本文選題：體外受精　切入點(diǎn)：子宮內(nèi)膜異位癥　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類(lèi)型：學(xué)位論文

【摘要】：子宮內(nèi)膜異位癥（endometriosis, EMs）是指子宮內(nèi)膜組織（腺體和間質(zhì)）出現(xiàn)在子宮腔以外的任何部位而引起的一種疾病，為育齡婦女常見(jiàn)病、多發(fā)病，是引起女性不孕的常見(jiàn)原因之一。體外受精-胚胎移植（in vitrofertilization-embryo transfer, IVF-ET）技術(shù)的應(yīng)用成為解決不孕癥的有效方法，但與其他因素不孕行IVF-ET治療的患者相比，子宮內(nèi)膜異位癥較差的妊娠結(jié)局給患者帶來(lái)很大的精神壓力和經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。子宮內(nèi)膜異位癥導(dǎo)致IVF-ET不良結(jié)局的因素紛繁復(fù)雜，包括生殖內(nèi)分泌系統(tǒng)調(diào)節(jié)、卵子質(zhì)量、胚胎發(fā)育、胚胎植入及內(nèi)膜容受性改變等方面。目前很多研究已經(jīng)從上述層面分析了子宮內(nèi)膜異位癥與IVF-ET妊娠結(jié)局的關(guān)系，而其中卵母細(xì)胞質(zhì)量下降是影響其治療結(jié)局的關(guān)鍵因素之一。 卵母細(xì)胞的質(zhì)量體現(xiàn)了卵子內(nèi)在的發(fā)育潛能，質(zhì)優(yōu)的卵母細(xì)胞在正常受精、胚胎發(fā)育及著床的過(guò)程中起到至關(guān)重要的作用，并且對(duì)妊娠的建立和維持、胎兒的發(fā)育也具有深刻影響，因此在IVF-ET中努力提高卵母細(xì)胞質(zhì)量意義重大。卵母細(xì)胞的發(fā)育包括生長(zhǎng)和成熟兩個(gè)階段，其成熟與卵泡的生長(zhǎng)相伴進(jìn)行。同時(shí)，卵母細(xì)胞通過(guò)廣泛的縫隙連接，局部因子的自分泌及旁分泌功能與周?chē)念w粒細(xì)胞進(jìn)行信息交流，構(gòu)成統(tǒng)一的整體。因此，從卵泡液的成分及顆粒細(xì)胞方面對(duì)卵母細(xì)胞質(zhì)量進(jìn)行研究評(píng)估引起廣泛關(guān)注，而卵母細(xì)胞分泌因子（Oocyte secreted factors, OSFs）的發(fā)現(xiàn)又為研究卵母細(xì)胞質(zhì)量、預(yù)測(cè)胚胎質(zhì)量及妊娠結(jié)局提供了新的思路。在眾多卵母細(xì)胞因子中，生長(zhǎng)分化因子-9（growth differentiation factors, GDF-9）是最早被發(fā)現(xiàn)對(duì)卵泡發(fā)育具有重要作用，并且有研究發(fā)現(xiàn)，以正常婦女作對(duì)照，嚴(yán)重子宮內(nèi)膜異位癥婦女經(jīng)腹腔鏡穿刺大卵泡的卵泡液中，GDF-9水平下降明顯。 綜上所述，本研究第一部分通過(guò)回顧因子宮內(nèi)膜異位癥因素行IVF助孕患者的臨床及實(shí)驗(yàn)室資料并與單純因輸卵管因素不孕者進(jìn)行比較，探討影響子宮內(nèi)膜異位癥IVF-ET結(jié)局的相關(guān)因素；第二部分通過(guò)測(cè)定子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、卵泡液中GDF-9水平及黃素化顆粒細(xì)胞上GDF-9的蛋白及mRNA的表達(dá)，探討GDF-9與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系，力圖探索其影響卵母細(xì)胞質(zhì)量的可能途徑，以期為指導(dǎo)臨床治療提供理論依據(jù)及新思路。 第一部分體外受精-胚胎移植中影響子宮內(nèi)膜異位癥患者妊娠結(jié)局的相關(guān)因素分析 目的：回顧性分析因子宮內(nèi)膜異位癥行體外受精-胚胎移植助孕患者的臨床及實(shí)驗(yàn)室資料，并與單純因輸卵管因素者進(jìn)行比較，探討影響子宮內(nèi)膜異位癥IVF-ET結(jié)局的相關(guān)臨床和實(shí)驗(yàn)室因素。 方法：對(duì)河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科2011年1月至2013年3月行常規(guī)IVF周期的患者，根據(jù)病因不同將子宮內(nèi)膜異位癥組作為實(shí)驗(yàn)組（A組）、單純因輸卵管因素不孕者為對(duì)照組（B組）；其中又根據(jù)妊娠結(jié)局將A組分為妊娠組（A1組）、非妊娠組（A2組）。A組共129個(gè)周期，移植周期為114例，其中A1組60例，A2組54例；B組共1660個(gè)周期。