本文關鍵詞：宮內缺氧對子代大鼠肝纖維化易感性的影響

  更多相關文章： 宮內缺氧 肝 CCl4 肝纖維化 缺氧 HSC-T6 細胞周期 細胞凋亡 肝纖維化 缺氧 HSC-T6 PI3K/Akt信號通路 LY294002

【摘要】：目的:1.探討孕鼠宮內缺氧對胎鼠及子代大鼠肝生長發(fā)育的影響;2.研究孕鼠宮內缺氧對成年子代大鼠肝纖維化易感性的影響。方法:將妊娠大鼠從妊娠第4天至20天(gestation day,GD4-20)放入缺氧環(huán)境飼養(yǎng)(O2濃度10±0.5%)。實驗分為:常氧組,宮內缺氧組。稱量兩組胎鼠及子代大鼠體重、肝重,計算肝比重;全自動生化儀檢測20天齡、1月、3月齡子代大鼠血清總蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,Alb)、總膽紅素(total bilirubin,BIL-T)和直膽紅素(direct bilirubin,BIL-D)、谷丙轉氨酶(alanine transarninase,ALT)、谷草轉氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,AST)含量。對肝組織行HE染色。將子代5月齡雄性SD大鼠隨機分為常氧子代組和缺氧子代組,常氧+CCl4處理組,缺氧+CCl4處理組(常氧和缺氧子代組腹腔注射生理鹽水,常氧+CCl4處理組和缺氧+CCl4處理組腹腔注射40%CCl4橄欖油混懸液)。于2、4、6周末隨機取四組大鼠稱量體重、肝重;肝組織行HE和Masson染色,光鏡下觀察病理學改變,并按SSS計分系統(tǒng)進行評分。結果:1.缺氧組胎鼠體重、肝重、肝比重明顯低于常氧組(P0.05)。2.肝組織HE染色:常氧組胎鼠肝細胞排列不規(guī)則,無明顯肝小葉結構;缺氧組胎鼠肝血竇更明顯。3.缺氧+CCl4處理組與常氧+CCl4處理組成年子代大鼠相比,第2周肝比重減少,第4周和第6周肝比重均顯著增加(P0.05)。4.CCl4處理成年子代大鼠肝組織HE染色:常氧+CCl4處理組和缺氧+CCl4處理組肝組織出現(xiàn)不同程度損傷。第2周缺氧+CCl4處理組肝細胞可見大量脂肪空泡,出現(xiàn)脂肪變性;第4周缺氧+CCl4處理組肝組織內結締組織增生逐漸形成假小葉。5.CCl4處理成年子代大鼠肝組織Masson染色:第4周缺氧+CCl4處理組肝組織出現(xiàn)脂肪空泡樣結構,并伴有大量膠原纖維,纖維隔較厚,假小葉明顯;常氧+CCl4處理組直到第6周出現(xiàn)上述現(xiàn)象。結論:宮內缺氧顯著影響肝生長發(fā)育,并增加了成年后肝纖維化易感性。目的:1、觀察體外缺氧對HSC-T6生長、增殖、周期和凋亡的影響。2、檢測缺氧條件下HSC-T6蛋白表達,進一步揭示缺氧與肝纖維化之間內在聯(lián)系。方法:將HSC-T6分別在缺氧(1%O2)和常氧(21%O2)體外培養(yǎng)一定時間。隨后用細胞計數(shù)儀進行細胞計數(shù);收集細胞用冷丙酮固定,碘化丙啶染色后通過流式細胞儀分析細胞周期;TUNEL染色檢測凋亡細胞。Western blot檢測細胞中HIF-1α、TGF-β1和PDGFR-β表達。結果:細胞培養(yǎng)48、72小時,缺氧組與常氧組相比,細胞數(shù)目增多,細胞活力顯著增強,細胞增殖指數(shù)明顯升高,同時細胞凋亡數(shù)目增多。缺氧組細胞HIF-1α表達量顯著高于常氧組;同時缺氧組細胞TGF-β1和PDGFR-β表達量顯著高于常氧組。結論:缺氧誘導HSC-T6周期改變,激活了細胞增殖能力;缺氧條件下,HIF-1α上調促進了TGF-β1的表達和其相關信號通路,導致PDGFR-β表達增強,促使HSC-T6的活化。目的:探討缺氧對HSC-T6 PI3K/Akt信號通路的影響。方法:將HSC-T6消化傳代加入LY294002后分為四組:N、NL、H、HL。在缺氧(1%O2)和常氧(21%O2)狀態(tài)體外培養(yǎng)3、6、12、24、48和72小時。Western blot檢測缺氧細胞p110β(PI3K亞基)、Akt-1、p-Akt(S473磷酸化位點)表達。結果:與常氧組相比,缺氧組HSC-T6除24小時外,3-72小時各時間點p110β表達顯著增強,除12小時外,3-72小時各時間點p-Akt表達顯著增強;3-72小時各時間點常氧+LY294002組和缺氧+LY294002組p110β和p-Akt顯著降低。結論:缺氧條件下,PDGFR-β表達上調促進p110β和p-Akt表達增強,加入LY294002,p-Akt和p110β表達量顯著下降,初步說明缺氧誘導的HSC-T6活化與PI3K/Akt信號通路激活相關。
【學位授予單位】：蘇州大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R714.5

