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MicroRNA-20b在卵巢癌細(xì)胞中的表達(dá)及對增殖和凋亡的影響

發(fā)布時間:2018-05-13 21:36

  本文選題:miR-b + 卵巢癌; 參考:《中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志》2017年13期


【摘要】:目的探討micro RNA-20b(miR-20b)在卵巢癌細(xì)胞系中的表達(dá)及對增殖和凋亡的影響。方法實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(q RT-PCR)測定miR-20b在卵巢癌細(xì)胞系A(chǔ)431、SKOV3及正常卵巢上皮細(xì)胞系Hose中的相對表達(dá)量,將SKOV3細(xì)胞系分成未轉(zhuǎn)染對照、陰性對照及miR-20b模擬物組,用Lipofectamine2000分別不轉(zhuǎn)染、轉(zhuǎn)染miR-20b scramble和miR-20b mimics,CCK8實驗測定3組細(xì)胞增殖能力,流式細(xì)胞術(shù)測定3組細(xì)胞凋亡,Western blot測定張力蛋白同源在10號染色體有缺失的磷酸酶(PTEN)、裂解型聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)的相對表達(dá)量。結(jié)果 q RT-PCR示A431、SKOV3細(xì)胞系miR-20b相對表達(dá)量較Hose細(xì)胞系低;miR-20b模擬物組在0、24、48、72及96 h的OD45 nm值低于未轉(zhuǎn)染對照組和陰性對照組;miR-20b模擬物組凋亡率高于陰性對照組和未轉(zhuǎn)染對照組;miR-20b模擬物組PTEN相對表達(dá)量低于陰性對照組,裂解型PARP蛋白相對表達(dá)量高于陰性對照組。結(jié)論 miR-20b抑制卵巢癌細(xì)胞增殖并促進(jìn)凋亡,其機(jī)制可能與下調(diào)PTEN和上調(diào)PARP蛋白表達(dá)有關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of micro RNA-20bmmiR-20b in ovarian cancer cell line and its effect on proliferation and apoptosis. Methods the relative expression of miR-20b in ovarian cancer cell line A431SKOV3 and normal ovarian epithelial cell line Hose was determined by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction (RT-PCR). The SKOV3 cell lines were divided into three groups: untransfected control, negative control and miR-20b mimics. The proliferative ability of the three groups was measured by miR-20b scramble and miR-20b mimicsl CCK8 transfection without Lipofectamine2000 transfection, respectively. Flow cytometry was used to determine the relative expression of PTEN, a phosphatase homologous to tensin homologue on chromosome 10, and a cleavage polyadenosine diphosphate polymerase (PARP). Results Q RT-PCR showed that the relative expression of miR-20b in A431 SKOV3 cell line was lower than that in Hose cell line. The OD45 nm value of the mimetic group was lower than that of the untransfected control group and the negative control group at 72 h and 96 h. The apoptotic rate of A431 SKOV3 cell line was higher than that of the negative control group and the untransfected control group. The relative expression of PTEN in the miR-20b analogue group was lower than that in the negative control group. The relative expression of cleavage type PARP protein was higher than that of negative control group. Conclusion miR-20b inhibits proliferation and promotes apoptosis of ovarian cancer cells, which may be related to down-regulation of PTEN and up-regulation of PARP protein expression.
【作者單位】: 湖北省武漢市第一醫(yī)院婦產(chǎn)科;
【基金】:武漢市衛(wèi)計委課題(No:WX15C32)
【分類號】:R737.31

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1884924


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