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慢病毒載體介導(dǎo)的RNAi技術(shù)抑制RhoC基因在卵巢癌細(xì)胞中表達(dá)的體外實(shí)驗(yàn)研究

發(fā)布時(shí)間:2018-06-13 08:30

  本文選題:RNA干擾 + 慢病毒 ; 參考:《吉林大學(xué)》2014年碩士論文


【摘要】:目的: 構(gòu)建慢病毒介導(dǎo)的能夠穩(wěn)定沉默卵巢癌SKOV3細(xì)胞中RhoC基因的干擾載體,觀察其對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞內(nèi)RhoC基因表達(dá)的抑制作用。 材料和方法: 將產(chǎn)生RhoC miRNA分子的攜帶綠色熒光蛋白(GFP)的重組慢病毒感染卵巢癌SKOV3細(xì)胞后,用嘌呤霉素篩選穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞系。應(yīng)用熒光定量PCR法檢測(cè)SKOV3細(xì)胞中的RhoC mRNA。 結(jié)果: 成功構(gòu)建了特異性干擾載體,將其轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞后,干擾組細(xì)胞中RhoC mRNA的表達(dá)率較空白對(duì)照組顯著降低。 結(jié)論: 構(gòu)建的重組慢病毒RhoC shRNA干擾載體能有效抑制SKOV3細(xì)胞中RhoC mRNA的表達(dá),,具有較高的沉默效率。
[Abstract]:Aim: to construct an interference vector mediated by lentivirus to stabilize the expression of RhoC gene in ovarian cancer SKOV3 cells and to observe its inhibitory effect on the expression of RhoC gene in ovarian cancer SKOV3 cells. Materials and methods: the recombinant lentivirus carrying green fluorescent protein (GFP), which produced RhoC miRNA, was infected with ovarian cancer cell line SKOV3, and the stable expressed cell line was screened by purine mycin. RhoC mRNA in SKOV3 cells was detected by fluorescence quantitative PCR. Results: the specific interference vector was successfully constructed and transfected into SKOV3 cells. The expression rate of RhoC mRNA in the interference group was significantly lower than that in the control group. Conclusion: the recombinant lentivirus RhoC shRNA interference vector can effectively inhibit the expression of RhoC mRNA in SKOV3 cells and has a high silencing efficiency.
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號(hào)】:R737.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2013383

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