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重組人IL-17D對上皮性卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖、遷移及VEGF-C表達(dá)的影響

發(fā)布時間:2018-05-01 18:23

  本文選題:SKOV3細(xì)胞 + IL-17D。 參考:《河北醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文


【摘要】:目的:通過研究重組人IL-17D(r-hIL-17D)對人上皮性卵巢癌SKOV3細(xì)胞增殖、遷移及VEGF-C表達(dá)的影響,探討IL-17D對卵巢癌增殖及淋巴轉(zhuǎn)移的作用。方法:1體外培養(yǎng)SKOV3(人卵巢漿液性乳頭狀腺癌細(xì)胞)并連續(xù)傳代,于倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。2取對數(shù)生長期的SKOV3細(xì)胞,分別以不同濃度(0ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)r-hIL-17D作用于細(xì)胞0h、24h、48h、72h、96h、120h,以MTS法檢測不同濃度r-h IL-17D在不同時間對卵巢癌SKOV3細(xì)胞的增殖的影響,并繪制生長曲線。3 Transwell小室實驗檢測不同濃度r-hIL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50ng/ml、100 ng/ml)對SKOV3細(xì)胞遷移能力的影響。4分別以不同濃度(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)r-h IL-17D作用SKOV3細(xì)胞48h后,提取各組細(xì)胞RNA,以RT-qPCR法檢測不同濃度r-hIL-17D對SKOV3細(xì)胞VEGF-C mRNA表達(dá)的影響。5分別以不同濃度(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)r-h IL-17D作用SKOV3細(xì)胞48h后,收集細(xì)胞上清液,ELISA法檢測上清液中VEGF-C的含量。結(jié)果:1成功培養(yǎng)并傳代卵巢癌SKOV3細(xì)胞,獲得對數(shù)生長期細(xì)胞。2 MTS法顯示:10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞增殖速度快于0ng/ml組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞增殖速度快于10ng/ml組,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞增殖速度無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3 Transwell小室實驗顯示:在不同濃度IL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)作用下,SKOV3細(xì)胞的遷移數(shù)目分別為118.80±13.66、144.20±12.70、180.80±20.54、176.60±18.15,經(jīng)單因素方差分析,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。兩兩比較,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞的遷移能力強(qiáng)于0 ng/ml組(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞的遷移能力強(qiáng)于10 ng/ml組(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml組SKOV3細(xì)胞的遷移能力無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。4 RT-qPCR結(jié)果顯示:在不同濃度r-hIL-17D(0 ng/ml、10 ng/ml、50ng/ml、100 ng/ml)作用下,SKOV3細(xì)胞VEGF-C mRNA相對表達(dá)量分別為1.00±0.18、1.54±0.22、2.26±0.18、2.11±0.26,經(jīng)單因素方差分析,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。兩兩比較,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達(dá)量高于0 ng/ml組(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C mRNA表達(dá)量高于10 ng/ml組細(xì)胞(P0.05)。50 ng/ml、100ng/ml組VEGF-C mRNA表達(dá)量差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。5 ELISA結(jié)果顯示:不同濃度(0 ng/ml、10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml)組細(xì)胞上清液中VEGF-C的含量分別為4095.09±105.25ng/ml、4439.84±133.87 ng/ml、4755.66±64.24 ng/ml、4646.59±111.92 ng/ml,經(jīng)單因素方差分析,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。兩兩比較,10 ng/ml、50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C含量高于0 ng/ml組(P0.05),50 ng/ml、100 ng/ml組VEGF-C含量高于10ng/ml組(P0.05)。50 ng/ml與100 ng/ml組相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論:R-hIL-17D可以促進(jìn)SKOV3細(xì)胞增殖,提高SKOV3細(xì)胞的遷移能力,在不同水平增加SKOV3細(xì)胞VEGF-C的表達(dá)。IL-17D可能因此而增加卵巢癌細(xì)胞淋巴轉(zhuǎn)移的機(jī)會。
[Abstract]:Objective : To investigate the effects of recombinant human IL - 2 ( IL - 3 ) on proliferation , migration and expression of VEGF - C in human epithelial ovarian carcinoma . The expression of VEGF - C mRNA was 1 . 00 鹵 0 . 18 , 1 . 54 鹵 0 . 22 , 2 . 26 鹵 0 . 18 , 2 . 11 鹵 0 . 26 in 100 ng / ml group . The levels of VEGF - C mRNA in 100 ng / ml and 100 ng / ml group were 4095.09 鹵 105.25ng / ml , 4439.84 鹵 133.87 ng / ml , 4646.59 鹵 11.92 ng / ml , respectively .

【學(xué)位授予單位】:河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:R737.31

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1830547

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