發(fā)布時間：2017-12-14 06:57

  本文關(guān)鍵詞：MMP-2、IL-4、IFN-γ在子宮內(nèi)膜異位癥中表達的相關(guān)性分析

  更多相關(guān)文章： 子宮內(nèi)膜異位癥 Th1/Th2 細胞因子 轉(zhuǎn)錄因子 MMP-2

【摘要】：目的:基質(zhì)金屬蛋白酶2(MMP-2)在子宮內(nèi)膜異位癥的病理進程中發(fā)揮著重要作用,Th1/Th2免疫平衡偏移也參與內(nèi)異癥的病程進展,有研究報道在黑色素瘤中MMP-2能誘導(dǎo)Th2細胞分化而促進疾病的發(fā)展,然而二者的相互關(guān)系在內(nèi)異癥發(fā)展中的作用研究未見報道。T-bet、GATA-3分別作為Th1、Th2細胞的轉(zhuǎn)錄因子對其特異性細胞因子IFN-γ、IL-4的表達調(diào)控具有重要作用。本研究通過檢測子宮內(nèi)膜異位組織和正常子宮內(nèi)膜組織中IL-4、IFN-γ、T-bet、GATA-3、MMP-2的轉(zhuǎn)錄和表達水平,探討MMP-2與Th1/Th2偏移的相互關(guān)系及其在子宮內(nèi)膜異位癥發(fā)生、發(fā)展中的作用,為子宮內(nèi)膜異位癥的預(yù)防及診治提供新的科學(xué)依據(jù)。方法:1從2013年3月至2014年3月唐山市工人醫(yī)院婦產(chǎn)科住院部收集的60例子宮內(nèi)膜異位組織和57例正常子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本;2采用實時定量PCR法檢測組織標(biāo)本中MMP-2、IL-4、IFN-γm RNA的表達水平;3采用免疫組化法檢測組織標(biāo)本中MMP-2表達,采用明膠酶譜法檢測異位組織和正常子宮內(nèi)膜組織組織MMP-2活性;4采用Western Blot法檢測異位組織和正常子宮內(nèi)膜組織中T-bet、GATA-3表達水平;5數(shù)據(jù)分析采用SPSS13.0軟件,實時定量PCR法檢測m RNA相對表達量數(shù)據(jù)處理采用單因素方差分析及獨立樣本t檢驗,雙變量相關(guān)性分析采用Spearman秩相關(guān)系數(shù)。當(dāng)雙側(cè)檢驗P0.05時認為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1子宮內(nèi)膜異位組織中MMP-2的表達水平及其活性變化實時定量PCR法檢測結(jié)果表明:子宮內(nèi)膜異位組織中MMP-2 m RNA水平明顯高于正常子宮內(nèi)膜組織,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。MMP-2 m RNA在內(nèi)異癥中III-IV期表達水平高于I-II期,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。將各組組織分別進行免疫組織化學(xué)分析,可見子宮內(nèi)膜異位組織MMP-2蛋白表達量顯著高于正常子宮內(nèi)膜組織。明膠酶譜法檢測結(jié)果表明MMP-2在異位組織中活性高于正常,且在內(nèi)異癥III-IV期的活性高于I-II期。2子宮內(nèi)膜異位組織中IL-4、IFN-γ的m RNA表達水平變化本研究將IL-4作為Th2細胞代表性細胞因子,而INF-γ作為Th1細胞代表性細胞因子,采用實時定量RT-PCR法檢測子宮內(nèi)膜異位組織和正常子宮內(nèi)膜組織中IL-4和IFN-γ的m RNA水平,并將二者進行比值計算,即IL-4/IFN-γ比值作為Th2/Th1的偏移水平的衡量指標(biāo),研究Th2/Th1偏移與子宮內(nèi)膜異位癥的關(guān)系。研究結(jié)果表明子宮內(nèi)膜異位組織中IL-4 m RNA的表達水平高于正常組(P0.05),且其在內(nèi)異癥中III-IV期的表達水平高于I-II期,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。IFN-γm RNA的表達水平在異位組低于對照組,且其在III-IV期表達水平低于I-II期,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。將IL-4和IFN-γm RNA進行比值計算,結(jié)果顯示,異位內(nèi)膜組織中IL-4/IFN-γ比值高于正常子宮內(nèi)膜組織,該比值在內(nèi)異癥的III-IV期高于I-II期,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3子宮內(nèi)膜異位組織T-bet、GATA-3表達水平T-bet是Th1型細胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子,而GATA-3是Th2型細胞的特異性轉(zhuǎn)錄因子,為進一步明確T-bet、GATA-3是否參與子宮內(nèi)膜異位癥的發(fā)生發(fā)展過程,本研究采用Western Blot法檢測兩者在子宮內(nèi)膜異位組織及正常子宮內(nèi)膜組織中的表達。結(jié)果顯示,與正常子宮內(nèi)膜組織相比,子宮內(nèi)膜異位組織中T-bet表達水平較低,而GATA-3表達水平則高于正常組。T-bet的蛋白表達強度在III-IV期低于I-II期,而GATA-3的蛋白表達強度在III-IV期高于I-II期。4 Th1、Th2相關(guān)因子與MMP-2的相關(guān)性Spearman相關(guān)分析表明,在子宮內(nèi)膜異位組織中MMP-2 m RNA的表達水平與IL-4表達水平呈正相關(guān),與IFN-γ呈負相關(guān)。結(jié)論:1子宮內(nèi)膜異位組織中MMP-2的高表達是內(nèi)異癥發(fā)生、發(fā)展的原因之一;2子宮內(nèi)膜異位組織中Th1/Th2免疫平衡偏移在內(nèi)異癥的發(fā)生、發(fā)展中可能發(fā)揮重要作用;3子宮內(nèi)膜異位組織中MMP-2與IL-4表達呈正相關(guān),與IFN-γ表達呈負相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R711.71

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本文編號：1286941