本文選題：ATF5 + 上皮性卵巢癌　； 參考：《青島大學》2014年碩士論文

【摘要】：目的： 分析慢病毒轉染沉默人轉錄激活因子5(Activating transcription factor5, ATF5)后,對卵巢癌SKOV-3細胞體外增殖、凋亡及體內成瘤的影響,通過體外和體內的實驗研究來探討卵巢癌的基因治療,探索沉默ATF5的表達后,能否開辟卵巢癌治療的新方法。 方法： 1、慢病毒攜帶小干擾RNA,分別將構建好的攜帶RNA干擾質粒(沉默ATF5)和空載體的慢病毒感染生長良好的卵巢癌SKOV-3細胞和卵巢癌SKOV-3細胞進行對照,對比觀察細胞的生長狀態(tài)。 2、MTT法檢測細胞的增殖生長。 3、羅氏凋亡檢測試劑盒檢測細胞凋亡。 4、采用裸鼠皮下接種細胞的方法,于裸鼠皮下接種成瘤,觀察各組裸鼠的存活狀態(tài)、種植瘤生長情況,進一步計算成瘤率。 5、RT-PCR檢測移植瘤ATF5mRNA的表達情況。 6、Western-Blot檢測移植瘤ATF5蛋白的表達情況。 7、HE染色觀察瘤組織組織學變化。 結果： 1、在體外培養(yǎng)條件下,SKOV-3的生物學形態(tài)沒有明顯差異。在相同培養(yǎng)時間內細胞的增殖無統(tǒng)計學意義,但RNA干擾的實驗組細胞凋亡數(shù)量較其他兩組明顯增多。 2、皮下接種成瘤后,三組裸鼠的成瘤率沒有明顯區(qū)別,但RNA干擾組腫瘤成瘤時間晚,生長緩慢。 3、移植瘤組織RT-PCR顯示RNA干擾組mRNA表達量與其他對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)； 4、瘤組織Western-Blot顯示RNA干擾組ATF5蛋白表達差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)； 5、HE染色法觀察RNA干擾組分裂相明顯減少,凋亡現(xiàn)象明顯。 結論： 沉默ATF5的表達后人上皮性卵巢癌裸鼠移植瘤生長緩慢,這可能成為卵巢癌基因治療的新靶點。
[Abstract]:Objective:
The effect of Activating transcription factor5 (ATF5) on the proliferation, apoptosis and tumor formation of ovarian cancer SKOV-3 cells in vitro was analyzed. The gene therapy of ovarian cancer was explored in vitro and in vivo, and the new method of ovarian cancer treatment could be opened up after the expression of silent ATF5 was explored.
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本文編號：1826499