本文關鍵詞： 卵巢子宮內(nèi)膜異位癥 IVF-ET 卵母細胞 炎癥 顆粒細胞 凋亡　出處：《天津醫(yī)科大學》2016年博士論文　論文類型：學位論文

【摘要】：目的子宮內(nèi)膜異位癥(Endometriosis EM)影響著10%-15%的育齡婦女,且至少50%EM婦女合并不孕。EM患者有較差的輔助生殖技術臨床結(jié)局,具體明確的理論依據(jù)尚未明了。卵巢型子宮內(nèi)膜異位癥(Ovarian Endometriosis OEM)患者,因其病變主要異位于卵巢,而卵巢又是卵母細胞發(fā)育、成熟的場所,有可能對卵母細胞的成熟、受精影響較大,故對其具體情況進行分析。卵母細胞的形態(tài)變化有可能與卵母細胞的成熟度以及后期發(fā)育潛能有關,分析形態(tài)正常、透明帶厚、周隙大、顆粒粗、極體碎的卵母細胞的發(fā)生率變化及(In Vitro Fertilization-Embryo Transfer IVF-ET)的臨床結(jié)局變化情況,為通過卵母細胞形態(tài)預測臨床結(jié)局提供實驗依據(jù)。子宮內(nèi)膜異位癥卵泡液微環(huán)境的變化對卵母細胞質(zhì)量及其周圍顆粒細胞的影響是近年輔助生殖技術領域研究的熱點,分析OEM患者卵泡液的中炎性因子IL-6、TNF-α、IL-1變化對卵母細胞成熟、分化、形態(tài)的影響及卵丘顆粒細胞的影響,為改善OEM臨床結(jié)局提供實驗依據(jù)。方法收集2013年6月至2015年1月某試管嬰兒中心152例OEM資料為實驗組,輸卵管因素不孕患者168例為對照組,回顧性分析。比較兩組的臨床基本數(shù)據(jù)包括年齡、不孕年限、基礎體重指數(shù)、竇卵泡數(shù),FSH、LH、E2以及獲卵率、成熟卵(metaphaseⅡMⅡ)率、受精率、補救-卵胞漿內(nèi)單精子注射(Recovery-Intracytoplasmic Sperm Injection R-ICSI)率、優(yōu)胚率、生化妊娠率、臨床妊娠率以及流產(chǎn)率。比較正常、顆粒粗、透明帶厚、周隙大、極體碎五種形態(tài)卵母細胞受精率、補救卵胞漿內(nèi)單精子注射(R-ICSI)率、卵裂率、優(yōu)胚率、生化妊娠率以及臨床妊娠率。ELISA法檢測取卵當日卵泡液IL-6、TNF-α、IL-1表達變化。兩種不同的卵泡液對小鼠各階段未成熟卵母細胞進行培養(yǎng),分析比較各個時間點的成熟率。比較體外培養(yǎng)成熟與正常體內(nèi)成熟的小鼠卵母細胞的受精率、異常形態(tài)率以及優(yōu)胚率。體外培養(yǎng)觀察卵丘顆粒細胞的生長情況,TUNEL法檢測顆粒細胞凋亡,化學發(fā)光法檢測單個卵泡E2水平的變化,分析其與IL-6、TNF-α、IL-1水平、MⅡ卵率和臨床妊娠率的相關性。結(jié)果1.OEM組和輸卵管因素組基本臨床數(shù)據(jù)無顯著性差異(P0.05)。OEM組的獲卵率、MⅡ卵率、受精率、優(yōu)胚率、生化妊娠率、臨床妊娠率顯著低于輸卵管因素組,R-ICSI率顯著高于輸卵管因素組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)2.OEM組正常形態(tài)卵較輸卵管因素組顯著減少,顆粒粗、周隙大、透明帶厚的卵較輸卵管因素組顯著增多,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。極體碎的卵增多不顯著,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。正常形態(tài)卵的優(yōu)胚率和生化妊娠率、臨床妊娠率較顆粒粗、周隙大、極體碎的卵增高,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。正常形態(tài)卵受精率較透明帶厚組顯著升高而R-ICSI率顯著降低,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05),臨床結(jié)局差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)3.OEM組IL-6、TNF-α、IL-1表達均顯著高于輸卵管因素組,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)。GV、MⅠ、AM卵分別于培養(yǎng)24h、12h、6h成熟率達高峰,OEM組卵成熟率顯著低于輸卵管因素組,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)。體內(nèi)、體外成熟小鼠卵母細胞的受精率、異常形態(tài)率差異無統(tǒng)計學意義,但是體外成熟優(yōu)胚率較體內(nèi)成熟卵的優(yōu)胚率顯著下降,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05)4.OEM組卵丘顆粒細胞生長情況較差。OEM組卵丘顆粒細胞凋亡率較輸卵管因素組升高,單個卵泡的E2值降低,差異具有統(tǒng)計學意義(P0.05).IL-6、TNF-α、IL-1水平與卵丘顆粒細胞凋亡率正相關;卵丘顆粒細胞凋亡率與單個卵泡的E2水平負相關;單個卵泡的E2水平與MⅡ卵率正相關;MⅡ卵率與臨床妊娠率正相關(P0.001)結(jié)論OEM的IVF臨床結(jié)局較差,異常形態(tài)卵母細胞增多,卵母細胞質(zhì)量較差;不同形態(tài)卵母細胞發(fā)育潛能不同;OEM卵泡液中IL-6、TNF-α、IL-1表達顯著升高,造成卵母細胞所處的炎性微環(huán)境,可能影響小鼠卵母細胞的成熟以及后期分化、發(fā)育;不同未成熟卵體外培養(yǎng)需要時間不同;炎性微環(huán)境使卵丘顆粒細胞凋亡增加、合成雌激素的功能下降,影響卵母細胞成熟、分化及臨床結(jié)局,改善OEM的IVF-ET結(jié)局可以從改善卵母細胞質(zhì)量和其所處的炎性微環(huán)境入手。
[Abstract]:Objective To provide an experimental basis for the clinical outcome of ovarian endometriosis . The changes of the microenvironment of ovarian endometriotic fluid on the maturation , differentiation and morphology of oocytes and the effect of the changes of IL - 6 , TNF - 偽 and IL - 1 on the maturation , differentiation and morphology of oocytes were analyzed . The results showed that there was no significant difference between the two groups ( P0.05 ) . There was no significant difference in the fertilization rate ( P0.05 ) . There was no significant difference in the fertilization rate and abnormal morphology of the mature oocytes in vitro . However , there was no significant difference in the rate of fertilization between the mature and mature eggs in the OEM group ( P0.05 ) . The apoptosis rate of the eggs in the OEM group was significantly correlated with the E2 level of the single follicle .

【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R714.8

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本文編號：1441827