①比較A、B兩組患者的一般資料如年齡，不孕年限，體重指數(shù)（BMI），血清基礎(chǔ)卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）、雌二醇（E2）水平，原發(fā)不孕與繼發(fā)不孕比例；②比較A、B兩組促排卵方案的構(gòu)成比，促性腺激素（Gn）使用天數(shù)及用藥量，人絨毛膜促性腺激素（HCG）注射日（以下簡(jiǎn)稱HCG日）血清LH、E2、孕酮（P）水平；③比較A、B兩組平均獲卵數(shù)、受精率、正常受精率、卵裂率、可移植胚胎數(shù)、移植胚胎數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、周期冷凍率，全胚冷凍率；④比較A、B兩組胚胎種植率及臨床妊娠率、多胎率及流產(chǎn)率。⑤比較A1、A2兩組患者年齡、不孕年限、原發(fā)和繼發(fā)不孕比例、基礎(chǔ)性激素水平、使用Gn天數(shù)及用量、HCG日LH、E2、P水平以及各種方案構(gòu)成比；⑥比較A1、A2兩組平均獲卵數(shù)、受精率、正常受精率、卵裂率、可移植胚胎數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、周期冷凍率等。 結(jié)果：1789個(gè)IVF周期中，子宮內(nèi)膜異位癥組共129個(gè)周期（A組），對(duì)照組1660個(gè)周期（B組）。①A、B兩組患者的平均年齡分別為31.29±4.31歲、29.21±4.04歲，A組顯著高于B組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-5.275，P0.05）；A、B兩組患者的不孕年限分別為4.57±3.99年、3.80±2.73年，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.064，P0.05）；A、B兩組患者原發(fā)不孕的比例分別為62.80%、52.53%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=5.035，P0.05）；A、B兩組血清基礎(chǔ)FSH、LH水平分別為8.18±3.12mIU、3.95±1.79mIU和7.88±3.73mIU、4.74±3.22mIU，兩組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-1.145，P0.05；Z=1.176，P0.05）；A、B兩組血清基礎(chǔ)E2水平為57.47±53.01pg/ml、44.92±32.32pg/ml，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-3.011，P0.05）；②A、B兩組患者促排卵方案（長(zhǎng)方案、短方案、拮抗劑方案、超長(zhǎng)方案）的構(gòu)成比分別為26.3%、4.7%、10.9%、58.1%和78.4%、5.2%、12.9%、3.4%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=529.442，P0.05）；A、B兩組的Gn天數(shù)與Gn用量分別為10.78±2.25天、2896.90±824.71IU和10.13±2.12天、2375.85±764.96IU，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-3.610，P0.05，Z=-7.548，P0.05）；A、B兩組患者的HCG日血清LH、E2、P水平分別為1.69±1.77mIU/ml、2543.88±1547.71pg/ml、1.04±0.56ng/ml和2.23±2.54mIU/ml、3407.31±1444.48pg/ml、1.17±0.69ng/ml，兩組比較LH、E2及P水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=5.715，P0.05；Z=6.16，P0.05；Z=2.430，P0.05）；③A、B兩組患者的平均獲卵數(shù)分別為9.69±7.17枚、13.67±7.83枚，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=6.508，P0.05）；A、B兩組患者的受精率和正常受精率分別為73.60%、60.08%和84.32%、63.54%，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=100.131，P0.05；χ2=6.130，P0.05）；A、B兩組患者的卵裂率分別為98.91%、98.90%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.617，P0.05）；A、B兩組患者的優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)分別為2.39±3.32個(gè)、3.86±3.91個(gè)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=4.712，P0.05）；A、B兩組患者的可利用胚胎數(shù)分別為4.01±3.82個(gè)、5.94±4.27個(gè)，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=5.740，P0.05）；A、B兩組移植胚胎數(shù)分別為2.00±0.51個(gè)、1.70±0.89個(gè)，兩組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Z=0.634，P0.05）；A、B兩組挽救ICSI（rescue