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雙氫青蒿素對人卵巢癌裸鼠移植瘤的作用及P53表達(dá)的影響

發(fā)布時間:2018-03-26 05:22

  本文選題:雙氫青蒿素 切入點:裸鼠移植瘤 出處:《山西醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文


【摘要】:目的:研究雙氫青蒿素(DHA)對人卵巢癌細(xì)胞株H0-8910裸鼠皮下移植瘤的作用及P53表達(dá),探討其可能的作用機(jī)制。 方法: H0-8910注入裸小鼠腋下,建立人卵巢癌裸鼠移植瘤的模型,將造模成功的30只裸鼠隨機(jī)分為5組,即空白組(生理鹽水)、低劑量DHA組(100mg/kg)、中劑量DHA組(150mg/kg)、高劑量DHA組(200mg/kg),順鉑對照組(2mg/kg),6只/組。順鉑采取腹腔注射的方式,,給藥5d后停藥,其余組均采用灌胃的方式連續(xù)給藥10d,第11d處死裸鼠,稱取各組移植瘤重量,比較各組用藥后移植瘤的抑瘤率;免疫組織化學(xué)法和western-blot法檢測腫瘤組織內(nèi)P53蛋白的表達(dá);實時熒光定量PCR法來測定腫瘤組織內(nèi)P53基因的表達(dá)。 結(jié)果:①DHA有一定的抑制裸鼠移植瘤生長的作用,且有濃度依賴性。低、中、高劑量DHA組及順鉑組的抑瘤率分別為24.8%、37.2%、55.4%及56.2%,各組和空白組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義,P 0.05,低、中劑量組與順鉑組抑瘤率比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義, P 0.05,高劑量組與順鉑組抑瘤率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義。②病理學(xué)鏡下見細(xì)胞體積大,胞質(zhì)較疏松,核深染,核固縮、核碎裂及核溶解的程度不同,細(xì)胞中能看到局灶性壞死。③免疫組化法結(jié)果證實隨著DHA劑量的增加突變型P53蛋白表達(dá)減弱;western-blot法檢測到DHA組野生型P53蛋白的表達(dá)上調(diào)。④實時熒光定量PCR法檢測到DHA組野生型P53基因的表達(dá)上調(diào)。 結(jié)論: DHA可以明顯的抑制人卵巢癌裸鼠移植瘤的生長,且有濃度依賴性,其作用機(jī)制可能與上調(diào)野生型P53的表達(dá)導(dǎo)致細(xì)胞凋亡相關(guān)。
[Abstract]:Aim: to study the effect of dihydroartemisinin (DHA) on subcutaneous transplantation of human ovarian cancer cell line H0-8910 and the expression of p53 in nude mice. Methods: H0-8910 was injected into the axillary of nude mice to establish the transplanted tumor model of human ovarian cancer in nude mice. Thirty nude mice were randomly divided into 5 groups. That is, the blank group (normal saline, low dose DHA group, low dose DHA group), middle dose DHA group (150 mg / kg), high dose DHA group (200 mg / kg), cisplatin control group (2 mg / kg), 6 rats / group. Cisplatin was injected intraperitoneally and stopped after 5 days of administration. All the other groups were administrated by gavage for 10 days, the nude mice were killed on the 11th day, the tumor weight of each group was taken out, the tumor inhibition rate was compared, the expression of p53 protein in tumor tissue was detected by immunohistochemical method and western-blot method. The expression of p53 gene in tumor tissues was detected by real-time fluorescence quantitative PCR. Results the growth of transplanted tumor in nude mice was inhibited by 1: 1DHA in a concentration-dependent manner. The inhibitory rates of low, middle and high dose DHA and cisplatin groups were 55.4% and 56.2%, respectively. There was significant difference between the two groups (P 0.05, P 0.05, P < 0.05). There was significant difference in tumor inhibition rate between middle dose group and cisplatin group (P 0.05). There was no significant difference in tumor inhibition rate between high dose group and cisplatin group. 2 there was no significant difference in tumor inhibition rate between high dose group and cisplatin group. 2. Under pathological microscope, large cell size, loose cytoplasm, deep staining of nucleus and pyknosis of nucleus were found. The degree of nuclear fragmentation and dissolution varies, The expression of p53 protein decreased with the increase of DHA dose. The expression of wild-type p53 protein was up-regulated by Western blot in DHA group. 4 real-time fluorescence quantitative PCR method was used to detect DHA. The expression of wild type p53 gene was up-regulated. Conclusion: DHA can inhibit the growth of human ovarian cancer xenografts in a dose-dependent manner, and its mechanism may be related to the up-regulation of wild-type p53 expression and apoptosis.
【學(xué)位授予單位】:山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R737.31

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本文編號:1666515

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