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Beclin1和HLAⅠ、Ⅱ在人卵巢癌SKOV3細胞中的表達

發(fā)布時間:2018-03-20 15:30

  本文選題:卵巢腫瘤 切入點:Beclin 出處:《臨床與實驗病理學雜志》2017年09期  論文類型:期刊論文


【摘要】:目的探討轉(zhuǎn)染Beclin1質(zhì)粒的自噬基因Beclin1和免疫應(yīng)答效應(yīng)分子HLAⅠ、Ⅱ在人卵巢癌SKOV3細胞中的表達,分析Beclin1在卵巢癌免疫應(yīng)答中的作用。方法應(yīng)用基因轉(zhuǎn)染技術(shù)、RT-PCR、Western blot法檢測Beclin1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SKOV3細胞前后Beclin1和HLAⅠ、Ⅱ的mRNA和蛋白表達水平的變化。應(yīng)用免疫熒光顯微鏡觀察Beclin1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SKOV3細胞后,其自噬小體的變化。用MTT法檢測Beclin1質(zhì)粒轉(zhuǎn)染SKOV3前后細胞的增殖活性。結(jié)果 SKOV3細胞轉(zhuǎn)染Beclin1質(zhì)粒后,Beclin1的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平分別是空載體組的5、2倍。熒光顯微鏡觀察,轉(zhuǎn)染Beclin1質(zhì)粒組卵巢癌細胞MDC標記的自噬小體數(shù)量顯著增多。RT-PCR和Western blot結(jié)果顯示,轉(zhuǎn)染Beclin1可誘導(dǎo)HLAⅠ、Ⅱ等位基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯。Beclin1質(zhì)粒組的HLAⅠ-A、B、C和HLAⅡ-DP、DQ、DR的mRNA分別是空載體組的2、1.6、3倍和2、6、3倍;其HLAⅠ、Ⅱ的蛋白表達分別是空載體組的2、1.6倍。MTT結(jié)果顯示,Beclin1質(zhì)粒組與空載體組、空白對照組相比,在轉(zhuǎn)染24、48、72、96 h后,其細胞生長抑制率分別為42.6%、37.8%、24.35%、14.81%。結(jié)論在人卵巢癌SKOV3細胞中,轉(zhuǎn)染外源性Beclin1可誘導(dǎo)細胞自噬并使免疫應(yīng)答效應(yīng)分子HLAⅠ、Ⅱ的表達增加。HLAⅠ、Ⅱ表達的增加可能使卵巢癌細胞免疫應(yīng)答增強。轉(zhuǎn)染外源性Beclin1可抑制卵巢癌SKOV3的細胞增殖。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of autophagy gene Beclin1 and immune response effector molecule HLA 鈪,

本文編號:1639692

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