發(fā)布時(shí)間：2018-05-08 11:00

  本文選題：子宮內(nèi)膜癌 + 漿液性癌�。� 參考：《山東大學(xué)》2015年博士論文

【摘要】：背景子宮內(nèi)膜癌是子宮內(nèi)膜上皮來源的惡性腫瘤,屬于女性生殖道三大惡性腫瘤之一,好發(fā)于老年婦女。隨著人口老齡化、飲食結(jié)構(gòu)和生活方式的改善,其發(fā)病率及死亡率在全球范圍內(nèi)呈現(xiàn)上升趨勢(shì),且發(fā)病年齡趨于年輕化。在歐美國(guó)家,子宮內(nèi)膜癌發(fā)病率位于婦科惡性腫瘤首位,在我國(guó)位居第二位,但是近年來在北京、上海等發(fā)達(dá)城市其發(fā)病率已超過宮頸癌而位居?jì)D科惡性腫瘤首位。其中漿液性癌是子宮內(nèi)膜癌中惡性程度較高的一種病理類型,而關(guān)于子宮內(nèi)膜漿液性癌的大宗病例研究少見報(bào)道。系統(tǒng)掌握子宮內(nèi)膜漿液性癌的臨床病理學(xué)特征、診斷及鑒別診斷,提高對(duì)此腫瘤生物學(xué)行為的認(rèn)識(shí),對(duì)于婦科、腫瘤科及病理科醫(yī)師具有重要意義。目的探討子宮內(nèi)膜漿液性癌臨床病理學(xué)特征、診斷、鑒別診斷及預(yù)后,進(jìn)一步提高對(duì)該腫瘤的認(rèn)識(shí)。方法回顧性分析煙臺(tái)毓璜頂醫(yī)院2005年1月至2013年12月期間確診為子宮內(nèi)膜漿液性癌患者的臨床病理資料,患者均接受廣泛子宮及雙側(cè)附件切除術(shù)加盆腔淋巴結(jié)清掃,術(shù)前均未做任何治療,術(shù)后經(jīng)組織病理學(xué)診斷為子宮內(nèi)膜漿液性癌。對(duì)腫瘤組織進(jìn)行雌激素受體、孕激素受體、突變型P53的免疫組織化學(xué)染色,統(tǒng)計(jì)分析雌激素受體、孕激素受體、突變型P53表達(dá)與臨床病理學(xué)參數(shù)及預(yù)后情況的關(guān)系。計(jì)數(shù)資料采用x2檢驗(yàn),P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.本組33例子宮內(nèi)膜漿液性癌占同期子宮內(nèi)膜癌的比例為5.02%(33/672)。患者發(fā)病年齡44-73歲,中位年齡64歲。93.94%患者為絕經(jīng)后女性(31/33)。腫瘤最大直徑1-12cm,平均直徑3.87cm。影像學(xué)檢查以宮腔內(nèi)占位多見(16/33,48.48%),其次表現(xiàn)為內(nèi)膜不規(guī)則增厚(10/33,30.3%),僅少數(shù)患者表現(xiàn)為宮腔積液(7/33,21.21%)。臨床癥狀多表現(xiàn)為絕經(jīng)后陰道流血或流液(29/33,87.88%),3例患者表現(xiàn)為下腹疼痛或不適(3/33,9.09%),1例表現(xiàn)為外陰脫出腫物伴排尿困難(1/33,3.03%)。14例發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(14/33,42.42%)；19例患者腫瘤浸潤(rùn)深度1/2肌層(19/33,57.58%)；15例臨床分期Ⅰ-Ⅱ期(15/33,45.45%),18例Ⅲ-Ⅳ期(18/33,54.55%)。其中浸潤(rùn)深度1/2肌層的19例患者中有7例患者出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(7/19,36.84%)。本組33例患者均獲得隨訪,隨訪時(shí)間2-64個(gè)月,平均26.67個(gè)月,其中16例(16/33,48.48%)存活,17例(17/33,51.52%)患者死于本病。2.本組病例共同的組織學(xué)特點(diǎn)是腫瘤細(xì)胞呈復(fù)雜分支狀的乳頭結(jié)構(gòu)、實(shí)性巢狀或腺管狀排列,乳頭結(jié)構(gòu)中央為纖維脈管軸心；腫瘤細(xì)胞體積大,邊界不清,胞漿嗜酸性或粉染,核大小不一、形態(tài)不規(guī)則,扭曲分葉,染色質(zhì)粗顆粒狀,核仁顯著嗜酸性,核分裂相易見。18例患者(18/33,54.54%)腫瘤組織內(nèi)可見壞死；7例患者(7/33,24.24%)腫瘤組織內(nèi)見砂粒體形成。3.子宮內(nèi)膜漿液性癌中雌激素受體、孕激素受體及突變型P53陽性信號(hào)均定位于腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞核。本組病例中27例患者雌激素受體、孕激素受體均為陰性表達(dá)(27/33,81.82%),2例(2/33,6.06%)雌激素受體(+)、孕激素受體(+),3例(3/33,9.09%)呈雌激素受體(-)、孕激素受體(+)表達(dá)模式,1例(1/33,3.03%)雌激素受體(+)、孕激素受體(-)表達(dá)；突變型P53免疫組化染色顯示24例(24/33,72.73%)為陽性表達(dá),9例為陰性表達(dá)(9/33,27.27%)。