發(fā)布時(shí)間：2018-01-15 06:14

  本文關(guān)鍵詞：妊娠期糖尿病VCAM-1、AOPP的表達(dá)及相關(guān)性研究　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2014年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 妊娠期糖尿病 晚期氧化蛋白產(chǎn)物 血管細(xì)胞黏附分子-1 氧化應(yīng)激 血管內(nèi)皮損傷

【摘要】：目的：妊娠期糖尿病(gestational diabetes mellitus, GDM)是妊娠期特有的代謝性疾病，是導(dǎo)致母兒不良結(jié)局的主要原因之一。其發(fā)病機(jī)理迄今尚不十分明確，目前認(rèn)為多種因素導(dǎo)致的胰島素抵抗及胰島β細(xì)胞功能障礙是其主要的發(fā)病原因，而血管內(nèi)皮損傷是引起胰島素抵抗的核心環(huán)節(jié)。血管細(xì)胞黏附分子-1(Vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)是免疫球蛋白超家族中的成員，是一類介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)相互結(jié)合，起黏附作用的膜表面糖蛋白，可介導(dǎo)白細(xì)胞黏附于血管內(nèi)皮細(xì)胞表面，損傷血管內(nèi)皮細(xì)胞。晚期氧化蛋白產(chǎn)物（Advanced oxidation proteinproducts, AOPP）是氧化應(yīng)激對(duì)體內(nèi)各種蛋白質(zhì)氧化后形成的蛋白氧化終末產(chǎn)物，可介導(dǎo)脂質(zhì)過(guò)氧化，激活單核細(xì)胞和還原型煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate,NADPH）氧化酶，釋放細(xì)胞內(nèi)活性氧，誘發(fā)炎細(xì)胞因子及黏附分子的形成和釋放，引起全身微炎癥反應(yīng)，損傷血管內(nèi)皮。本研究通過(guò)測(cè)定妊娠期糖尿病患者VCAM-1、AOPP的表達(dá)水平，探討VCAM-1、AOPP在妊娠期糖尿病發(fā)生發(fā)展中的作用，及與妊娠期糖尿病病情嚴(yán)重程度的相關(guān)性，進(jìn)而為妊娠期糖尿病的臨床診斷、預(yù)防及治療提供一定的理論依據(jù)。 方法： 1研究對(duì)象：依據(jù)第8版《婦產(chǎn)科學(xué)》妊娠合并糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)，隨機(jī)選擇2012-2至2013-12河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院收治的妊娠合并糖尿病患者60例作為研究組，其中妊娠期糖尿病(GDM)、糖尿病合并妊娠（diabetesmellitus, DM）患者各30例，同期隨機(jī)選取33例健康孕婦作為對(duì)照組。 2標(biāo)本采集：入院后治療前取空腹靜脈血6ml，室溫下2000rpm離心3ml血10分鐘，取上清液置于EP管中，保存于-70℃冰箱，用于血漿VCAM-1、AOPP濃度測(cè)定。另外3ml當(dāng)日檢測(cè)血脂及空腹血糖等指標(biāo)。胎盤娩出后15min內(nèi)收取胎盤母體面近臍帶根部直徑3cm范圍內(nèi)的組織，約1cm3大小，生理鹽水沖洗后用濾紙吸干水分，在4%福爾馬林溶液中室溫固定24h，并進(jìn)行常規(guī)的脫水、石蠟包埋等。 3檢驗(yàn)指標(biāo)：測(cè)定所有研究對(duì)象血中VCAM-1、AOPP、高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein,LDL）、載脂蛋白A（Apolipoprotein A, APOA）、載脂蛋白B（ApolipoproteinB, APOB）、糖化血紅蛋白（hemoglobin A1c, HbA1c）及空腹血糖(Fastingblood glucose, FBG)的水平，并記錄年齡、分娩孕周、身高、體重、及血壓等指標(biāo)。采用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA）測(cè)定血漿AOPP、 VCAM-1濃度；采用免疫組織化學(xué)技術(shù)(immunohistochemistry)顯微鏡下觀察胎盤中VCAM-1、AOPP表達(dá)并進(jìn)行圖像分析；血脂及空腹血糖等生化指標(biāo)送我院生化檢驗(yàn)室測(cè)定。 4數(shù)據(jù)分析：采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。計(jì)量資料用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料用百分率表示。對(duì)數(shù)據(jù)先進(jìn)行方差齊性檢驗(yàn)，多樣本間均數(shù)進(jìn)行比較采用方差分析，兩兩樣本均數(shù)間比較采用t檢驗(yàn)，若方差不齊用t，檢驗(yàn)；比較樣本率采用χ2檢驗(yàn)；兩變量之間的相互關(guān)系采用直線相關(guān)性分析（Pearson相關(guān)性分析）。