本文關鍵詞：ST7L基因對卵巢癌細胞生長、遷移和侵襲的影響　出處：《天津醫(yī)科大學》2016年碩士論文　論文類型：學位論文

  更多相關文章： ST7L 卵巢癌 增殖 遷移 侵襲

【摘要】：目的:卵巢癌(ovarian cancer)在世界范圍內是女性生殖器官常見的惡性腫瘤之一,其發(fā)病率和死亡率僅次于子宮頸癌和子宮內膜癌,列居女性生殖器官惡性腫瘤的第三位,其中卵巢上皮癌的死亡率占各類婦科腫瘤的首位,影響著婦女的健康與生命。因此,闡明卵巢上皮癌的發(fā)生和發(fā)展具有重要意義。據文獻報道,卵巢上皮癌的發(fā)生、發(fā)展主要與癌基因和抑癌基因的異常表達有密切聯(lián)系,抑癌基因的失活可促進腫瘤細胞的形成和向惡性化的發(fā)展。ST7L基因定位于七號染色體,作為抑癌基因ST7的同源物被發(fā)現(xiàn)。Chen等人報道,在神經膠質瘤細胞中,ST7L可抑制細胞的增殖能力和侵襲能力,誘導細胞凋亡的發(fā)生。而其在卵巢癌中的功能及具體分子機制迄今尚未充分闡明。本課題擬研究ST7L對卵巢癌細胞OVCAR3和SKOV3的生長、遷移和侵襲的影響,初步闡明其分子調控機理。方法:首先通過PCR擴增構建ST7L的過表達質粒(pcDNA3/ST7L)及生物合成寡核苷酸構建ST7L的敲降質粒(pSilencer/ST7L),應用實時熒光定量PCR方法和Western blot技術檢測ST7L在mRNA水平和蛋白水平的變化,進而通過MTT實驗,平板克隆形成實驗,細胞劃痕實驗,Transwell侵襲實驗來進一步闡述ST7L基因對卵巢癌細胞活性、生長能力、遷移能力、侵襲能力的調控作用;隨后運用流式細胞術檢測ST7L對卵巢癌細胞周期進程的影響,Western blot檢測ST7L基因對卵巢癌細胞上皮間質轉化的影響,進一步闡明ST7L基因在卵巢癌細胞遷移和侵襲能力的作用機理。結果:在臨床樣本中,通過實時定量PCR檢測發(fā)現(xiàn)卵巢癌組織較癌旁組織中ST7L基因低表達。在系列功能學實驗中,MTT檢測發(fā)現(xiàn)在OVCAR3和SKOV3細胞中ST7L基因的過表達可抑制其生長活性;平板克隆形成實驗表明ST7L抑制卵巢癌細胞的生長能力;細胞劃痕實驗和transwell侵襲實驗證實ST7L能抑制卵巢癌細胞的遷移和侵襲能力。流式細胞術檢測發(fā)現(xiàn)ST7L能抑制卵巢癌細胞的周期進程。Western blot分別檢測上皮標志物和間皮標志物,發(fā)現(xiàn)ST7L能抑制卵巢癌細胞上皮向間質的轉化。結論:ST7L抑制卵巢癌細胞生長活性和增殖能力,是由抑制細胞周期進程來完成的;通過抑制上皮間質轉化降低卵巢癌細胞的遷移和侵襲過程。以上數據均表明,ST7L在卵巢癌細胞中發(fā)揮著抑癌基因的作用。ST7L在卵巢癌中的具體分子機制及其相關通路有待進一步深入研究。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R737.31

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