雌激素受體、孕激素受體、突變型P53表達(dá)差異與患者年齡、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。4.在年齡、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、臨床分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等因素中,僅淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中患者無病生存率具有顯著差異(P0.05)結(jié)論1.子宮內(nèi)膜漿液性癌是一類少見的子宮內(nèi)膜癌,以老年女性多見。絕經(jīng)后陰道流血是常見的臨床癥狀,影像學(xué)檢查多表現(xiàn)為宮腔內(nèi)息肉或占位。2.子宮內(nèi)膜漿液性癌需要與低分化子宮內(nèi)膜樣腺癌、卵巢漿液性癌子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)移等多種惡性腫瘤鑒別,免疫組織化學(xué)染色具有一定幫助。3.子宮內(nèi)膜漿液性癌為非激素依賴性腫瘤；p53基因突變與子宮內(nèi)膜漿液性癌發(fā)生關(guān)系密切。4.子宮內(nèi)膜漿液性癌生物學(xué)行為特殊,早期可發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移；患者預(yù)后差,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是預(yù)后不良因素。背景子宮內(nèi)膜漿液性癌惡性程度高,死亡率占全部子宮內(nèi)膜癌的50%,但子宮內(nèi)膜漿液性癌確切的病因及發(fā)病機(jī)制尚不清楚,至今尚無針對(duì)性的治療方法。基于上述情況,深入探討子宮內(nèi)膜漿液性癌的發(fā)病機(jī)制,尋找新的治療靶點(diǎn)及切實(shí)有效的治療方法,意義重大。子宮內(nèi)膜漿液性癌的發(fā)生與p53基因突變密切相關(guān)。p53基因定位于人類第17號(hào)染色體短臂,編碼393個(gè)氨基酸,根據(jù)氨基酸組成分為野生型和突變型。野生型P53是一種轉(zhuǎn)錄因子,含有一段具有轉(zhuǎn)錄活性的氨基酸殘基,通過與特異性DNA序列(P53應(yīng)答元件)結(jié)合激活下游相關(guān)基因參與DNA修復(fù)、細(xì)胞周期調(diào)節(jié)以及誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。突變型P53與近乎一半的惡性腫瘤發(fā)生存在密切關(guān)系,其促進(jìn)腫瘤發(fā)生存在三種機(jī)制：①突變型P53喪失了野生型P53具有的與P53應(yīng)答元件結(jié)合的能力,失去了正常的抑癌作用；②突變型P53與野生型P53結(jié)合形成異四聚體,抑制后者作為轉(zhuǎn)錄因子的活性；③突變型P53獲得了一種新的致癌功能,促進(jìn)細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化。近年來研究發(fā)現(xiàn)多種調(diào)節(jié)蛋白可以通過影響突變型P53蛋白的空間構(gòu)象以及促進(jìn)蛋白降解等途徑調(diào)控突變型P53的功能,進(jìn)而顯示出抑制腫瘤形成及轉(zhuǎn)移的作用。因此,新型突變型P53調(diào)控蛋白的尋找,對(duì)于明確子宮內(nèi)膜漿液性癌的發(fā)生機(jī)制以及尋找新型治療靶點(diǎn)具有重要科學(xué)意義。激活轉(zhuǎn)錄因子3屬于含亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)的轉(zhuǎn)錄因子ATF/CREB家族成員。該基因有A、B、C、E四個(gè)外顯子,編碼181個(gè)氨基酸,其中A區(qū)為非編碼區(qū),B區(qū)編碼N端80個(gè)氨基酸,C區(qū)編碼36個(gè)氨基酸,E區(qū)編碼大部分為Zip結(jié)構(gòu)的65個(gè)氨基酸及3’非翻譯區(qū)。激活轉(zhuǎn)錄因子3可以被一系列應(yīng)激信號(hào)快速誘導(dǎo)表達(dá),廣泛參與內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定、細(xì)胞黏附、創(chuàng)傷愈合、細(xì)胞凋亡等生理和病理過程,Yuan等發(fā)現(xiàn)激活轉(zhuǎn)錄因子3通過調(diào)節(jié)細(xì)胞骨架重建抑制膀胱癌轉(zhuǎn)移。