本文選題：卵巢癌　切入點：塞來昔布　出處：《天津醫(yī)科大學》2014年碩士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的： 通過體外實驗觀察非甾體抗炎藥塞來昔布對卵巢癌SKOV3細胞順鉑化療的增敏作用,并探討可能的分子機制。 方法： 1、MTT法檢測不同濃度塞來昔布對SKOV3細胞的生長抑制作用,并篩選出無毒劑量濃度,作為后續(xù)實驗濃度。 2、MTT法檢測順鉑聯(lián)合無毒劑量塞來昔布對SKOV3的細胞毒性。 3、流式細胞術(shù)(FCM)檢測順鉑聯(lián)合無毒劑量塞來昔布對SKOV3細胞凋亡率的影響。 4、Real-Time PCR、Western Blot檢測順鉑與無毒劑量塞來昔布聯(lián)合用藥后SKOV3細胞中Survivin mRNA及蛋白的表達變化。 5、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)檢測順鉑與無毒劑量塞來昔布聯(lián)合用藥后SKOV3細胞培養(yǎng)基中前列腺素E2的含量。 結(jié)果： 1、MTT結(jié)果顯示：COX-2特異性抑制劑塞來昔布對卵巢癌SKOV3細胞具有生長抑制作用,且呈時間-劑量依賴性。當塞來昔布濃度≤10uM/L時,對SKOV3細胞生長無顯著抑制作用(抑制率10%),因此篩選10uM作為后續(xù)實驗濃度。 2、MTT結(jié)果顯示：10uM塞來昔布與順鉑聯(lián)合應(yīng)用顯著抑制SKOV3細胞的生長,生長抑制率明顯高于單用塞來昔布組和順鉑組,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000),且呈時間依賴性(F=204.287,P=0.000),根據(jù)金正鈞法計算兩藥聯(lián)合作用24、48和72h后的合并效應(yīng)q值,分別為1.27、1.37、1.38,均1.15,表現(xiàn)為增敏作用。 3、流式細胞術(shù)結(jié)果：10uM塞來昔布與順鉑聯(lián)合作用SKOV348h后細胞凋亡率達46.98%,高于單用DDP組的27.99%。 4、Real-Time PCR及Weatern Blot檢測結(jié)果表明：l0uM塞來昔布與順鉑聯(lián)合作用SKOV348h后,細胞中Survivin mRNA及蛋白相對表達量均明顯低于單用順鉑組,差異有統(tǒng)計學意義(P=0.000)。 5、ELISA法檢測結(jié)果顯示：10uM塞來昔布與順鉑聯(lián)合作用SKOV3細胞48h后,培養(yǎng)基中人PGE2含量與單用塞來昔布組比較沒有明顯差異(P0.05)。 結(jié)論： 1、非甾體抗炎藥塞來昔布對卵巢癌SKOV3細胞具有生長抑制作用,且呈時間-劑量依賴性； 2、塞來昔布可增加卵巢癌SKOV3細胞對順鉑化療的敏感性,呈時間依賴性； 3、塞來昔布對卵巢癌SKOV3細胞順鉑化療的增敏作用可能與下調(diào)了Survivin基因及蛋白表達水平,促進細胞凋亡有關(guān)； 4、塞來昔布在SKOV3細胞順鉑化療增敏作用中可能僅起到了調(diào)節(jié)作用,并沒有發(fā)揮治療作用,是COX-2非依賴的。
[Abstract]:Objective:. The sensitizing effect of celecoxib, a non-steroidal anti-inflammatory drug, on cisplatin chemotherapy in ovarian cancer SKOV3 cells was studied in vitro and the possible molecular mechanism was discussed. Methods:. 1the inhibitory effect of celecoxib on the growth of SKOV3 cells was detected by MTT assay, and the nontoxic concentration was selected as the subsequent concentration. The cytotoxicity of cisplatin combined with nontoxic dose celecoxib on SKOV3 was detected by MTT assay. 3. The effect of cisplatin combined with nontoxic dose celecoxib on apoptosis of SKOV3 cells was detected by flow cytometry. 4. The expression of Survivin mRNA and protein in SKOV3 cells was detected by Western Blot after the combination of cisplatin and nontoxic celecoxib. 5. The level of prostaglandin E _ 2 in SKOV3 cell culture medium was determined by Elisa. Results:. 1MTT results showed that celecoxib, a specific inhibitor of cyclooxygenase-2, inhibited the growth of ovarian cancer SKOV3 cells in a time-dose dependent manner. When the concentration of celecoxib was 鈮，

本文編號：1561965