本文選題：卵巢癌 + 干細(xì)胞��； 參考：《大連醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：背景:卵巢癌是婦科三大惡性腫瘤之一,在我國的發(fā)病率居第三位,目前卵巢癌是婦科腫瘤中死亡率最高的惡性腫瘤[1]。造成卵巢癌高死亡率的主要原因是由于70%的患者診斷時都已是中晚期,這些患者又會有70%以上出現(xiàn)腫瘤的復(fù)發(fā);并且很多患者發(fā)生耐藥復(fù)發(fā)而最終導(dǎo)致死亡[2]。近年來相關(guān)研究提出了卵巢癌干細(xì)胞的觀點,認(rèn)為卵巢癌干細(xì)胞的存在可能是卵巢癌耐藥復(fù)發(fā)的重要因素之一,干細(xì)胞的存在增強了腫瘤的形成能力與耐藥性[3]。迄今為止,卵巢癌干細(xì)胞的研究一直具有挑戰(zhàn)性,如何鑒定這類具有特殊生物學(xué)行為的細(xì)胞群成為目前干細(xì)胞研究的重點和難點;所以尋找到不同腫瘤干細(xì)胞表面表達的不同生物標(biāo)記物成為鑒定干細(xì)胞的重要方法之一。目前關(guān)于卵巢癌干細(xì)胞相關(guān)標(biāo)記物的研究主要有CD133、CD24、CD44、CD117和ALDH1等。相關(guān)文獻報道顯示[4],目前CD133、CD44以及CD117已被廣泛認(rèn)為是卵巢癌干細(xì)胞的特異性標(biāo)記物,而CD24及ALDH1并沒有明確定論。ALDH1在許多實體瘤中已經(jīng)被認(rèn)為是腫瘤干細(xì)胞的標(biāo)記物,而在卵巢癌干細(xì)胞中卻尚無定論,但是目前在部分人類卵巢癌組織與細(xì)胞系中都能檢測到ALDH1的表達,并且在卵巢癌細(xì)胞系中,ALDH1表達的細(xì)胞更具有化學(xué)藥物抵抗性,與ALDH1陰性細(xì)胞相比,ALDH1表達的腫瘤細(xì)胞生長更快[5]。所以ALDH1是否也能夠和CD133一樣成為卵巢癌干細(xì)胞的特異性標(biāo)記物,成為目前研究的熱點。目前研究干細(xì)胞常用的實驗方法是無血清培養(yǎng)法誘導(dǎo)培養(yǎng)具有干細(xì)胞特性的懸浮細(xì)胞球,因此本實驗通過該方法培養(yǎng)具有干細(xì)胞特性的懸浮細(xì)胞球,采用免疫熒光檢測懸浮細(xì)胞球中CD133、ALDH1的表達情況,與細(xì)胞系比較二者表達的差異,從而初步推斷ALDH1能否成為卵巢癌干細(xì)胞的標(biāo)記物。目的:從細(xì)胞系及耐藥細(xì)胞株中通過無血清法培養(yǎng)出懸浮細(xì)胞球,即卵巢癌干細(xì)胞;檢測CD133、ALDH1在懸浮細(xì)胞球與細(xì)胞系、耐藥細(xì)胞株中的表達情況,推斷ALDH1能否與CD133一致成為卵巢癌干細(xì)胞有優(yōu)勢的標(biāo)記物。方法:選擇卵巢癌細(xì)胞系SKOV3、Hey-A8、OVCAR-8,篩選出成球較好的細(xì)胞系。并建立其耐藥細(xì)胞株Hey-A8-DDP、OVCAR-8-DDP。用Western-blot的方法檢測卵巢癌細(xì)胞系Hey-A8、OVCAR-8及耐藥株Hey-A8-DDP、OVCAR-8-DDP中CD133、ALDH1的表達。將卵巢癌細(xì)胞系Hey-A8、OVCAR-8及耐藥細(xì)胞株Hey-A8-DDP、OVCAR-8-DDP通過無血清培養(yǎng)法誘導(dǎo)培養(yǎng)懸浮細(xì)胞球。采用免疫熒光染色法分別檢測細(xì)胞系和耐藥細(xì)胞株培養(yǎng)出來的懸浮細(xì)胞球CD133、ALDH1的表達,并且與細(xì)胞系比較二者表達的差異。結(jié)果:1.卵巢癌細(xì)胞系Hey-A8和OVCAR-8及其耐藥細(xì)胞株Hey-A8-DDP、OVCAR-8-DDP通過無血清培養(yǎng)法成功培養(yǎng)出懸浮球細(xì)胞,觀察至第8天,與細(xì)胞系Hey-A8、OVCAR-8相比,其對應(yīng)的耐藥細(xì)胞株的懸浮細(xì)胞球體積更大,形態(tài)更規(guī)則,成球性更強。2、卵巢癌耐藥細(xì)胞株Hey-A8-DDP中ALDH1的表達較卵巢癌細(xì)胞系Hey-A8高。卵巢癌細(xì)胞系OVCAR-8及耐藥細(xì)胞株OVCAR-8-DDP中ALDH1無明顯表達;上述細(xì)胞系及耐藥細(xì)胞株均未檢測到CD133的表達。3、卵巢癌細(xì)胞系Hey-A8、OVCAR-8及其耐藥細(xì)胞株Hey-A8-DDP、OVCAR-8-DDP培育出的懸浮細(xì)胞球經(jīng)免疫熒光染色后,CD133、ALDH1均明顯表達,而在兩種耐藥細(xì)胞株的懸浮細(xì)胞球中二者均超過相對應(yīng)的細(xì)胞系而呈更高表達;同時CD133、ALDH1在OVCAR-8細(xì)胞系及耐藥細(xì)胞株OVCAR-8-DDP中及其細(xì)胞球的差別的更為明顯。結(jié)論:1、卵巢癌細(xì)胞系Hey-A8和OVCAR-8及耐藥細(xì)胞株Hey-A8-DDP、OVCAR-8-DDP中均篩選出卵巢癌干細(xì)胞,且在耐藥細(xì)胞株中卵巢癌干細(xì)胞更為富集,從而推斷卵巢癌干細(xì)胞的存在是卵巢癌耐藥復(fù)發(fā)的重要原因之一。2、ALDH1在培育出的能夠代表卵巢癌干細(xì)胞的懸浮細(xì)胞球中高表達,而在細(xì)胞系與耐藥細(xì)胞株中部分表達或不表達,提示ALDH1可能與CD133一樣,成為卵巢癌干細(xì)胞有意義的生物學(xué)標(biāo)記物。3、CD133、ALDH1在所有培育出的懸浮細(xì)胞球中均共同高表達,二者聯(lián)合檢測,可增加卵巢癌干細(xì)胞篩選的成功率。
[Abstract]:Background : Ovarian cancer is one of the three major malignant tumors of gynecology . In China , the incidence of ovarian cancer is the third , and ovarian cancer is one of the most common malignant tumors in gynecological tumors . The primary cause of high mortality in ovarian cancer was that 70 % of patients were diagnosed with late middle and late stages , with more than 70 % of these patients experiencing recurrent tumor recurrence , and many patients experienced drug - resistant relapse and eventually led to death . In recent years , the research of ovarian cancer stem cells suggests that the presence of ovarian cancer stem cells may be one of the most important factors in ovarian cancer recurrence , and the presence of stem cells enhances the formation and drug resistance of ovarian cancer cells . So far , the research of ovarian cancer stem cells has been challenging . How to identify these cells with special biological behavior has become the focus and difficulty of stem cell research . The expression of CD133 and ALDH1 in ovarian cancer cell lines were investigated by means of immunofluorescence staining . The ovarian cancer stem cells were screened from OVCAR - 8 - DDP , and the ovarian cancer stem cells were more enriched in the drug resistant cell lines .
【學(xué)位授予單位】：大連醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R737.31