Hackl等通過siRNA敲除大腸癌細(xì)胞激活轉(zhuǎn)錄因子3基因,在體外增加了腫瘤的轉(zhuǎn)移,在異體移植模型中促進(jìn)了腫瘤的生長(zhǎng)以及向肝臟轉(zhuǎn)移的能力。Liu等報(bào)道激活轉(zhuǎn)錄因子3通過上調(diào)死亡受體5的表達(dá)促進(jìn)腫瘤細(xì)胞凋亡。另有研究顯示激活轉(zhuǎn)錄因子3在多種人類腫瘤組織如肺癌、乳腺癌、結(jié)腸癌及肝癌中表達(dá)顯著降低,說明激活轉(zhuǎn)錄因子3在腫瘤發(fā)生及發(fā)展過程中扮演重要角色。研究發(fā)現(xiàn)激活轉(zhuǎn)錄因子3是野生型P53的重要調(diào)控因子。Yan C等報(bào)道激活轉(zhuǎn)錄因子3通過與野生型P53蛋白直接結(jié)合阻斷野生型P53的泛素化降解途徑。WangH等報(bào)道在HPV陽性的宮頸癌細(xì)胞內(nèi),激活轉(zhuǎn)錄因子3能夠抑制人乳頭狀瘤病毒HPV-E6介導(dǎo)的野生型P53降解途經(jīng),并增強(qiáng)p53的轉(zhuǎn)錄活性,誘導(dǎo)下游基因p21表達(dá),引起癌細(xì)胞凋亡。其作用機(jī)制可能為激活轉(zhuǎn)錄因子3與野生型P53結(jié)合引起后者空間構(gòu)象改變,使其更易于結(jié)合DNA序列或其他轉(zhuǎn)錄活化因子；或者激活轉(zhuǎn)錄因子3直接競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合p53基因啟動(dòng)子序列,增強(qiáng)p53轉(zhuǎn)錄活性。近期研究發(fā)現(xiàn)激活轉(zhuǎn)錄因子3能夠直接結(jié)合突變型P53進(jìn)而抑制突變型p53的癌基因功能。迄今為止,激活轉(zhuǎn)錄因子3與子宮內(nèi)膜漿液性癌的關(guān)系尚不清楚。通過研究ATF3在子宮內(nèi)膜漿液性癌中的表達(dá)規(guī)律,有望為漿液性癌治療靶點(diǎn)的尋找奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。目的探討激活轉(zhuǎn)錄因子3在子宮內(nèi)膜漿液性癌中的表達(dá)規(guī)律、與臨床病理學(xué)參數(shù)的關(guān)系以及與突變型P53表達(dá)的相關(guān)性,為進(jìn)一步研究激活轉(zhuǎn)錄因子3作為子宮內(nèi)膜漿液性癌治療靶點(diǎn)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法研究對(duì)象為煙臺(tái)毓璜頂醫(yī)院2005年1月至2013年12月期間入院接受手術(shù)治療的33例子宮內(nèi)膜漿液性癌患者。患者均接受廣泛子宮及雙側(cè)附件切除術(shù)加盆腔淋巴結(jié)清掃,術(shù)前均未做任何治療,術(shù)后經(jīng)組織病理學(xué)診斷為子宮內(nèi)膜漿液性癌。每例患者腫瘤周邊正常子宮內(nèi)膜組織作為對(duì)照。采用免疫組織化學(xué)EnVision染色法對(duì)上述33例子宮內(nèi)膜漿液性癌及腫瘤周邊正常子宮內(nèi)膜組織進(jìn)行激活轉(zhuǎn)錄因子3、雌激素受體、孕激素受體及突變型P53染色,比較激活轉(zhuǎn)錄因子3與子宮內(nèi)膜漿液性癌臨床病理特征及預(yù)后的關(guān)系,計(jì)數(shù)資料之間的比較采用x2檢驗(yàn)；Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)進(jìn)行相關(guān)性統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；采用Kaplan-Meier法計(jì)算生存率、繪制生存曲線,行Log-Rank檢驗(yàn)分析。P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1.激活轉(zhuǎn)錄因子3定位于細(xì)胞胞漿。激活轉(zhuǎn)錄因子3在癌旁子宮內(nèi)膜組織中陽性比例是87.88%(29/33),33例漿液性癌組織中激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性表達(dá)率為27.27%(9/33),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,二者之間有顯著差異(P0.01)。2.