發(fā)布時(shí)間：2017-11-22 16:12

  本文關(guān)鍵詞：RANKL通過(guò)增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞間交互對(duì)話促進(jìn)其增殖的機(jī)制研究

  更多相關(guān)文章： RANKL 宮頸癌細(xì)胞 生存活力 凋亡 白細(xì)胞介素8

【摘要】：目的:研究宮頸癌細(xì)胞是否表達(dá)RANKL及RANK;RANKL/RANK對(duì)宮頸癌細(xì)胞生存活力的調(diào)控作用和可能機(jī)制及其與白細(xì)胞介素8(IL-8)的相互作用關(guān)系。方法:通過(guò)免疫組化檢測(cè)宮頸癌組織和癌旁組織RANKL及RANK的表達(dá)水平。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)宮頸癌細(xì)胞株HeLa和SiHa細(xì)胞表面RANKL和RANK的表達(dá)水平、分析RANKL對(duì)HeLa和SiHa細(xì)胞中IL-8受體表達(dá)水平的影響及RANKL和IL-8對(duì)HeLa和SiHa細(xì)胞中增殖、凋亡相關(guān)分子表達(dá)水平的影響。ELISA法檢測(cè)HeLa和SiHa細(xì)胞中可溶性RANKL的分泌水平及RANKL對(duì)HeLa和SiHa細(xì)胞分泌IL-8的影響。BrdU法分析RANKL和IL-8對(duì)HeLa和SiHa細(xì)胞增殖能力的影響。Annexin V/PI細(xì)胞凋亡檢測(cè)法分析RANKL和IL-8對(duì)HeLa和SiHa細(xì)胞凋亡能力的影響。結(jié)果:相比癌旁正常組織,宮頸癌組織明顯表達(dá)RANKL/RANK。HeLa和SiHa細(xì)胞均表達(dá)細(xì)胞膜表面RANKL(mRANKL)和其受體RANK,且分泌可溶性RANKL(sRANKL)。人重組RANKL(rhRANKL)對(duì)HeLa和SiHa細(xì)胞的生存活力沒(méi)有影響,而以抗RANKL中和性抗體α-RANKL或人重組OPG(rhOPG)阻斷細(xì)胞表面RANKL/RANKL可以抑制HeLa和SiHa細(xì)胞的增殖能力而促進(jìn)其凋亡能力。低密度接種的HeLa和SiHa細(xì)胞增殖能力明顯低于高密度接種的細(xì)胞,且α-RANKL抑制HeLa和SiHa細(xì)胞增殖的效果在細(xì)胞高密度接種時(shí)更明顯。α-RANKL和rhOPG均明顯降低Ki-67和Bcl-2的表達(dá)水平,上調(diào)Fas和Fas L的表達(dá)水平。α-RANKL導(dǎo)致HeLa和SiHa細(xì)胞中IL-8的分泌水平下降,而IL-8受體的表達(dá)水平升高。rhIL-8可以逆轉(zhuǎn)α-RANKL對(duì)HeLa和SiHa細(xì)胞增殖、凋亡能力及增殖、凋亡相關(guān)分子表達(dá)水平的調(diào)控作用。結(jié)論:宮頸癌細(xì)胞高表達(dá)RANKL/RANK,細(xì)胞膜表面RANKL/RANK通過(guò)增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞之間的交互對(duì)話和刺激IL-8的分泌促進(jìn)宮頸癌細(xì)胞的增殖活力,參與宮頸癌的發(fā)病與發(fā)展過(guò)程。
【學(xué)位授予單位】：江南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R737.33
，

本文編號(hào)：1215280