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SND1低表達(dá)宮頸癌CasKi細(xì)胞穩(wěn)定株的構(gòu)建及其生物學(xué)功能變化

發(fā)布時(shí)間:2018-05-11 23:18

  本文選題:子宮頸腫瘤 + SND蛋白; 參考:《山東醫(yī)藥》2017年21期


【摘要】:目的構(gòu)建SND1低表達(dá)的人宮頸癌CasKi細(xì)胞穩(wěn)定株,探討SND1低表達(dá)對(duì)CasKi細(xì)胞生物學(xué)功能的影響。方法 CasKi細(xì)胞隨機(jī)分為六組,空白對(duì)照組不做處理,陰性對(duì)照組、干擾1~4組分別轉(zhuǎn)染TRC2-p LKO-puro Vector的空載慢病毒液及SND1 shRNA(1~4)慢病毒液,用嘌呤霉素篩選CasKi細(xì)胞穩(wěn)定株。分別用Western blotting技術(shù)、RT-PCR技術(shù)檢測(cè)CasKi細(xì)胞內(nèi)SND1蛋白、mRNA表達(dá),確認(rèn)轉(zhuǎn)染效率。用CCK-8法檢測(cè)CasKi細(xì)胞增殖活力(OD_(450)值),用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CasKi細(xì)胞相對(duì)遷移距離。結(jié)果空白對(duì)照組細(xì)胞全部死亡,陰性對(duì)照組及干擾1~4組細(xì)胞部分存活,證明細(xì)胞穩(wěn)定株轉(zhuǎn)染構(gòu)建成功。干擾1~4組SND1蛋白、mRNA相對(duì)表達(dá)量與空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組比較,P均0.05;干擾3、4組與其他組比較,P均0.05。干擾3、4組OD_(450)值、相對(duì)遷移距離與空白對(duì)照組、陰性對(duì)照組比較,P均0.05。結(jié)論成功構(gòu)建了SND1低表達(dá)的CasKi細(xì)胞穩(wěn)定株;SND1低表達(dá)的CasKi細(xì)胞增殖和遷移能力降低。
[Abstract]:Objective To investigate the effect of low expression of SND1 on the biological function of CasKi cells . Methods CasKi cells were randomly divided into six groups , the negative control group , the negative control group , the negative control group , the negative control group and the negative control group .

【作者單位】: 天津醫(yī)科大學(xué);
【基金】:國(guó)家杰出青年基金資助項(xiàng)目(31125012) 教育部“創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)發(fā)展計(jì)劃”(IRT13085) 國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31670759、31370749、31501056) 天津市自然科學(xué)基金項(xiàng)目(16JCQNJC09000)
【分類號(hào)】:R737.33


本文編號(hào):1876080

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