RNA結(jié)合蛋白La對宮頸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制
本文關(guān)鍵詞: RNA結(jié)合蛋白 侵襲 宮頸癌 RNA干擾 出處:《西安交通大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版)》2015年03期 論文類型:期刊論文
【摘要】:目的探討RNA結(jié)合蛋白La(La)對宮頸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的作用及其作用機(jī)制。方法采用RNA干擾技術(shù)沉默La基因在宮頸癌細(xì)胞株HeLa中的表達(dá),并通過G418篩選,構(gòu)建穩(wěn)定表達(dá)的HeLa的La干擾克隆。采用劃痕實驗、Transwell小室等檢測La對宮頸癌細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的影響。利用Western blot的方法檢測細(xì)胞中基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)和基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑2(TIMP-2)的表達(dá),并采用明膠酶譜的方法檢測細(xì)胞培養(yǎng)上清中MMP-2的活性。結(jié)果 La干擾后細(xì)胞的遷徙和侵襲能力明顯降低,對細(xì)胞遷徙距離和穿過Transwell小室的細(xì)胞數(shù)目進(jìn)行分析后發(fā)現(xiàn),差異有統(tǒng)計學(xué)意義;同時發(fā)現(xiàn)在細(xì)胞中MMP-2的蛋白表達(dá)水平及酶活性均降低,而TIMP-2的蛋白表達(dá)水平上調(diào)。結(jié)論 La對宮頸癌的侵襲轉(zhuǎn)移具有促進(jìn)作用,這種作用可能與其對基質(zhì)金屬蛋白及其抑制劑的調(diào)控相關(guān)。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of RNA binding protein La-La on invasion and metastasis of cervical cancer cells and its mechanism. Methods RNA interference technique was used to silence the expression of La gene in cervical cancer cell line HeLa. The La interference clone of HeLa was constructed by G418 screening. Scratch test was used. The effect of La on invasion and metastasis of cervical cancer cells was detected by Transwell chamber and Western blot method was used to detect matrix metalloproteinase 2 (MMP-2). And matrix metalloproteinase inhibitor 2 (TIMP-2). The activity of MMP-2 in the supernatant of cell culture was detected by gelatin zymogram. Results the migration and invasion ability of the cells were significantly decreased after La interference. The cell migration distance and the number of cells passing through the Transwell chamber were analyzed and the difference was statistically significant. At the same time, it was found that the protein expression and enzyme activity of MMP-2 were decreased, but the protein expression of TIMP-2 was up-regulated. Conclusion La can promote the invasion and metastasis of cervical cancer. This effect may be related to its regulation of matrix metalloprotein and its inhibitors.
【作者單位】: 西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部第二附屬醫(yī)院婦產(chǎn)科;西安交通大學(xué)醫(yī)學(xué)部第二附屬醫(yī)院普通外科;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助(No.81070536)~~
【分類號】:R737.33
【正文快照】: 宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤,世界范圍內(nèi)居女性癌癥相關(guān)死亡病因的第2位[1]。其中轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)是引起患者死亡的最主要原因[2]。癌癥細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移是一個多種因素參與的復(fù)雜過程,包括癌癥細(xì)胞從原發(fā)部位脫離,通過分泌基質(zhì)金屬蛋白酶等分子降解細(xì)胞外間質(zhì),穿透血管和淋巴管管壁,
【參考文獻(xiàn)】
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