激活轉(zhuǎn)錄因子3在漿液性癌患者中的陽性表達(dá)率為：年齡≥64歲組為17.65%(3/17),64歲組為37.5%(6/16),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)分析兩組之間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.141)；在腫瘤最大直徑≥3.87cm組中,激活轉(zhuǎn)錄因子3表達(dá)陽性率為25%(4/16),而在腫瘤最大徑3.87cm組中,激活轉(zhuǎn)錄因子3表達(dá)率為29.41%(5/17),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,兩組之間陽性表達(dá)率無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.292)；在臨床分期Ⅰ、¨期組中,激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性表達(dá)率為33.33%(5/15),Ⅲ、Ⅳ期組中,激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性率為22.22%(4/18),二者比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.238)；在浸潤(rùn)深度1/2肌層組中,激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性表達(dá)率為26.32%(5/19),浸潤(rùn)深度≥1/2肌層組中,陽性率為28.57%(4/14),二者比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.302)；在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中,激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性表達(dá)率為14.29%(2/14),無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組中,激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性率為36.84%(7/19),二者比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.119)。3.經(jīng)Spearman秩相關(guān)檢驗(yàn)子宮內(nèi)膜漿液性癌組織中激活轉(zhuǎn)錄因子3表達(dá)與雌激素受體、孕激素受體表達(dá)無相關(guān)性(P0.05)；與突變型P53表達(dá)顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.542,P=0.001)。4.本組33例患者均獲得隨訪,隨訪時(shí)間2-64個(gè)月,平均26.67個(gè)月,其中16例存活,17例患者死于本病。激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性患者3年及5年無病生存率為100%及66.7%,而激活轉(zhuǎn)錄因子3陰性表達(dá)的患者中3年及5年無病生存率為25.9%及0。經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,激活轉(zhuǎn)錄因子3陽性表達(dá)患者預(yù)后顯著好于激活轉(zhuǎn)錄因子3陰性表達(dá)患者(P0.01)。結(jié)論1.激活轉(zhuǎn)錄因子3在子宮內(nèi)膜漿液性癌中表達(dá)顯著降低。2.激活轉(zhuǎn)錄因子3表達(dá)與突變型P53表達(dá)呈負(fù)相關(guān),可能參與漿液性癌發(fā)生過程中的重要步驟。3.激活轉(zhuǎn)錄因子3可作為子宮內(nèi)膜漿液性癌患者的預(yù)后指標(biāo)。背景子宮內(nèi)膜漿液性癌是具有特殊生物學(xué)行為的子宮內(nèi)膜癌病理類型,其惡性程度高,死亡率占全部子宮內(nèi)膜癌的50%,目前仍無有效的治療方法。第二部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示在子宮內(nèi)膜漿液性癌組織中激活轉(zhuǎn)錄因子3呈低表達(dá)狀態(tài)；激活轉(zhuǎn)錄因子3表達(dá)與突變型P53表達(dá)呈顯著負(fù)相關(guān)。本部分實(shí)驗(yàn)擬采用病毒載體上調(diào)漿液性癌SPEC-2細(xì)胞內(nèi)激活轉(zhuǎn)錄因子3的表達(dá)水平,通過細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)研究激活轉(zhuǎn)錄因子3對(duì)SPEC-2細(xì)胞體外增殖的影響,并開展相應(yīng)的分子機(jī)制研究,為深入研究子宮內(nèi)膜漿液性癌的發(fā)病機(jī)制,尋找可能的靶向治療方法奠定分子生物學(xué)基礎(chǔ)。