miR-424對(duì)宮頸鱗癌細(xì)胞侵襲遷移的抑制作用及調(diào)控
本文關(guān)鍵詞:miR-424對(duì)宮頸鱗癌細(xì)胞侵襲遷移的抑制作用及調(diào)控 出處:《暨南大學(xué)》2016年碩士論文 論文類型:學(xué)位論文
更多相關(guān)文章: micro RNA-424 宮頸鱗癌 侵襲遷移 Wnt3A
【摘要】:目的:探討mi R-424對(duì)宮頸鱗癌細(xì)胞侵襲遷移的抑制作用及調(diào)控。方法:1.通過莖環(huán)RT-PCR檢測宮頸鱗癌組織中mi R-424的含量;2.Transwell小室實(shí)驗(yàn)檢測Si Ha細(xì)胞侵襲能力;劃痕實(shí)驗(yàn)檢測遷移能力;3.采用生物信息學(xué)方法預(yù)測靶基因,并用雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)驗(yàn)證;4.通過免疫組化方法檢測靶基因的表達(dá);5.利用RT-PCR和Westernblot檢測內(nèi)源性靶基因及下游靶基因分子的m RN A和蛋白表達(dá)變化。結(jié)果:1.宮頸鱗癌組織中mi R-424的含量明顯低于癌旁組織;2.過表達(dá)mi R-424能抑制宮頸鱗癌Si Ha細(xì)胞的侵襲遷移能力;3.生物信息學(xué)表明,mi R-424的靶基因之一是Wnt3A,雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證明Wnt3A是mi R-424的靶基因。4.免疫組化結(jié)果表明,宮頸鱗癌組織中的Wnt3A表達(dá)陽性;5.過表達(dá)mi R-424,宮頸鱗癌Si Ha細(xì)胞中Wnt3A的表達(dá)降低,MMP2活性降低。結(jié)論:本研究發(fā)現(xiàn)宮頸鱗癌組織中的mi R-424表達(dá)含量低于癌旁正常組織;mi R-424可以通過靶向作用Wnt3A,下調(diào)MMP-2活性,從而抑制宮頸鱗癌Si Ha細(xì)胞的侵襲遷移,為未來逆轉(zhuǎn)宮頸癌的轉(zhuǎn)移、尋找新的藥物作用靶點(diǎn),提高宮頸癌治愈率提供理論和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
[Abstract]:Objective: to investigate the inhibitory effect and regulation of mi R-424 on invasion and migration of cervical squamous carcinoma cells. Methods: the content of mi R-424 in cervical squamous cell carcinoma was detected by stem ring RT-PCR. 2. The invasion ability of SIHA cells was detected by Transwell chamber assay. The migration ability was detected by scratch test. 3. The target gene was predicted by bioinformatics and verified by double luciferase reporter gene experiment. 4. The expression of target gene was detected by immunohistochemistry. RT-PCR and Westernblot were used to detect the expression of MRNA and protein in endogenous target gene and downstream target gene. Results: 1. Mi in squamous cell carcinoma of cervix cervix. The content of R-424 was significantly lower than that of paracancerous tissue. 2. Overexpression of mi R-424 could inhibit the invasion and migration of squamous cell carcinoma (SIHA) cells. 3. Bioinformatics indicates that one of the target genes of Mi R-424 is Wnt3A. Double luciferase reporter gene experiment showed that Wnt3A was the target gene of miR-424. Immunohistochemical results showed that Wnt3A expression was positive in cervical squamous cell carcinoma. 5. Overexpression of mi R-424 resulted in a decrease of Wnt3A expression in SIHA cells of cervical squamous cell carcinoma. Conclusion: the expression of miR-424 in cervical squamous cell carcinoma is lower than that in adjacent normal tissues. Mi R-424 can down-regulate the activity of MMP-2 by targeting Wnt3A, thus inhibit the invasion and migration of squamous cell carcinoma (SIHA) cells, and reverse the metastasis of cervical cancer in the future. To find a new drug target to improve the cure rate of cervical cancer provides theoretical and experimental basis.
【學(xué)位授予單位】:暨南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R737.33
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,本文編號(hào):1428528
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