P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 結(jié)果： 1①GDM組和DM組的VCAM-1、AOPP水平與對(duì)照組相比均明顯升高（P0.05），但GDM組和DM組相比無(wú)顯著性差異（P0.05）。②GDM組和DM組的入院時(shí)體重指數(shù)（body mass index, BMI）、新生兒出生體重、FBG、HbA1c、LDL及APOB水平與對(duì)照組相比均明顯升高（P0.05），DM組與GDM組相比HbA1c明顯升高（P0.05），其余指標(biāo)在兩組間無(wú)顯著性差異（均P0.05）。③GDM組和DM組的HDL、APOA水平較對(duì)照組明顯降低（均P0.05），但GDM組和DM組相比無(wú)顯著差異（P0.05）。④對(duì)照組、GDM組和DM組間的孕前BMI沒(méi)有顯著性差異（均P0.05）。 2對(duì)照組孕婦血漿中VCAM-1、AOPP無(wú)明顯相關(guān)性（P0.05），VCAM-1、AOPP分別與孕前BMI、入院時(shí)BMI、FBG、HbA1c、HDL、LDL、APOA、APOB、新生兒出生體重均無(wú)明顯相關(guān)性（均P0.05）。 3GDM組血漿中VCAM-1、AOPP濃度呈正相關(guān)（r=0.406, P0.05）。①GDM組血漿中VCAM-1濃度與入院時(shí)BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相關(guān)（r=0.366, r=0.405, r=0.390, r=0.402, r=0.365, P0.05），與HDL、APOA呈負(fù)相關(guān)（r=-0.366, r=-0.380, P0.05），與孕前BMI、新生兒出生體重?zé)o明顯相關(guān)性（均P0.05）；②GDM組血漿中AOPP濃度與入院時(shí)BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相關(guān)（r=0.400, r=0.412, r=0.449,r=0.387, r=0.394, P0.05），與HDL、APOA呈負(fù)相關(guān)（r=-0.385, r=-0.368,P0.05），，與孕前BMI、新生兒出生體重?zé)o明顯相關(guān)性（均P0.05）。 DM組孕婦血漿中VCAM-1、AOPP呈正相關(guān)（r=0.481, P0.05）。①DM組血漿中VCAM-1與入院時(shí)BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相關(guān)（r=0.363, r=0.494, r=0.426, r=0.363, r=0.364, P0.05），與HDL、APOA呈負(fù)相關(guān)（r=-0.364, r=-0.380, P0.05），與孕前BMI及新生兒出生體重?zé)o明顯相關(guān)性（均P0.05）；②DM組血漿中AOPP濃度與入院時(shí)BMI、HbA1c、FBG、LDL、APOB呈正相關(guān)（r=0.389, r=0.566, r=0.436,r=0.433, r=0.416, P0.05），與HDL、APOA呈負(fù)相關(guān)（r=-0.407, r=-0.393,P0.05），與孕前BMI、新生兒出生體重?zé)o明顯相關(guān)性（均P0.05）。 4GDM組和DM組發(fā)生肥胖及巨大兒的比例較對(duì)照組明顯升高（P0.05），及DM組發(fā)生巨大兒的比例較GDM組明顯增高（P0.05），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但發(fā)生肥胖的比例在GDM組和DM組無(wú)顯著性差異（P0.05）。 5HE染色結(jié)果：對(duì)照組胎盤絨毛成熟良好，絨毛及絨毛間質(zhì)的血管形態(tài)正常，絨毛最表層為細(xì)胞核排列較整齊的合體滋養(yǎng)層細(xì)胞；GDM組與DM組患者胎盤絨毛成熟不良，絨毛血管壁增厚及絨毛間質(zhì)毛細(xì)血管充盈，絨毛表層的合體滋養(yǎng)層細(xì)胞細(xì)胞核排列紊亂。 6免疫組化染色結(jié)果: VCAM-1、AOPP在三組孕婦胎盤中均有表達(dá)。VCAM-1主要表達(dá)于胎盤絨毛表層的合體滋養(yǎng)層細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞上,為胞漿著色。GDM組和DM組胎盤中VCAM-1的平均光密度值與對(duì)照組相比均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P0.05），GDM組和DM組相比無(wú)明顯差異（P0.05），且在對(duì)照組、GDM組、DM組三組中血漿VCAM-1水平與胎盤組織中VCAM-1平均光密度值呈正相關(guān)(r=0.429, r=0.483,r=0.484, P0.05)。AOPP主要表達(dá)于胎盤的滋養(yǎng)層細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞上,為胞漿著色。