本文關(guān)鍵詞：CKS2 shRNA慢病毒表達(dá)載體的構(gòu)建及其抑制卵巢癌A2780細(xì)胞增殖　出處：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2016年02期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的構(gòu)建靶向CKS2的shRNA慢病毒表達(dá)載體,并探討CKS2敲除對(duì)卵巢癌細(xì)胞A2780增殖的影響。方法根據(jù)siRNA原理設(shè)計(jì)兩對(duì)靶向CKS2的shRNA序列(shRNA1、shRNA2)及陰性對(duì)照NC shRNA,并克隆到慢病毒表達(dá)載體PLKO.1/puro中;將上述質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到293T細(xì)胞并包裝出慢病毒,用慢病毒感染卵巢癌細(xì)胞A2780,實(shí)時(shí)定量PCR及Western blot檢測CKS2表達(dá);MTT法檢測A2780細(xì)胞增殖;Western blot檢測PARP-1的剪切;流式細(xì)胞術(shù)檢測凋亡。結(jié)果成功構(gòu)建CKS2 shRNA慢病毒表達(dá)載體能明顯降低A2780細(xì)胞中CKS2 mRNA及蛋白表達(dá)(P0.05);能顯著抑制A2780靶向CKS2的shRNA慢病毒表達(dá)載體,并包裝出慢病毒;感染A2780細(xì)胞后,細(xì)胞增殖受抑(P0.05);能誘導(dǎo)PARP-1蛋白的剪切及凋亡(P0.05)。結(jié)論成功構(gòu)建靶向CKS2的shRNA慢病毒表達(dá)載體,能顯著抑制A2780細(xì)胞增殖。
[Abstract]:Objective To construct shRNA lentivirus expression vector targeting CKS2 and to investigate the effect of CKS2 knockout on the proliferation of ovarian cancer cell A2780 .

【作者單位】： 三峽大學(xué)醫(yī)學(xué)院;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81550029,30800410) 三峽大學(xué)人才啟動(dòng)基金(KJ2014B064);三峽大學(xué)教學(xué)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(J2015023) 湖北省自然科學(xué)基金(2015CFB198) 大學(xué)生科技創(chuàng)新重點(diǎn)項(xiàng)目(2015YCX004) 腫瘤微環(huán)境與免疫治療湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室(三峽大學(xué))開放基金課題(2015KZL02)
【分類號(hào)】：R737.31
【正文快照】： CKS2,又稱CDC28蛋白激酶調(diào)節(jié)亞基2(CDC28protein kinase regulatory subunit 2),是CKS家族成員之一,其基因定位于人染色體9q22.2。最早由Rich-ardson等在人類細(xì)胞中克隆發(fā)現(xiàn),其編碼長度為240bp,其蛋白由79個(gè)氨基酸殘基組成,相對(duì)分子質(zhì)量約為9 ku[1]。近年來研究者在前列腺癌[2，

本文編號(hào)：1387197