本文關(guān)鍵詞： 盆底器官脫垂 陰道前壁 成纖維細(xì)胞 聚丙烯 增殖 膠原蛋白　出處：《福建醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

【摘要】：目的： 不同網(wǎng)片對盆底功能障礙性疾病患者的陰道前壁成纖維細(xì)胞增值、膠原蛋白合成的影響。 方法： 選擇2013年3月~2013年5月在南京軍區(qū)福州總院婦產(chǎn)科行盆底重建術(shù)的患者5例作為研究對象。術(shù)中切取的陰道前壁組織，組織塊培養(yǎng)法于體外行陰道前壁成纖維細(xì)胞原代培養(yǎng)。倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，用抗波形蛋白抗體和抗角蛋白抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色法鑒定成纖維細(xì)胞。將培養(yǎng)至第4~6代成纖維細(xì)胞分為4組，分別為加入Prolift網(wǎng)片（Prolift組）、Avaulta網(wǎng)片（Avaulta組）、TVT-O網(wǎng)片（TVT-O組）及不加網(wǎng)片（正常對照組），采用四甲基偶氮唑藍(lán)比色法（MTT法）檢測4組培養(yǎng)第2、4、7天時的細(xì)胞增殖情況，采用Western bolt法檢測成纖維細(xì)胞與網(wǎng)片共培養(yǎng)第4天時成纖維細(xì)胞分泌I、III型膠原蛋白情況。 結(jié)果： 1.用陰道前壁筋膜組織行組織塊法培養(yǎng)可成功獲得大量原代的成纖維細(xì)胞，此法取材方便，過程簡單，成纖維細(xì)胞于體外培養(yǎng)時增殖活躍。用倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)：細(xì)胞貼壁生長，體積較大，多突起，呈紡錘形或星形，細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，多核仁。待所培養(yǎng)的細(xì)胞傳至第4代后用抗波形蛋白抗體和抗角蛋白抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色后，細(xì)胞抗波形蛋白抗體陽性，抗角蛋白抗體陰性，可證實為成纖維細(xì)胞。 2.細(xì)胞增殖實驗(MTT法)：加入網(wǎng)片后培養(yǎng)2天時，正常對照組、Prolift組、Avaulta組和TVT-O組吸光值分別為（0.790±0.023），(0.655±0.017)，(0.644±0.022)和(0.538±0.067)；培養(yǎng)4天時，相應(yīng)組的吸光值分別為（0.843±0.014），(0.716±0.045)，(0.673±0.025)和(0.283±0.008)；培養(yǎng)7天時分別為（2.040±0.035），(1.201±0.126)，(1.109±0.087)和(0.196±0.017)。正常對照組測得各時期的吸光度值均高于相應(yīng)時期的三個網(wǎng)片組，經(jīng)分別比較，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)，表明三種網(wǎng)片對成纖維細(xì)胞增殖均有影響。成纖維細(xì)胞分別與三種不同的網(wǎng)片共培養(yǎng)2天時，Prolift組吸光度值稍高于Avaulta組和TVT-O組，但經(jīng)組間分別兩兩比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；培養(yǎng)第4天和第7天時，Prolift組和Avaulta組吸光值均明顯高于TVT-O組，分別比較，，差異均具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)；Prolift組、Avaulta組各期之間的吸光度值相仿，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。 3. Western blot法：加入網(wǎng)片后培養(yǎng)4天時，正常對照組、 Prolift組、Avaulta組和TVT-O組I型膠原蛋白表達(dá)量分別為（7.801±0.253），(5.421±0.191)，(5.274±0.195)和(4.041±0.154)；Ⅲ型膠原蛋白表達(dá)量分別為（1.062±0.104），(0.870±0.051)，(0.865±0.047)和(0.651±0.073)。正常對照組與Prolift組、Avaulta組和TVT-O組之間的I型和Ⅲ型膠原蛋白分別兩兩比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)；其中Prolift組和Avaulta組的I型和Ⅲ型膠原蛋白分別比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)，但Prolift組、Avaulta組中的I型、Ⅲ型膠原蛋白分別與TVT-O組進(jìn)行比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。 結(jié)論： l.應(yīng)用組織塊法體外培養(yǎng)盆底功能障礙性疾病患者的陰道壁成纖維細(xì)胞，可獲得大量的原代成纖維細(xì)胞，增殖良好。 2.三種聚丙烯網(wǎng)片對體外培養(yǎng)條件下的人陰道壁成纖維細(xì)胞增殖、膠原蛋白合成均有一定的影響。 3.三種網(wǎng)片之間相比，Prolift網(wǎng)片與Avaulta網(wǎng)片對成纖維細(xì)胞增值、膠原蛋白合成的影響相當(dāng)，且均比TVT-O網(wǎng)片影響小。 4.網(wǎng)片孔徑越大，對成纖維細(xì)胞增值、膠原蛋白合成影響越小。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：福建醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R711.5

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：1512137