本文選題：宮頸癌 + 胃癌��； 參考：《寧波大學(xué)》2014年碩士論文

【摘要】：【目的】 研究宮頸癌和胃癌中septin9啟動(dòng)子甲基化率，并觀察分析SAMe對(duì)宮頸癌和胃癌中septin9表達(dá)的影響，進(jìn)而探討septin9啟動(dòng)子甲基化在宮頸癌和胃癌中的意義以及SAMe誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的可能機(jī)制。 【方法】 首先，采用甲基化特異性高分辨率熔解曲線分析（methylation sensitive highresolution melting curve analysis, MS-HRM）技術(shù)檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞系HeLa、胃癌細(xì)胞系MGC以及13例宮頸癌腫瘤組織中septin9啟動(dòng)子甲基化情況；并分析septin9啟動(dòng)子甲基化與宮頸癌腫瘤組織臨床病理進(jìn)程的相關(guān)性。其次，通過DAPI熒光核染色法觀察由SAMe處理24h、48h后宮頸癌細(xì)胞系HeLa和胃癌細(xì)胞系MGC的細(xì)胞凋亡情況。最后，通過實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（quantitative reverse transcriptase-polymerase chainreaction, qRT-PCR）方法和MS-HRM技術(shù)分別檢測(cè)由SAMe處理后宮頸癌細(xì)胞系HeLa和胃癌細(xì)胞系MGC中septin9-v1,v5,v mRNA表達(dá)水平以及septin9啟動(dòng)子甲基化程度。 【結(jié)果】 1.發(fā)現(xiàn)宮頸癌細(xì)胞系HeLa和胃癌細(xì)胞系MGC中存在septin9啟動(dòng)子甲基化。 2.發(fā)現(xiàn)38.5%（513）的宮頸癌組織存在septin9啟動(dòng)子甲基化，但其與宮頸癌的臨床分期、淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移、有無脈管內(nèi)癌栓以及患者年齡這些臨床病理參數(shù)之間的差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P㧐0.05）。 3.發(fā)現(xiàn)由SAMe處理24、48h后宮頸癌細(xì)胞系HeLa和胃癌細(xì)胞系MGC出現(xiàn)凋亡。 4.與各自的對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組中宮頸癌細(xì)胞系HeLa和胃癌細(xì)胞系MGC中septin9-v1,v5,v的mRNA表達(dá)水平明顯降低。 5.與對(duì)照組相比，由SAMe處理后宮頸癌細(xì)胞系HeLa和胃癌細(xì)胞系MGC中septin9啟動(dòng)子甲基化程度基本沒有變化。 【結(jié)論】 本研究發(fā)現(xiàn)宮頸癌和胃癌中存在septin9啟動(dòng)子異常甲基化。雖然SAMe并不能使宮頸癌細(xì)胞系HeLa和胃癌細(xì)胞系MGC中septin9的甲基化位點(diǎn)發(fā)生逆轉(zhuǎn)，但在其作用下septin9-v1表達(dá)水平降，并且宮頸癌細(xì)胞系和胃癌細(xì)胞系發(fā)生凋亡。表明SAMe可能通過某種途徑作用于septin9，導(dǎo)致septin9-v1mRNA表達(dá)水平降低，阻礙了JNK信號(hào)途徑參與細(xì)胞增殖的過程，，因而使宮頸癌和胃癌細(xì)胞系發(fā)生凋亡。
[Abstract]:[purpose]To study the methylation rate of septin9 promoter in cervical cancer and gastric cancer, and to observe the effect of SAMe on the expression of septin9 in cervical cancer and gastric cancer.To explore the significance of septin9 promoter methylation in cervical cancer and gastric cancer and the possible mechanism of SAMe induced apoptosis of tumor cells.[methods]Firstly, methylation sensitive highresolution melting curve analysis (MS-HRM) technique was used to detect the methylation of septin9 promoter in cervical cancer cell line HeLa, gastric cancer cell line MGC and 13 cases of cervical cancer tissues.The correlation between methylation of septin9 promoter and clinicopathological process of cervical carcinoma was analyzed.Secondly, the apoptosis of cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was observed by DAPI fluorescence nuclear staining after 24 h treatment with SAMe for 48 h.Finally, quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction (qRT-PCRR) and MS-HRM technique were used to detect the expression of septin9-v1 v5v mRNA and the methylation of septin9 promoter in the cervical cancer cell line HeLa treated with SAMe and the gastric cancer cell line MGC, respectively.[results]1.Septin9 promoter methylation was found in cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC.2.It was found that there was methylation of septin9 promoter in the tissues of cervical carcinoma (38.5% and 513), but there was no significant difference between the methylation of septin9 promoter and clinical stages, lymph node metastasis, intravascular cancer thrombus and age of the patients.3.It was found that apoptosis of cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was observed after treatment with SAMe for 24 h for 48 h.4.Compared with the control group, the mRNA expression of septin9-v1v5v in cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was significantly decreased in the experimental group.5.Compared with the control group, the degree of methylation of septin9 promoter in cervical cancer cell line HeLa and gastric cancer cell line MGC was almost unchanged after treated with SAMe.[conclusion]In this study, abnormal methylation of septin9 promoter was found in cervical cancer and gastric cancer.Although SAMe could not reverse the methylation site of septin9 in HeLa and MGC cells, the expression of septin9-v1 decreased, and apoptosis occurred in cervical cancer and gastric cancer cell lines.It is suggested that SAMe may act on septin9 through some way, resulting in the decrease of septin9-v1mRNA expression, which hinders the JNK signaling pathway to participate in the process of cell proliferation and thus induces apoptosis in cervical and gastric cancer cell lines.
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R737.33;R735.2

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本文編號(hào)：1757919