ICSI, R-ICSI）率分別為2.29%、2.97%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.324，P0.05）；④A、B兩組患者的周期冷凍率分別為44.96%、64.76%，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=20.203，P0.05），但兩組的全胚冷凍率分別為10.08%、16.20%，比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=3.216，P0.05）；A、B兩組胚胎種植率及臨床妊娠率分別為35.65%、52.63%和36.69%、53.89%，A組低于B組，但差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.068，P0.05；χ2=0.099，P0.05）；A、B兩組的多胎率分別為33.33%、30.11%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.280，P0.05）；A、B兩組的流產(chǎn)率分別為11.67%、6.80%，A組高于B組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=2.044，P0.05）。⑤A1、A2兩組平均年齡、不孕年限分別為30.33±3.72歲、3.93±2.74年和32.33±4.72歲、5.18±5.26年，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=1.766，P0.05；Z=0.935，P0.05）；A1、A2兩組患者的原發(fā)不孕率為71.67%、33.33%，A1組顯著高于A2組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=16.788，P0.05）；A1、A2兩組血清基礎(chǔ)FSH、E2水平分別為8.31±3.30mIU、59.46±62.22pg/ml和8.74±3.27mIU、55.15±51.52pg/ml，兩組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z==1.086，P0.05；Z=-0.738，P0.05）；兩組基礎(chǔ)LH水平為3.55±1.75mIU、4.31±1.91mIU，兩組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-2.082，P0.05）；A1、A2兩組平均使用Gn天數(shù)分別為10.17±3.84天、10.29±2.54天，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-0.609，P0.05）；A1、A2兩組平均Gn用藥量分別為2699±676.91IU、3132.1±923.58IU，A1組少于A2組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-2.758，P0.05）；A1、A2兩組HCG日E2水平為2691.90±1415.73pg/ml、2191.22±1513.05pg/ml，A1組顯著高于A2組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.018，P0.05）。⑥A1、A2兩組的平均獲卵數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、可移植胚胎數(shù)分別為9.50±5.18枚、2.68±2.90個(gè)、4.30±3.00個(gè)和7.72±5.14枚、1.38±1.83個(gè)、2.81±2.12個(gè)，A1組均高于A2組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.364，P0.05；Z=-2.401，P0.05；Z=-3.023，P0.05）；A1、A2兩組受精率、正常受精率分別為74.56%、61.75%和74.10%、58.03%，A1組雖均高于A2組，但兩組相比差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.027，P0.05；χ2=1.391，P0.05）；A1、A2兩組卵裂率為98.82%、98.06%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.710，P0.05）；兩組周期冷凍率為53.33%、24.07%，A1組顯著高于A2組，兩組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=10.184，P0.05）。 結(jié)論：子宮內(nèi)膜異位癥患者年齡偏大，不孕年限長(zhǎng)，原發(fā)不孕比例高，，在卵巢刺激中對(duì)促排卵藥物反應(yīng)性差以及卵母細(xì)胞的受精異常，這些因素可能導(dǎo)致了臨床妊娠率、種植率偏低，流產(chǎn)率偏高；子宮內(nèi)膜異位癥中臨床妊娠者具有對(duì)促排卵藥物反應(yīng)性好、胚胎質(zhì)量?jī)?yōu)的特點(diǎn)。 