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miR-137過表達滋養(yǎng)細胞對血管內皮細胞生物學功能的調節(jié)作用

發(fā)布時間:2018-06-09 23:37

  本文選題:miR- + 滋養(yǎng)細胞。 參考:《上海交通大學學報(醫(yī)學版)》2017年10期


【摘要】:目的·探討滋養(yǎng)細胞過表達miR-137后對血管內皮細胞生物學功能的影響。方法·構建Up-LV-miR-137和LV-miR-NC慢病毒載體,分別轉染滋養(yǎng)細胞HTR-8/SVneo后通過PCR驗證轉染效率。成功轉染后的滋養(yǎng)細胞與血管內皮細胞共培養(yǎng),或以轉染后滋養(yǎng)細胞培養(yǎng)基上清液培養(yǎng)血管內皮細胞,CCK8法、劃痕試驗和Transwell遷移試驗分別檢測內皮細胞的增殖活性、遷移能力和對單核細胞U937的招募能力。結果·成功獲得miR-137過表達滋養(yǎng)細胞。CCK8細胞活性檢測結果顯示,與miR-137過表達滋養(yǎng)細胞共培養(yǎng)或以其培養(yǎng)基上清液培養(yǎng),血管內皮細胞增殖活性顯著降低,高糖環(huán)境下增殖活性進一步降低。劃痕試驗中,miR-137過表達細胞培養(yǎng)基使得內皮細胞劃痕修復速度減慢。Transwell遷移試驗結果發(fā)現(xiàn),內皮細胞與miR-137過表達滋養(yǎng)細胞共培養(yǎng)后,該組單核細胞穿過小室的細胞數(shù)更多,趨化指數(shù)更高。結論·miR-137過表達滋養(yǎng)細胞可調節(jié)血管內皮細胞的生物學功能,降低增殖活性和遷移能力,增強其對單核細胞的招募能力。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of overexpression of miR-137 in trophoblast on the biological function of vascular endothelial cells. Methods Up-LV-miR-137 and LV-miR-NC lentivirus vectors were constructed and transfected into trophoblast HTR-8 / SVneo, respectively. The transfection efficiency was verified by PCR. Successfully transfected trophoblast cells co-cultured with vascular endothelial cells, or cultured vascular endothelial cells by CCK8 medium supernatant of transfected trophoblastic medium, the proliferation activity of endothelial cells was detected by scratch test and Transwell migration test, respectively. Migration and recruitment of monocyte U937. Results the activity of miR-137 overexpression trophoblast. CCK8 cells were successfully obtained. The results showed that co-culture with miR-137 over-expressed trophoblastic cells or culture in supernatant of miR-137 culture medium significantly decreased the proliferation activity of vascular endothelial cells. The proliferative activity decreased further in high sugar environment. In scratch test, the culture medium of overexpression cells of miR-137 slowed down the rate of scar repair of endothelial cells. Transwell migration test showed that after co-culture of endothelial cells and miR-137 overexpression trophoblast cells, the number of monocytes passing through the chamber was more. The chemotaxis index is higher. Conclusion MiR-137 overexpression trophoblast can regulate the biological function of vascular endothelial cells, decrease proliferation activity and migration ability, and enhance its ability to recruit monocytes.
【作者單位】: 上海交通大學附屬第六人民醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【分類號】:R714.256

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本文編號:2001218

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