發(fā)布時(shí)間：2018-03-12 11:12

  本文選題：AOPPs　切入點(diǎn)：子癇前期　出處：《南方醫(yī)科大學(xué)》2014年博士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：研究背景 妊娠期高血壓疾病是妊娠期特有的全身性疾病,我國(guó)發(fā)病率為9.4%-10.4%,國(guó)外報(bào)道發(fā)病率為7%-12%。該疾病不但嚴(yán)重影響了母嬰健康,至今為止仍然是母嬰發(fā)病率及死亡率較高的主要原因。子癇前期(preeclampsia)是該疾病最常見(jiàn)的類型。流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示,子癇前期孕產(chǎn)婦的死亡率約為5%-10%,且圍產(chǎn)兒死亡率在子癇前期及子癇患者更高達(dá)33.9%-68.6%。子癇前期以妊娠20周以后首次出現(xiàn)高血壓、蛋白尿、水腫為主要特征,并可伴有全身多臟器的損害;病情嚴(yán)重者可能因抽搐、腦出血、肺水腫、心功能衰竭、彌漫性血管內(nèi)出血而導(dǎo)致死亡。臨床上處理子癇前期的患者,主要以對(duì)癥治療和終止妊娠為主。由于缺乏明確的預(yù)測(cè)手段和防治對(duì)策,使子癇前期成為導(dǎo)致孕產(chǎn)婦死亡的第二大原因,也是導(dǎo)致圍產(chǎn)兒發(fā)病及死亡的主要原因。其發(fā)病機(jī)制是多因素的,且目前尚不十分明確。現(xiàn)多數(shù)學(xué)者認(rèn)為子癇前期的發(fā)生、發(fā)展的原因和過(guò)程可能與以下幾種因素和學(xué)說(shuō)相關(guān)：免疫失衡機(jī)制,胎盤淺著床,血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和胎盤滋養(yǎng)細(xì)胞缺血,胰島素抵抗,鈣平衡失調(diào),遺傳因素、營(yíng)養(yǎng)缺乏等。其中細(xì)胞功能損傷及凋亡均與氧化應(yīng)激有著密切的關(guān)系。 現(xiàn)有部分研究表明氧化應(yīng)激學(xué)說(shuō)可能是子癇前期的重要機(jī)制之一。子癇前期患者體內(nèi)氧化系統(tǒng)和抗氧化系統(tǒng)的平衡遭到了破壞；活性氧族(Reactive Oxygen Species, ROS)與抗氧化體系之間失去平衡。其中氧化作用明顯加強(qiáng),而抗氧化作用則相對(duì)減弱,總平衡向氧化方向增強(qiáng)。其實(shí)在正常妊娠孕婦體內(nèi)也存在著不等量的自由基及其產(chǎn)物,但是由于妊娠期孕婦體內(nèi)抗氧化能力相應(yīng)提高,二者之間仍處于平衡狀態(tài),正常的生理性妊娠不致于形成氧化應(yīng)激。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,蛋白、多肽、氨基酸對(duì)各種自由基及其相關(guān)氧化物相當(dāng)敏感。在子癇前期患者體內(nèi),氧化產(chǎn)物增多(脂質(zhì)過(guò)氧化物、蛋白氧化產(chǎn)物、核酸)而抗氧化能力降低,導(dǎo)致子癇前期患者體內(nèi)呈現(xiàn)氧化應(yīng)激狀態(tài)。氧化應(yīng)激在許多與細(xì)胞功能受損相關(guān)的疾病中發(fā)揮著重要作用。由于子癇前期患者的缺血、缺氧可以導(dǎo)致大量的自由基生成、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)過(guò)氧化物產(chǎn)生、內(nèi)皮細(xì)胞損傷等；這種過(guò)程在子癇前期疾病發(fā)生發(fā)展的過(guò)程中呈正反饋且加重了氧化應(yīng)激,導(dǎo)致了疾病進(jìn)一步惡化發(fā)展。目前研究表明,蛋白質(zhì)也是氧化應(yīng)激攻擊的主要靶分子之一,主要表現(xiàn)為氨基酸殘基氧化、肽鏈斷裂或者蛋白質(zhì)分子的交聯(lián)聚合、蛋白質(zhì)的疏水性與對(duì)水解酶的抵抗力增強(qiáng),從而使蛋白質(zhì)喪失生物活性并易于沉積。細(xì)胞的損傷及功能失調(diào)是子癇前期疾病特征性病理變化之一,它也是子癇前期疾病多器官功能損傷的病理生理學(xué)基礎(chǔ)。許多子癇前期患者在臨床癥狀出現(xiàn)以前,胎盤的形態(tài)與功能方面的改變就已經(jīng)出現(xiàn),并且臨床上大部分子癇前期患者在胎盤娩出后其臨床癥狀和體征很快就隨之消失；這均表明了胎盤在子癇前期疾病的發(fā)生發(fā)展過(guò)程中可能起到了關(guān)鍵作用。基礎(chǔ)研究表明,子癇前期的發(fā)病機(jī)制可歸納為胎盤淺著床和全身血管內(nèi)皮細(xì)胞的激活兩個(gè)階段；第一階段的胎盤血液灌注減少,產(chǎn)生過(guò)多的活性氧,造成氧化應(yīng)激,導(dǎo)致孕婦血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷,從而引發(fā)第二階段全身血管內(nèi)皮細(xì)胞的病理性損傷。全身血管內(nèi)皮損傷和系統(tǒng)性炎癥反應(yīng)又加重了機(jī)體的氧化應(yīng)激失衡,最終導(dǎo)致了子癇前期的一系列臨床癥狀和體征。