本文選題：子宮內(nèi)膜異位癥 + 半乳糖凝集素-1��； 參考：《南方醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：背景子宮內(nèi)膜異位癥(EMs)是指子宮內(nèi)膜基質(zhì)及上皮在宮腔以外的位置生長,是一種依賴雌激素的慢性炎癥性疾病。EMs具有侵襲性、復(fù)發(fā)性等典型的惡性腫瘤生物學(xué)特征,提示我們二者可能存在相同的發(fā)病機制。血管形成及炎癥在EMs發(fā)生發(fā)展過程中具有重要的作用。半乳糖凝集素-1(Gal-1)在惡性腫瘤中得到廣泛研究,其在惡性腫瘤組織中高表達(dá),可分布于細(xì)胞內(nèi)外發(fā)揮功能,參與細(xì)胞粘附、血管形成等生理病理學(xué)過程。硫代二半乳糖苷(TDG)作為其特異性的抑制劑,在多種疾病中得以證明可以負(fù)向調(diào)節(jié)血管形成、改善炎癥狀態(tài)、平衡免疫失穩(wěn)。本研究通過建立EMs大鼠模型,研究Gal-1在EMs大鼠異位內(nèi)膜中的表達(dá),同時觀察TDG對EMs的治療作用,并以EMs血管形成及炎癥為主要切入點,初步探索TDG治療EMs的作用機制。目的1.建立大鼠內(nèi)異癥模型,研究Gal-1在異位內(nèi)膜中的表達(dá)。2.用藥后觀察TDG對EMs的治療作用。3.研究藥物對異位灶血管生成及炎癥的影響。4.研究藥物對Gal-1/ERK信號通路的作用。5.研究藥物對性激素水平的影響。方法1.陰道涂片觀察大鼠動情周期。2.在大鼠動情期采用自體腹壁移植法建立模型。假手術(shù)組僅去掉左側(cè)子宮角。28天后再次開腹觀察。造模成功標(biāo)準(zhǔn):①大體標(biāo)準(zhǔn):腹壁移植物生長為橢圓囊泡狀結(jié)構(gòu),內(nèi)含清亮或咖啡色液體,表面及周圍有血管形成。②病理學(xué)標(biāo)準(zhǔn):腹壁移植物有子宮內(nèi)膜上皮及基質(zhì)結(jié)構(gòu)。3.將造模大鼠隨機分為模型組及給藥組,取模型組異位移植物及假手術(shù)組右側(cè)子宮內(nèi)膜,分別采用免疫組化、熒光實時定量聚合酶鏈鎖反應(yīng)、免疫印跡(WB)觀察Gal-1在組織中的表達(dá)。給藥組隨機分為PBS對照組、低劑量TDG組(20mg/kg體重)、高劑量TDG組(80mg/kg體重),連續(xù)給藥兩周,每兩天一次,后再次開腹觀察異位內(nèi)膜生長情況。4.測量異位病灶體積大小,觀察給藥前后體積變化,WB檢測Bcl-2表達(dá),TUNEL染色凋亡細(xì)胞。5.WB分析血管生成素-2(Ang-2)、基質(zhì)金屬蛋白酶-9(MMP9)、Elisa檢測血清中腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的表達(dá)。6.WB分析Gal-1與磷酸化ERK的表達(dá)。7.放射免疫法測定大鼠血清中的性激素水平。結(jié)果1.所有大鼠均呈現(xiàn)每4-5天1次的連續(xù)的動情周期變化。2.33只大鼠中,94%的大鼠肉眼見異位種植物生長為囊泡狀結(jié)構(gòu),內(nèi)含清亮或咖啡色液體,表面及周圍見血管形成,鏡下可見上皮層和基質(zhì)層。3.Gal-1在異位內(nèi)膜及假手術(shù)組正常內(nèi)膜中均只在基質(zhì)層中表達(dá);異位內(nèi)膜中,Gal-1主要表達(dá)在異位內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞外基質(zhì),正常內(nèi)膜中,Gal-1主要表達(dá)于子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞的胞核中。4.異位內(nèi)膜中Gal-1 mRNA及蛋白相對表達(dá)量均高于正常內(nèi)膜,二者均P0.05。5.給藥后,對照組大鼠的內(nèi)異癥病灶與給藥前體積相比,無顯著性差異(P0.05);低劑量組和高劑量組體積均縮小,給藥前后體積差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.05)。6.Bel-2的表達(dá)隨藥物濃度升高而降低,高劑量組、低劑量組分別與對照組相比,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.01),但高、低劑量組之間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。TUNEL染色三組之間高劑量組凋亡指數(shù)明顯高于對照組(均P0.01)。7.與對照組相比,Ang-2、MMP9的表達(dá)隨藥物濃度升高而逐漸降低,二者均僅高劑量組與對照組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(均P0.01)。血清TNF-α濃度三組之間僅高劑量組與對照組之間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。8.給藥組各組Gal-1的蛋白表達(dá)無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05),ERK磷酸化的下降程度在三組之間僅高劑量組與對照組的差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.01)。9.用藥14天后,給藥組各組間E2,P,FSH,LH無明顯差異(P0.05)。結(jié)論1.大鼠EMs模型異位病灶存在Gal-1高表達(dá),可作為有效的研究模型。2.運用TDG后病灶縮小,抗凋亡基因Bcl-2表達(dá)減少,細(xì)胞凋亡增多,提示TDG治療EMs有效。3.TDG減少Ang-2、MMP9的表達(dá),降低血清中TNF-a的濃度,可能對內(nèi)異癥中的血管形成及炎癥有抑制作用。4.TDG可能通過占據(jù)Gal-1的糖結(jié)合域位點來抑制Gal-1的功能,從而影響ERK的磷酸化。5.TDG對性激素水平無影響,對下丘腦-垂體一性腺軸無抑制作用。
[Abstract]:Objective 1 . To study the effect of TDG on ectopic endometrium , and to observe the effect of TDG on endometriosis . Compared with the control group , there was no significant difference between the two groups ( P0.05 ) .
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R711.71

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 劉海彬;;大鼠子宮內(nèi)膜異位癥的細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶信號通路參與機制及來曲唑的改善作用[J];中國計劃生育和婦產(chǎn)科;2015年08期

2 鎮(zhèn)瀾;劉義;呂立群;陳宏;海娜;廉紅梅;滿奕村;劉娜;;17β-雌二醇對子宮內(nèi)膜異位癥患者在位子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞ERK1/2信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路活化的影響[J];華中科技大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2010年04期

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本文編號：2015376