分別為1、5、10、15mg/kg,于妊娠第14天取胚胎、外周血及脾臟組織。①計(jì)算各組孕鼠胚胎吸收率;②ELISA法測(cè)定IL-17、IL-6、IL-23在孕鼠外周血血清中的含量;③流式細(xì)胞儀檢測(cè)孕鼠脾臟組織中CD4+IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例;④qPCR檢測(cè)孕鼠母胎界面RORyt mRNA的相對(duì)表達(dá)量;采用ELISA法分別檢測(cè)先兆流產(chǎn)、難免流產(chǎn)、正常妊娠婦女、正常非孕婦女、先兆流產(chǎn)保胎成功后繼續(xù)妊娠婦女及保胎失敗婦女血清中IL-17濃度。采用化學(xué)發(fā)光免疫分析法(CLIA)分別測(cè)定先兆流產(chǎn)婦女、難免流產(chǎn)婦女和正常妊娠婦女血清孕酮水平;并采用實(shí)時(shí)PCR(real-time PCR)技術(shù)分別檢測(cè)難免流產(chǎn)和正常妊娠者子宮蛻膜組織中IL-17mRNA的表達(dá)水平。結(jié)果:1、與正常妊娠組相比,自然流產(chǎn)組胚胎吸收率明顯升高(P=0.03),外周血血清中IL-17、IL-6,IL-23濃度均明顯升高(P均0.05),脾臟組織中CD4+IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例明顯升高(P0.05),母胎界面RORytmRNA表達(dá)量增高顯著(P0.01)。2、與自然流產(chǎn)組相比,給藥組胚胎吸收率均有所下降(B2、B3組下降P0.05);血清中IL-17、IL-6、IL-23均有不同程度降低;脾臟組織中CD4+IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例均有不同程度下降,B2、B3組下降顯著(P0.05);孕鼠母胎界面RORγt mRNA表達(dá)量較自然流產(chǎn)組均顯著下降(P值均0.05)。3、與正常妊娠組相比,給藥組胚胎吸收率、血清細(xì)胞因子的濃度、脾臟組織中CD4+IL-17A+/CD4+細(xì)胞比例和孕鼠母胎界面RORyt mRNA表達(dá)量均無明顯差異(P 均0.05)。4、正常妊娠組、正常非孕組、先兆流產(chǎn)組及難免流產(chǎn)組血清中IL-17濃度逐漸升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);相對(duì)于正常妊娠組及正常非孕組,難免流產(chǎn)組血清IL-17濃度顯著升高(P0.05),相對(duì)于先兆流產(chǎn)組,難免流產(chǎn)組IL-17呈上升趨勢(shì),相對(duì)于正常妊娠組和正常非孕組,先兆流產(chǎn)組血清IL17濃度呈上升趨勢(shì),但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P0.05);5、難免流產(chǎn)組患者的蛻膜組織中IL-17 mRNA的表達(dá)水平明顯高于正常妊娠組(P0.05);6、正常妊娠組、難免流產(chǎn)組蛻膜組織中IL-17的表達(dá)量和外周血中IL-17濃度存在正相關(guān)性(P=0.049,P=0.034),且相關(guān)系數(shù)不佳(r=0.499,r=0.475);7、先兆流產(chǎn)保胎后,繼續(xù)妊娠組血清IL-17含量較治療前下降顯著(P0.05);而保胎失敗組患者血清IL-17濃度較治療前有上升趨勢(shì);8、妊娠患者血清IL-17與血清孕酮水平的相關(guān)性為低度負(fù)相關(guān)(r=-0.498、-0.362、-0.435,P0.05)。結(jié)論:①流產(chǎn)可導(dǎo)致Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子異常增加。②孕早期腹腔注射CSA可抑制流產(chǎn)模型小鼠體內(nèi)Th17細(xì)胞的分化和功能,改善妊娠結(jié)局。③CSA對(duì)流產(chǎn)模型小鼠體內(nèi)Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子和妊娠結(jié)局的影響并未呈現(xiàn)出明顯的劑量依賴性。綜上提示CSA可能成為治療妊娠失敗的有效藥物,但安全有效的劑量仍需進(jìn)一步研究。④IL-17可能通過介導(dǎo)炎癥細(xì)胞及介質(zhì)聚集在母-胎界面,從而引起母-胎免疫耐受失衡,在流產(chǎn)的發(fā)生與發(fā)展中發(fā)揮一定作用;⑤血清IL-17可能主要來源于蛻膜;⑥妊娠早期孕酮可能通過孕激素受體抑制TH17細(xì)胞分泌IL-17,進(jìn)而維持機(jī)體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定及母胎界面免疫耐受的平衡,有利于妊娠的進(jìn)展。
[Abstract]:Objective : To study the effect of early pregnancy injection of cyclosporin A ( CSA ) on Th17 cells and outcome of pregnancy and the clinical significance of interleukin - 17 ( IL - 17 ) in early spontaneous abortion . Methods : The normal pregnant mice model ( group A ) and spontaneous abortion model ( group B ) were constructed . The serum levels of IL - 17 , IL - 17 , IL - 6 and IL - 23 in normal pregnant women were significantly increased ( P = 0 . 05 ) , and the expression of IL - 17 , IL - 6 and IL - 23 in normal pregnant women were significantly lower than those in normal pregnancy group ( P < 0 . 05 ) . Compared with normal pregnancy group and normal pregnancy group , the levels of IL - 17 mRNA in decidual tissue were significantly higher than those in normal pregnancy group ( P = 0.049 , P = 0.034 ) , and the correlation coefficient was not good ( P = 0.049 , r = 0.434 ) . Conclusion : 鈶,

本文編號(hào):2067536

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