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 王東紅;凌樹才;;宮內缺氧對神經元、神經膠質細胞影響的研究進展[J];解剖科學進展;2007年04期

2 王東紅;王俊波;袁相貴;凌樹才;;宮內缺氧對成年小鼠學習記憶能力的影響[J];解剖學雜志;2008年02期

3 李海燕,史紀芳;妊娠肝內膽汁淤積癥患兒宮內缺氧機理[J];大理學院學報;2003年05期

4 郭錦芳;妊娠肝內膽汁淤積癥宮內缺氧指標預測分析[J];上海醫(yī)學;2003年03期

5 王道平,陳立梅,徐景華,胡大蘭,李汝海;宮內缺氧產科A pgar評分正常的新生兒缺氧缺血性腦病臨床及預后相關性研究[J];基層醫(yī)學論壇;2005年04期

6 卓秋鑾;衛(wèi)紅艷;黃翠平;;繞頸臍帶螺距增加率與宮內缺氧三維彩超研究[J];中外醫(yī)學研究;2012年34期

7 岳鶴聲;陳旭東;劉紅敏;華新宇;余鴻;;宮內缺氧對新生大鼠神經元的影響及當歸的保護作用[J];時珍國醫(yī)國藥;2009年09期

8 陳旭東;鐘小明;陳東麗;趙峰;梅欣明;余鴻;;當歸對宮內缺氧新生大鼠神經干細胞增殖的影響[J];時珍國醫(yī)國藥;2008年02期

9 王凌星;蔡若蔚;呂國榮;;宮內缺氧對子代大鼠老年期腦白質GFAP表達的影響[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志;2009年02期

10 李維芝;王世閬;;宮內缺氧對胎兒神經系統(tǒng)的影響[J];國外醫(yī)學.婦產科學分冊;1987年06期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 李寶珠;張振聲;劉廣明;;正常與宮內缺氧胎盤合體結節(jié)計量觀察[A];面向二十一世紀的生物醫(yī)學體視學和軍事病理學論文摘要匯編[C];2000年

2 陳旭東;鐘小明;梅欣明;黃吉春;余鴻;;當歸對宮內缺氧新生大鼠神經干細胞增殖的影響[A];2007年中國解剖學會第十屆全國組織學與胚胎學青年學術研討會論文摘要匯編[C];2007年

3 王凌星;蔡若蔚;呂國榮;;宮內缺氧對子代大鼠老年期腦白質GFAP表達的影響[A];2008年中國睡眠研究會第五屆學術年會論文摘要匯編[C];2008年

4 王凌星;蔡若蔚;呂國榮;;宮內缺氧對子代大鼠老年期腦白質MBP、NF-H+L表達的影響[A];2008年中國睡眠研究會第五屆學術年會論文摘要匯編[C];2008年

5 焦彤;薛紅霞;;胎兒大腦中動脈、靜脈導管血流檢測提示胎兒早期宮內缺氧[A];中華醫(yī)學會第十三次全國超聲醫(yī)學學術會議論文匯編[C];2013年

中國碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫 前7條

1 魏曉光;宮內缺氧對子代大鼠肝纖維化易感性的影響[D];蘇州大學;2015年

2 蘇瑞娟;宮內缺氧對子代成鼠神經細胞變性、凋亡的影響及超聲檢測胎兒缺氧[D];福建醫(yī)科大學;2006年

3 王娟梅;宮內缺氧對肺發(fā)育及肺組織VEGF表達變化的影響[D];湖南師范大學;2011年

4 徐小潔;宮內缺氧對幼年大鼠海馬CA3區(qū)神經元與學習記憶能力的影響機制[D];瀘州醫(yī)學院;2011年

5 郭輝;宮內缺氧對成年子代大鼠肝纖維化易感性的影響[D];蘇州大學;2014年

6 李文英;宮內缺氧對大鼠學習記憶能力的影響機制及阿魏酸調控[D];瀘州醫(yī)學院;2013年

7 陳秋月;多普勒超聲聯(lián)合母血VIP、NPY檢測胎羊宮內缺氧[D];福建醫(yī)科大學;2006年

，

本文編號：1250322