第二部分GDF-9在子宮內(nèi)膜異位癥患者卵泡液和顆粒細(xì)胞中的表達(dá) 目的：通過(guò)測(cè)定GDF-9在子宮內(nèi)膜異位癥患者卵巢刺激中血清、卵泡液中的水平及黃素化顆粒細(xì)胞上GDF-9蛋白及其mRNA的表達(dá)，探討GDF-9與子宮內(nèi)膜異位癥患者卵母細(xì)胞質(zhì)量和IVF妊娠結(jié)局的關(guān)系，尋找其影響卵母細(xì)胞質(zhì)量的可能途徑。 方法：收集于2012年8月至2013年3月在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院生殖醫(yī)學(xué)科行體外受精-胚胎移植的子宮內(nèi)膜異位癥患者30例（A組）的血清、卵泡液及黃素化顆粒細(xì)胞，同時(shí)以同期單純因輸卵管不孕患者30例（B組），作為對(duì)照組。比較兩組一般指標(biāo)如年齡、基礎(chǔ)性激素水平（FSH、LH、E2）、Gn天數(shù)及用量、平均獲卵數(shù)、平均受精率、平均正常受精率、平均卵裂率、可移植胚胎數(shù)（率）、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)（率）、胚胎種植率及臨床妊娠率等；用酶聯(lián)免疫吸附法（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）測(cè)定兩組血清、卵泡液中GDF-9水平；蛋白印記法測(cè)定兩組黃素化顆粒細(xì)胞中GDF-9蛋白表達(dá)；逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（reversetranscriptase-polymerase chain reaction, RT-PCR）測(cè)定顆粒細(xì)胞上GDF-9mRNA表達(dá)；比較兩組血清、卵泡液中GDF-9水平、黃素化顆粒細(xì)胞中GDF-9蛋白及mRNA的表達(dá)；分析血清、卵泡液GDF-9水平、黃素化顆粒細(xì)胞中GFDF-9蛋白及mRNA表達(dá)與年齡、Gn天數(shù)及用量、獲卵數(shù)、可移植胚胎數(shù)（率）、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)（率）、受精率、卵裂率等的相關(guān)性。 結(jié)果：子宮內(nèi)膜異位癥組共30個(gè)周期（A組），對(duì)照組30個(gè)周期（B組）。①A、B兩組女方的平均年齡分別為31.50±4.83歲、28.15±4.27歲，A組顯著高于B組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-3.080，P0.05）； A、B兩組血清基礎(chǔ)FSH、LH、E2水平分別為8.31±3.62mIU、4.30±1.78mIU、58.88±49.27pg/ml和7.34±1.69mIU、4.42±1.76mIU、43.72±36.81pg/ml，兩組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-0.412，P0.05；t=-0.249，P0.05；Z=-1.224，P0.05）；②A、B兩組的Gn天數(shù)與Gn用量分別為11.17±1.42天、3010.83±655.19IU和9.55±1.28天、2184.20±580.00IU，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-4.080，P0.05；Z=-4.699，P0.05）；A、B兩組患者的HCG日LH、 E2水平分別為1.38±1.20mIU/ml、3066.37±1612.51pg/ml和2.02±1.26mIU/ml、3846.06±1216.97pg/ml，A組均低于B組，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=3.142，P0.05；Z=2.016，P0.05）；但A、B兩組患者的HCG日P水平分別為1.18±0.47ng/ml、1.14±0.69ng/ml，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=0.606，P0.05）；③A、B兩組患者的平均獲卵數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)、可移植胚胎數(shù)分別為10.63±8.10枚、3.27±4.82個(gè)、4.47±4.90個(gè)和15.15±8.23枚、5.28±5.12個(gè)、7.03±5.46個(gè)，A組均低于B組，兩組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（Z=-2.792，P0.05；Z=-2.295，P0.05；Z=-2.380，P0.05）；A、B兩組平均受精率為81.63%±15.72%、77.84%±17.52%，兩組比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-0.700，P0.05）；A、B兩組平均正常受精率分別為55.93%±22.05%、67.34%±15.67%，A組低于B組