根據(jù)目前的臨床和基礎(chǔ)研究,我們有理由相信子癇前期是一種胎盤源性疾病,胎盤的氧化-抗氧化的失衡是其發(fā)病的不可或缺的環(huán)節(jié)。 晚期氧化蛋白產(chǎn)物(advanced oxidation protein products, AOPP)是一種新型的蛋白類氧化應(yīng)激標(biāo)志物,是氧化應(yīng)激引起體內(nèi)各種蛋白質(zhì)氧化所形成的終末產(chǎn)物的總稱。它于1996年由Witko-Sarsat首次報(bào)道,于尿毒癥患者血漿中首次發(fā)現(xiàn),在慢性腎功能衰竭患者的血漿中分離出來(lái)。它是血漿白蛋白被自由基和反應(yīng)性氧系氧化后形成的雙酪氨酸蛋白交連產(chǎn)物,其主要成分來(lái)自于：血清白蛋白被自由基或反應(yīng)性氧系(主要為中性粒細(xì)胞髓過(guò)氧酶產(chǎn)生的氯化氧化物)氧化而成。AOPP相對(duì)于既往普遍關(guān)注的脂質(zhì)過(guò)氧化物標(biāo)志而言,它形成早,存在時(shí)間長(zhǎng),更加穩(wěn)定,是反映蛋白氧化應(yīng)激損傷的可信指標(biāo)；同時(shí)也是氧化應(yīng)激時(shí)重要的促炎癥因子,炎癥介質(zhì)是參與細(xì)胞損傷的重要物質(zhì)。體外研究已經(jīng)證實(shí),AOPP可通過(guò)不同途徑參與誘導(dǎo)腎臟足細(xì)胞凋亡、血管內(nèi)皮細(xì)胞激活、胰島素抵抗等一系列病理生理過(guò)程。目前已經(jīng)證實(shí)在高齡、慢性腎臟疾病、冠狀動(dòng)脈疾病、糖尿病、代謝綜合征、多囊卵巢綜合征等等疾病患者中均存在慢性AOPP蓄積。該類人群在妊娠過(guò)程中與正常人群相比更容易出現(xiàn)早產(chǎn)、子癇前期、胎兒宮內(nèi)生長(zhǎng)受限、胎盤早剝、重復(fù)的胎兒丟失、宮內(nèi)死胎等等妊娠并發(fā)癥。進(jìn)一步而言,對(duì)于AOPP為何沉積于上述疾病患者的體內(nèi),其機(jī)制的研究也日漸深入和明晰。Hideaki Kaneda等的研究表明慢性冠狀動(dòng)脈疾病與尿毒癥中一樣,血漿白蛋白發(fā)生了氧化,該類疾病患者的血漿中AOPP水平和尿毒癥患者血漿中同樣增高,并且AOPP水平與慢性冠狀動(dòng)脈疾病的發(fā)生以及該類疾病的嚴(yán)重程度相關(guān)；該實(shí)驗(yàn)證明了氧化應(yīng)激可能與慢性冠狀動(dòng)脈疾病的病理生理過(guò)程密切相關(guān)。Agnieszka Piwoman等學(xué)者研究發(fā)現(xiàn),如妊娠期高血壓疾病、妊娠期糖尿病等均屬于復(fù)雜性代謝紊亂性疾病,其發(fā)病機(jī)制與活性氧的產(chǎn)生及抗氧化系統(tǒng)功能失衡有關(guān),在糖尿病患者中TRAP(抗酒石酸酸性磷酸酶)及SH(蠶絲水解物)水平均有不同程度的降低,而CO2、NH2及AOPP水平增高；AOPP的表達(dá)水平在Ⅱ型糖尿病患者、子癇前期患者血漿中明顯增高(本課題組前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果),可推測(cè)AOPP可能是一種評(píng)估糖尿病病人氧化應(yīng)激介導(dǎo)蛋白損傷的有用指標(biāo)。AOPP不僅僅是氧化應(yīng)激的產(chǎn)物,它還可以引起單核細(xì)胞(中性粒細(xì)胞)的呼吸爆發(fā),從而誘導(dǎo)單核細(xì)胞產(chǎn)生更多的活性氧,正反饋誘導(dǎo)或加重氧化應(yīng)激反應(yīng),使得機(jī)體呈現(xiàn)出一種持續(xù)氧化應(yīng)激狀態(tài)。 胰高血糖素樣肽鏈-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)主要是由腸道內(nèi)分泌L細(xì)胞分泌的多肽,作為一種安全、有效的促胰島素分泌劑越來(lái)越受到關(guān)注,它本是治療Ⅱ型糖尿病的一種新途徑。GLP-1除了廣為人知的促進(jìn)胰島β細(xì)胞增值、抑制β細(xì)胞凋亡、促進(jìn)胰島素分泌等等作用外；近些年的研究顯示其在抑制氧化應(yīng)激中也承擔(dān)著重要的角色。它可以降低TNF-a等誘導(dǎo)的炎癥水平,以減少高凝狀態(tài)和炎癥反應(yīng)對(duì)于細(xì)胞的損傷；此外,GLP-1可抑制單核細(xì)胞粘附于人的主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,減輕血管炎性損傷,組織冠狀動(dòng)脈粥樣硬化及其相關(guān)疾病的進(jìn)展。大量的臨床及實(shí)驗(yàn)性研究資料表明,GLP-1保護(hù)細(xì)胞生理功能可能與抑制氧化應(yīng)激有關(guān),但是其機(jī)制尚未十分明確。研究表明,在胰島β細(xì)胞、心肌細(xì)胞、膽囊細(xì)胞中,GLP-1均表現(xiàn)出了明顯的抗氧化應(yīng)激作用。那么在妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞中,GLP-1是否具有抑制AOPP抗氧化應(yīng)激的作用,其作用機(jī)制是否與PI13k/Akt信號(hào)傳導(dǎo)通路有關(guān)。