【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 方峻,魏文寧,劉仲萍,宋善俊;人組織因子基因表達載體的構(gòu)建及其在人卵巢癌細(xì)胞系中的表達[J];中國實驗血液學(xué)雜志;2003年06期

2 吳尚輝,鄧朝暉,祝斌,顧煥華,羅學(xué)濱,祝和成;一株新的卵巢癌細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性分析[J];實用預(yù)防醫(yī)學(xué);2005年01期

3 李曉艷;王澤華;;卵巢癌細(xì)胞系中環(huán)氧化酶2的表達研究[J];邯鄲醫(yī)學(xué)高等�？茖W(xué)校學(xué)報;2006年02期

4 程繼文;蔡捷;鄺曉聰;陳心秋;唐步堅;黃清華;劉燕;李力;;腹水來源卵巢癌細(xì)胞系的建立及其生物學(xué)特性[J];癌癥;2009年03期

5 徐紅梅;夏美慧;梁作文;鐘加滕;趙雪儉;何津;;卵巢癌細(xì)胞系中差異表達蛋白的相關(guān)性研究[J];中國婦幼保健;2010年07期

6 盧建,張金山,牟瀚舟,許沈華;糖皮質(zhì)激素對人卵巢癌細(xì)胞系增殖的抑制作用[J];中華婦產(chǎn)科雜志;1996年03期

7 徐明娟,劉宇健,宋亮年,王昭梅,張瓊;視黃酸對人卵巢癌細(xì)胞系3AO增殖分化的影響[J];第二軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;1997年05期

8 顧琳慧;鄭智國;陳魯;許沈華;;高低轉(zhuǎn)移人乳頭狀漿液性卵巢癌細(xì)胞系蛋白表達差異及其意義[J];中國實用婦科與產(chǎn)科雜志;2009年11期

9 王晶;雷利娜;尹洪麗;;透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白1在人卵巢癌細(xì)胞系中表達及其與紫杉醇敏感性的關(guān)系[J];中國實用婦科與產(chǎn)科雜志;2012年01期

10 王建六，錢和年，，李文錦，馮捷;人卵巢癌細(xì)胞系在不同品系免疫小鼠腎包膜下生長規(guī)律的探討[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展;1995年04期

相關(guān)會議論文 前10條

1 鄭智國;高

本文編號：2025483