SB203580對氧化應(yīng)激下人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)功能的影響
本文選題:p絲裂原活化蛋白激酶 + SB; 參考:《上海交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2017年02期
【摘要】:目的·探討p38絲裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)抑制劑SB203580對缺氧/復(fù)氧條件下人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。方法·選取體外培養(yǎng)的早孕絨毛外植體和人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞株HTR8/SVneo,根據(jù)干預(yù)方式的不同各分為4組:對照組、SB203580組(阻斷p38 MAPK信號通路)、缺氧/復(fù)氧組(氧化應(yīng)激模型體外模擬子癇前期)和SB203580+缺氧/復(fù)氧組。觀察SB203580對氧化應(yīng)激下早孕絨毛外植體中絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。Western blotting檢測HTR8/SVneo中p38 MAPK蛋白表達(dá)及磷酸化水平,Transwell實驗觀察細(xì)胞侵襲和遷移能力,明膠酶譜法和ELISA法分別檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清液中基質(zhì)金屬蛋白酶2/9(MMP2/9)的活性及可溶性fms樣酪氨酸激酶-1(s Flt-1)和可溶性內(nèi)皮因子(s Eng)的水平。結(jié)果·SB203580可促進(jìn)氧化應(yīng)激下早孕絨毛外植體中絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞的外生性遷移。缺氧/復(fù)氧可使HTR8/SVneo細(xì)胞的遷移和侵襲能力下降,p38 MAPK磷酸化水平升高,s Flt-1和s Eng分泌增加;而SB203580可使氧化應(yīng)激下HTR8/SVneo中p38 MAPK磷酸化水平降低,細(xì)胞遷移和侵襲能力提高,細(xì)胞培養(yǎng)上清液中MMP2/9活性增加、s Flt-1和s Eng的分泌量減少。結(jié)論·SB203580對氧化應(yīng)激下人絨毛外滋養(yǎng)細(xì)胞的生物學(xué)功能具有保護作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effects of p38 mitogen-activated protein kinase (p38) MAPK inhibitor SB203580 on the biological function of human extracellular trophoblastic cells under hypoxia / reoxygenation. Methods Human trophoblastic cell line HTR8 / SVneowas cultured in vitro and divided into 4 groups: control group SB203580 (blocking p38 MAPK signaling pathway) and hypoxia / reoxygenation group (oxidative stress model). Type A in vitro mimic preeclampsia) and SB203580 hypoxia / reoxygenation group. To observe the effect of SB203580 on the biological function of extracellular trophoblastic cells in early pregnancy under oxidative stress. Western blotting was used to detect the expression of p38 MAPK protein and phosphorylation level in HTR8/SVneo. The activity of matrix metalloproteinase 2 / 9 MMP2 / 9) and the levels of soluble fms like tyrosine kinase-1 (Flt-1) and soluble endothelial factor (SEC) in supernatant of cell culture were detected by gelatin zymogram and ELISA method, respectively. Results SB203580 could promote the exophytic migration of trophoblast in early pregnancy villi explants under oxidative stress. Hypoxia / reoxygenation decreased the migration and invasion ability of HTR8/SVneo cells and increased the phosphorylation level of p38 MAPK and the secretion of s Eng, while SB203580 decreased the phosphorylation level of p38 MAPK and increased the migration and invasion of HTR8/SVneo under oxidative stress. The activity of MMP2/9 in the supernatant of cell culture increased the secretion of s Flt-1 and s Eng. Conclusion SB203580 has protective effect on the biological function of human extracellular trophoblast under oxidative stress.
【作者單位】: 重慶市婦幼保健院;重慶醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81300508)~~
【分類號】:R714.244
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