這些問(wèn)題將在本實(shí)驗(yàn)中得到初步的探索性答案。 目前已發(fā)現(xiàn)子癇前期血漿AOPP水平明顯高于正常孕婦。因此我們推測(cè)孕婦胎盤AOPP蓄積可能是誘導(dǎo)滋養(yǎng)細(xì)胞損傷、功能障礙并引起子癇前期發(fā)生過(guò)程中新的致病物質(zhì)。本研究從探討子癇前期孕婦胎盤中AOPP表達(dá)水平與子癇前期嚴(yán)重程度的相關(guān)性以及子癇前期患者胎盤AOPP高表達(dá)可能的臨床意義,作為切入點(diǎn)。在體外的細(xì)胞水平進(jìn)行實(shí)驗(yàn)探索性研究,旨在證明AOPP通過(guò)NADPH通路誘導(dǎo)妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡；以及GLP-1抑制AOPP誘導(dǎo)的凋亡及其機(jī)制。為進(jìn)一步尋找子癇前期的發(fā)病原因及機(jī)制提供理論基礎(chǔ)。 第一部分AOPP在子癇前期與正常妊娠胎盤組織中的表達(dá) 【目的】通過(guò)測(cè)定AOPP在子癇前期患者和正常孕婦胎盤組織中的表達(dá)水平及其差異；探討AOPP與子癇前期發(fā)病機(jī)制的相關(guān)性；為進(jìn)一步研究氧化應(yīng)激在子癇前期發(fā)病機(jī)制中的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路提供線索及切入點(diǎn)。 【方法】隨機(jī)選取2012年9月-2013年9月南方醫(yī)科大學(xué)南方醫(yī)院收治并以剖宮產(chǎn)方式分娩的子癇前期患者共50例,其中子癇前期輕度(mildpreeclampsia, MPE)25例,子癇前期重度(severe preeclampsia, SPE)25例；選取同期足月因社會(huì)因素行剖宮產(chǎn)分娩的孕婦50例作為對(duì)照組。運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)子癇前期患者(實(shí)驗(yàn)組)與正常妊娠孕婦(對(duì)照組)胎盤組織中AOPP的表達(dá)水平；測(cè)定切片平均灰密度值,半定量胎盤中AOPP的表達(dá)量。采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件,計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。組間比較采用ANOVA檢驗(yàn)。P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)果](1)正常孕婦組胎盤組織基本無(wú)染色。子癇前期組胎盤組織中均可見(jiàn)棕褐色陽(yáng)性染色。子癇前期輕度組AOPP主要表達(dá)于絨毛合體滋養(yǎng)層,偶見(jiàn)于絨毛細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞。子癇前期重度組AOPP在絨毛合體滋養(yǎng)層細(xì)胞以及絨毛細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞中均明顯表達(dá)。(2)與對(duì)照組(30.746±6.99)相比,輕度子癇前期患者(64.056±9.63)胎盤組織中的AOPP表達(dá)水平明顯增高,且差異具有顯著性(F=415.39；P0.05)。與對(duì)照組(30.746±6.99)相比,重度子癇前期患者(97.516±13.72)胎盤組織中的AOPP表達(dá)水平亦明顯增高,差異具有顯著性(F=415.39；P0.05)。重度子癇前期患者胎盤組織中的AOPP表達(dá)水平高于輕度子癇前期患者胎盤組織中的表達(dá)量(F=415.39；P0.05)。 [結(jié)論]AOPP在子癇前期患者的胎盤中的主要表達(dá)位置為合體滋養(yǎng)層細(xì)胞以及絨毛細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞。子癇前期患者胎盤組織中AOPP的表達(dá)水平與正常妊娠孕婦胎盤中的表達(dá)相比,具有顯著性差異。本部分實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示孕婦胎盤中AOPP的表達(dá)增高是子癇前期的重要病理變化,追溯其根源可能與子癇前期疾病有關(guān),同時(shí)AOPP誘導(dǎo)加重了子癇前期的發(fā)生和發(fā)展；進(jìn)一步說(shuō)明了子癇前期的發(fā)病機(jī)制是多因素多因子共同參與,相互作用的結(jié)果。 第二部分AOPP通過(guò)NADPH通路誘導(dǎo)妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡 [目的]通過(guò)一系列體外細(xì)胞水平的實(shí)驗(yàn)室基礎(chǔ)研究,探討AOPP誘導(dǎo)妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡的機(jī)制。 [方法]采用Witko-Sarsat等介紹的方法制備AOPP。用ELISA試劑盒復(fù)孔檢測(cè)β-HCG的含量。