IL-6對人卵巢癌細(xì)胞體外增殖及錨定非依賴生長能力的影響
本文選題:IL- + 細(xì)胞增殖; 參考:《免疫學(xué)雜志》2015年10期
【摘要】:目的研究內(nèi)源性IL-6對卵巢癌(ovarian cancer,OVCA)細(xì)胞體外增殖及錨定非依賴生長能力的影響并探討其作用機制。方法應(yīng)用前期建立的內(nèi)源性過表達(dá)IL-6的人卵巢癌A2780細(xì)胞株和內(nèi)源性抑制IL-6表達(dá)的人卵巢癌SKOV-3細(xì)胞株,分別采用MTT法、雙層軟瓊脂集落形成實驗、流式細(xì)胞術(shù)、RT-PCR和Western blot技術(shù)檢測IL-6對OVCA增殖及錨定非依賴生長能力的影響,并對其作用機制進(jìn)行研究。結(jié)果與對照組細(xì)胞相比,過表達(dá)IL-6的A2780細(xì)胞的增殖及錨定非依賴性生長能力增強(P0.01),而IL-6抑制表達(dá)的SKOV-3細(xì)胞則降低(P0.01)。進(jìn)一步研究表明IL-6促OVCA細(xì)胞增殖作用是通過改變細(xì)胞周期分布而非抑制細(xì)胞凋亡來實現(xiàn)的;過表達(dá)IL-6可顯著提高A2780細(xì)胞的Cyclin D1、Cyclin B1的表達(dá)水平,而抑制IL-6表達(dá)則明顯降低SKOV-3細(xì)胞的Cyclin D1、Cyclin B1的表達(dá)水平;應(yīng)用ERK或Akt特異性信號阻斷劑可顯著抑制高表達(dá)IL-6的A2780細(xì)胞增殖及Cyclin D1、Cyclin B1的表達(dá)水平。結(jié)論 IL-6能促進(jìn)OVCA細(xì)胞的增殖和錨定非依賴性生長,IL-6促OVCA細(xì)胞增殖作用是通過增加Cyclin D1、Cyclin B1表達(dá)水平從而改變細(xì)胞周期分布來實現(xiàn)的,并與活化的PI3K/Akt、Ras/MEK/ERK信號通路有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of endogenous IL-6 on proliferation and anchoring ability of ovarian cancer OVCA cells in vitro and its mechanism. Methods A human ovarian cancer cell line A2780 with endogenous overexpression of IL-6 and a human ovarian cancer SKOV-3 cell line with endogenous inhibition of IL-6 expression were established by using MTT assay and double layer soft Agar colony forming assay respectively. The effects of IL-6 on the proliferation of OVCA and the ability of anchoring independent growth were detected by flow cytometry and Western blot, and the mechanism was studied. Results compared with the control group, the proliferation and anchoring independent growth ability of A2780 cells with overexpression of IL-6 increased P0.01a, while SKOV-3 cells inhibited by IL-6 decreased P0.01a. Further studies have shown that IL-6 promotes the proliferation of OVCA cells by changing cell cycle distribution rather than inhibiting cell apoptosis, and that overexpression of IL-6 can significantly increase the expression of Cyclin D1 cyclin B1 in A2780 cells. Inhibition of IL-6 expression significantly decreased the expression level of Cyclin D1 cyclin B1 in SKOV-3 cells, and ERK or Akt specific signal blockers could significantly inhibit the proliferation of A2780 cells and the expression of Cyclin D1 cyclin B1 in A2780 cells with high IL-6 expression. Conclusion IL-6 can promote the proliferation of OVCA cells and anchor independent growth of IL-6 to promote the proliferation of OVCA cells by increasing the expression level of Cyclin D1Cyclin B1 and changing the cell cycle distribution, which is related to the activated PI3K / AktRas/ Mek / ERK signaling pathway.
【作者單位】: 天津市職業(yè)與環(huán)境危害生物標(biāo)志物重點實驗室;天津武警后勤學(xué)院病原生物學(xué)與免疫學(xué)教研室;天津武警后勤學(xué)院藥理學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(81041071,81273520,81572852,81502256) 天津市自然科學(xué)基金重點項目(12JCZDJC26300) 武警后勤學(xué)院科學(xué)技術(shù)研究項目(WHZ201202,WHB201404,WHB201405,WHB201406,2015ZXKF05,WHB201505,WHJ201508)
【分類號】:R737.31
【參考文獻(xiàn)】
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【共引文獻(xiàn)】
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本文編號:1932896
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