目的探討激活轉(zhuǎn)錄因子3對(duì)子宮內(nèi)膜漿液性癌SPEC-2細(xì)胞體外增殖的影響及其可能的分子機(jī)制。方法1.細(xì)胞培養(yǎng)與病毒載體轉(zhuǎn)染細(xì)胞：采用pBabe-ATF3/pBabe-puro以及p-SIH-shATF3/p-SIH-shLuc病毒載體。分別使用Ampho-293及HEK-293Fast細(xì)胞進(jìn)行病毒制備,采用Polybrene作為感染增效劑感染SPEC-2細(xì)胞。Western Blot實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證轉(zhuǎn)染是否成功。2.MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況：實(shí)驗(yàn)分陰性對(duì)照組、空白對(duì)照組和轉(zhuǎn)染組。培養(yǎng)的不同時(shí)間點(diǎn),在酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀波長(zhǎng)490nm處檢測(cè)各組細(xì)胞的吸光光度值。轉(zhuǎn)染組與對(duì)照組每孔重復(fù)檢測(cè)3次,求平均值,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。3. Western Blot實(shí)驗(yàn)檢測(cè)各組細(xì)胞中激活轉(zhuǎn)錄因子3、突變型P53、P21、細(xì)胞周期蛋白D1的蛋白表達(dá)情況。結(jié)果1.陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組中,SPEC-2細(xì)胞表達(dá)一定量的激活轉(zhuǎn)錄因子3,而轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中激活轉(zhuǎn)錄因子3的蛋白水平顯著升高(P0.05)。2.MTT比色實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示：與陰性對(duì)照組和空白對(duì)照組相比,激活轉(zhuǎn)錄因子3表達(dá)上調(diào)后,SPEC-2細(xì)胞體外生長(zhǎng)能力顯著降低。隨體外培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng),細(xì)胞體外生長(zhǎng)受到抑制的程度不斷增大。3.在各組細(xì)胞體外培養(yǎng)48小時(shí)后,對(duì)突變型P53、P21以及細(xì)胞周期蛋白D1的表達(dá)進(jìn)行Western Blot分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)由于激活轉(zhuǎn)錄因子3表達(dá)上調(diào),P21表達(dá)水平升高,而細(xì)胞周期蛋白Dl和突變型P53的表達(dá)有不同程度下降(P0.05)。結(jié)論1.高表達(dá)激活轉(zhuǎn)錄因子3對(duì)子宮內(nèi)膜漿液性癌SPEC-2細(xì)胞體外增殖具有抑制作用。2.高表達(dá)激活轉(zhuǎn)錄因子3的子宮內(nèi)膜漿液性癌SPEC-2細(xì)胞中P21表達(dá)上調(diào)、突變型P53和CyclinDl表達(dá)降低,可能是細(xì)胞體外增殖受到抑制的分子機(jī)制。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：山東大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.33

【參考文獻(xiàn)】

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2 朱瑾;孫紅;;子宮內(nèi)膜漿液性腺癌54例回顧分析[J];復(fù)旦學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2008年06期

3 郄明蓉;張竹;;子宮內(nèi)膜癌流行病學(xué)及發(fā)病因素[J];中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志;2011年11期

4 李遠(yuǎn)偉;趙曉昆;高智勇;吳萬瑞;樊皓明;何軍;;膀胱尿路上皮癌中ATF3的表達(dá)及意義[J];中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2009年09期

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本文編號(hào)：1861124