用侵襲小室試驗(yàn)檢測(cè)AOPP刺激后妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲能力的變化。用Hoechst33258熒光法檢測(cè)凋亡。用Western Blotting檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)以及檢測(cè)尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(Nicotinamide Adanine Dinucleotide Phosphate, NADPH)氧化酶亞基的表達(dá)。用活性氧分子(Reactive Oxygen Species,ROS)陰離子熒光探針,檢測(cè)AOPP對(duì)活性氧分子的影響和作用。所有數(shù)據(jù)代表三次以上的重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果,以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,所有統(tǒng)計(jì)由統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0完成。多個(gè)樣本均數(shù)的比較采用One-Way ANOVA,方差齊時(shí)兩兩比較采用LSD,方差不齊時(shí)采用Dunnett's T3法,P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)果]可實(shí)現(xiàn)無(wú)內(nèi)毒素的AOPP的制備。AOPP抑制妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞β-HCG的分泌(MSA刺激組F=0.913, P=0.477;AOPP刺激組F=20.603,P=0.000)。AOPP抑制妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力(F=197.593;P=0.000)。AOPP組妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡率明顯升高(不同濃度刺激組,F=37.813,P=0.000;不同時(shí)間刺激組,F=24.318,P=0.000),apocynin阻斷AOPP此效應(yīng)。AOPP誘導(dǎo)了體外的NADPH氧化酶及其相關(guān)亞基的活化(NOX2:F=21.318,P=0.000;NOX4:F=73.643,P=0.000;p47phox: F=126.678, P=0.000;p22phox:F=4.323, P=0.000),NADPH氧化酶的抑制劑apocynin可阻斷AOPP此效應(yīng)。AOPP誘導(dǎo)凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)(p53:F=40.979,P=0.00;Bax:F=274.420, P=0.00;Bcl-2:F=38.881, P=0.00)。 AOPP在體外刺激了ROS的表達(dá)(F=38.277,P=0.00),apocynin可阻斷AOPP此效應(yīng)。 [結(jié)論]這一部分的實(shí)驗(yàn)研究證實(shí),AOPP抑制P-HCG的分泌和妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力可能與胎盤淺著床(子癇前期發(fā)病機(jī)制中比較受肯定和公認(rèn)的理論之一)的理論相符合,因此AOPP的高表達(dá)是不利于妊娠順利進(jìn)行的。AOPP以時(shí)間和劑量的方式誘導(dǎo)了妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞的凋亡,其途徑主要是通過(guò)NADPH通路。P53、Bax蛋白參與AOPP誘導(dǎo)的妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡,P53、Bax蛋白在NAPDH氧化酶下游。NADPH氧化酶抑制劑apocynin干預(yù)阻斷了AOPP誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷。因此,AOPP誘導(dǎo)的妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞NADPH氧化酶的活化以及產(chǎn)生的大量ROS是導(dǎo)致細(xì)胞損傷的重要因素之一,這一結(jié)論為臨床防治子癇前期等妊娠期相關(guān)病變提供了一定程度上的理論依據(jù)。 第三部分GLP-1抑制AOPP所誘導(dǎo)的凋亡及其機(jī)制 [目的]在本課題第二部分初步證實(shí)了AOPP誘導(dǎo)妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡的研究基礎(chǔ)上,通過(guò)GLP-1干預(yù)AOPP誘導(dǎo)妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡的作用,并檢驗(yàn)其對(duì)凋亡相關(guān)分子及PI3K/Akt通路的影響,初步探討GLP-1對(duì)AOPP誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的影響及其分子機(jī)制。 [方法]CCK-8(cell counting kit-8)比色法測(cè)定細(xì)胞活力及增值能力。熒光顯微鏡檢測(cè)活性氧(ROS)的表達(dá)。ELISA法檢測(cè)細(xì)胞凋亡蛋白酶caspase-9,-3的活性。Western-blot檢測(cè)p-Akt等通路相關(guān)蛋白的表達(dá)。ELISA法檢測(cè)凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax、Cyto-C的表達(dá)。所有數(shù)據(jù)代表三次以上的重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,所有統(tǒng)計(jì)由統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0完成。多個(gè)樣本均數(shù)的比較采用One-Way ANOVA,方差齊時(shí)兩兩比較采用LSD,方差不齊時(shí)采用Dunnet's T3法,P0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 [結(jié)果]在一定濃度范圍內(nèi)(50-150nmol/L),GLP-1處理AOPP誘導(dǎo)的妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞后進(jìn)行實(shí)驗(yàn),結(jié)果表明GLP-1抑制AOPP誘導(dǎo)的妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)ROS的生成(P=86.222P=0.000)。GLP-1可部分減輕AOPP誘導(dǎo)caspase-9、 caspase-3活性的增加(caspase-9:F=10.321P=0.004; caspase-3:F=20.989,P=0.000)。LY294002作為P13K的抑制劑,可拮抗GLP-1對(duì)AOPP的以下作用：GLP-1抑制AOPP誘導(dǎo)的細(xì)胞活力下降(F=71.07,P=0.000)、GLP-1抑制AOPP誘導(dǎo)細(xì)胞p-Akt水平低表達(dá)(不同濃度刺激時(shí)F=10.679,P=0.004；不同時(shí)間刺激時(shí)F=45.886P=0.000),GLP-1抑制AOPP誘導(dǎo)細(xì)胞Bax(F=33.017P=0.00)、 cyto-c(F=49.483,P=0.00)高表達(dá)以及Bcl-2的低表達(dá)(F=45.258P=0.00)。 [結(jié)論]本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)GLP-1在一定的濃度范圍內(nèi)有拮抗AOPP抑制妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞活力的作用,而且減少AOPP誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷。AOPP作用于妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞后,ROS水平升高,凋亡蛋白酶caspase-9、-3的活性增加,GLP-1可部分性減少AOPP誘導(dǎo)的上述效應(yīng)。因此推測(cè)氧化應(yīng)激、caspase-9、-3可能參與了GLP-1拮抗AOPP誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡的作用。GLP-1至少部分通過(guò)PI3k/Akt信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路發(fā)揮抗凋亡作用,減輕AOPP誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。GLP-1可調(diào)節(jié)AOPP誘導(dǎo)妊娠滋養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)Bcl-2、Bax、cyto-c表達(dá)水平,且此調(diào)節(jié)作用與PI3K/Akt信號(hào)通路有關(guān)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：南方醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R714.244

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 袁方,劉尚喜,田建偉;晚期氧化蛋白產(chǎn)物誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生活性氧[J];第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2004年12期

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本文編號(hào)：1601303