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-2.331，P0.05）；A、B兩組患者的平均卵裂率分別為97.46%±9.74%、97.67%±5.73%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-1.351，P0.05）； A、B兩組移植胚胎數(shù)分別為1.73±0.94個(gè)、1.76±0.79個(gè)，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=0.142，P0.05）；④A、B兩組的周期冷凍率分別為40%、66.66%，A組顯著低于B組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=20.203，P0.05），但兩組的全胚冷凍率分別為13.33%、15.15%，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.042，P0.05）；A、B兩組胚胎種植率分別為30.77%、34.48%，臨床妊娠率分別為53.33%、60.60%，多胎率分別為60%和66.67%，流產(chǎn)率分別為20.00%、8.33%，兩組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=0.172，P0.05；χ2=0.063，P0.05；χ2=0.105，P0.05；χ2=0.630，P0.05）；⑤A、B兩組取卵日的血清、卵泡液中GDF-9的水平分別為153.47±9.81pg/ml、143.00±90.28pg/ml和204.40±137.65pg/ml、236.85±163.40pg/ml，A組均明顯低于B組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=2.047，P0.05；Z=2.216，P0.05）；A、B兩組黃素化顆粒細(xì)胞中GDF-9蛋白及mRNA表達(dá)分別為0.53±0.17、0.57±0.21和0.72±0.19、0.75±0.18，A組均明顯低于B組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=3.615，P0.05；t=-3.699，P0.05）；⑥A組黃素化顆粒細(xì)胞中GDF-9蛋白與與獲卵數(shù)、可移植胚數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)呈正相關(guān)（r=0.703，P0.05；r=0.644，P0.05；r=0.665，P0.05）；A組黃素化顆粒細(xì)胞上mRNA表達(dá)與與獲卵數(shù)、可移植胚數(shù)、優(yōu)質(zhì)胚胎數(shù)呈正相關(guān)（r=0,515，P0.05；r=0.569，P0.05；r=0.526，P0.05）；B組黃素化顆粒細(xì)胞上GDF-9蛋白及mRNA與受精率呈正相關(guān)，（r=0.442，P0.05；r=0.430，P0.05）。⑦A1、A2組血清、卵泡液中GDF-9濃度分別為191.63±102.04pg/m、196.43±116.83pg/m和134.35±95.45pg/m、124.50±99.70pg/m，A1組顯著高于A2組，兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.288，P0.05；Z=-2.332，P0.05）；A1、A2組黃素化顆粒細(xì)胞上GDF-9蛋白及mRNA表達(dá)水平分別為0.63±0.15、0.70±0.17和0.48±0.16、0.50±0.20，A1組均高于A2組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=2.485，P0.05；Z=-2.772，P0.05）；B1、B2兩組血清、卵泡液中GDF-9濃度分別為256.52±157.45pg/ml、279.24±129.78pg/ml和172.89±119.48pg/ml、190.43±169.01pg/ml，B1組顯著高于B2組，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-2.156，P0.05；Z=-2.090，P0.05）；B1、B2兩組顆粒細(xì)胞上GDF-9蛋白及GDF-9mRNA水平分別為0.76±0.22、0.68±0.22和0.70±0.17、0.78±0.14，兩組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Z=-1.210，P0.05；t=-1.534，P0.05）。 結(jié)論：子宮內(nèi)膜異位癥患者血清、卵泡液中GDF-9濃度以及顆粒細(xì)胞上GDF-9蛋白和mRNA表達(dá)水平下降，其可能通過(guò)影響卵泡發(fā)育、卵母細(xì)胞及胚胎質(zhì)量，使子宮內(nèi)膜異位癥患者臨床妊娠率、胚胎種植率偏低，流產(chǎn)率偏高。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R714.8

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1560648