GDM組和DM組胎盤中AOPP的平均光密度值與對(duì)照組相比均明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均P0.05），GDM組和DM組相比無(wú)明顯差異（P0.05），且在對(duì)照組、GDM組、DM組三組中血漿AOPP水平與胎盤組織中AOPP平均光密度值呈正相關(guān)(r=0.749, r=0.840,r=0.824, P0.05)。 結(jié)論： 1妊娠期糖尿病患者血漿中VCAM-1、AOPP濃度較對(duì)照組孕婦顯著升高，提示與妊娠期糖尿病的發(fā)病過(guò)程相關(guān)，同時(shí)也說(shuō)明血管內(nèi)皮損傷在妊娠期糖尿病病理變化中起重要作用。 2妊娠期糖尿病患者血漿中VCAM-1、AOPP的水平與FBG、HbA1c的水平相關(guān)，說(shuō)明VCAM-1、AOPP與妊娠期糖尿病病情的嚴(yán)重程度相關(guān)。 3妊娠期糖尿病患者血漿中VCAM-1、AOPP的水平與HDL、LDL、APOA、APOB的水平相關(guān)，進(jìn)一步說(shuō)明了血管內(nèi)皮損傷在妊娠期糖尿病疾病的發(fā)生發(fā)展中起至關(guān)重要的作用。 4免疫組化顯示VCAM-1、AOPP在妊娠期糖尿病患者胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞表達(dá)較對(duì)照組明顯增高，說(shuō)明妊娠期糖尿病患者胎盤中VCAM-1、AOPP的高表達(dá)可能與胎盤功能損傷有關(guān)。
[Abstract]:Objective: gestational diabetes mellitus (gestational diabetes, mellitus, GDM) is a pregnancy specific metabolic disease, is one of the main causes of adverse outcomes of mother and infant. The pathogenesis is still not very clear, it is believed that insulin resistance and islet beta cell dysfunction caused by a variety of factors is the main cause of disease, and vascular endothelial injury is caused by the core link of insulin resistance. Vascular cell adhesion molecule -1 (Vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1) is a member of the immunoglobulin super family, is a kind of mediated cell-cell interaction, cell extracellular matrix adhesion, membrane surface glycoprotein, can mediate leukocyte adhesion on the surface of vascular endothelial cells, vascular endothelial cell injury. Advanced oxidation protein products (Advanced oxidation, proteinproducts, AOPP) is a protein of oxidative stress on the body After the formation of protein oxidation oxidation end products, may be mediated by lipid peroxidation, activation of monocytes and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (reduced form of nicotinamide-adenine dinucleotide phosphate, NADPH) oxidase, release of intracellular reactive oxygen species, the formation and release of inflammatory cytokines and adhesion molecules induced by systemic micro inflammation. In this study, vascular endothelial injury. By measuring the VCAM-1 of patients with diabetes during pregnancy, the expression level of AOPP on VCAM-1, AOPP role in the development of gestational diabetes, gestational diabetes and its correlation with the severity of the disease, and for clinical diagnosis of gestational diabetes, to provide a theoretical basis for prevention and treatment.
Method錛

本文編號(hào)：1427123