發(fā)布時(shí)間：2017-11-21 22:27

  本文關(guān)鍵詞：胎盤(pán)組織中脂聯(lián)素、PLGF的表達(dá)與重度子癇前期發(fā)病關(guān)系的研究

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【摘要】：子癇前期是一種嚴(yán)重的妊娠期并發(fā)癥,以廣泛的血管功能下降為特征,并導(dǎo)致孕20周后蛋白尿(尿蛋白≥0.3g/24h或隨機(jī)尿蛋白(+))和高血壓(BP≥140/90mm Hg)為主要特征的一種妊娠期特發(fā)性疾病,在全世界發(fā)病率是2%-8%。本病基本病理生理變化是全身小血管痙攣、內(nèi)皮損傷及局部缺血,全身各系統(tǒng)、各臟器灌流減少,造成對(duì)母兒危害,甚至導(dǎo)致母兒死亡。子癇前期的病因尚未完全闡明,因該病在胎盤(pán)娩出后癥狀得以緩解或自愈,有學(xué)者稱(chēng)之為“胎盤(pán)病”,但很多學(xué)者認(rèn)為是母體、胎盤(pán)、胎兒等眾多因素作用的結(jié)果。目前的研究表明子癇前期發(fā)病可能與子宮螺旋小動(dòng)脈重塑不足、免疫因素、炎癥反應(yīng)、血管內(nèi)皮功能障礙、營(yíng)養(yǎng)障礙及高胰島素素血癥等有關(guān)。全身小血管痙攣是本病的基本病理生理變化,引起血管炎癥反應(yīng)、血管生長(zhǎng)因子和抗血管生成因子失衡,造成血管內(nèi)皮功能障礙。脂聯(lián)素、胎盤(pán)生長(zhǎng)因子(PLGF)與血管生成及病變有關(guān),并均在胎盤(pán)滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)。本研究旨在檢測(cè)胎盤(pán)組織中脂聯(lián)素、PLGF的表達(dá)量以探討其與子癇前期發(fā)病及其圍產(chǎn)兒結(jié)局的關(guān)系。脂聯(lián)素(Adiponectin)是一種激素蛋白,主要由白色脂肪組織的脂肪細(xì)胞分泌。具有保護(hù)血管內(nèi)皮細(xì)胞、抗炎、抗動(dòng)脈粥樣硬化及改善胰島素抵抗等特性,可能在子癇前期的發(fā)病中發(fā)揮了重要作用。脂聯(lián)素在肝臟、心肌、骨骼肌、結(jié)腸、唾液腺、胎盤(pán)和腦垂體都有表達(dá)。它主要通過(guò)兩種不同的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)受體(Adipo R1和Adipo R2)發(fā)揮作用。脂聯(lián)素通過(guò)激發(fā)血管內(nèi)皮氧化酶和NO的產(chǎn)生參與了子癇前期的發(fā)生,但是關(guān)于子癇前期中脂聯(lián)素的表達(dá)量一直存在爭(zhēng)議。胎盤(pán)生長(zhǎng)因子的堿基序列與血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)有高度同源性,屬于VEGF家族中的成員,是血管形成的關(guān)鍵因素。研究表明,PLGF能夠促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖并調(diào)控細(xì)胞凋亡過(guò)程,還可以促進(jìn)單核細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞的游走,并增加內(nèi)皮細(xì)胞的通透性。研究發(fā)現(xiàn),PLGF豐富表達(dá)于胎盤(pán)組織,主要位于合體滋養(yǎng)細(xì)胞,并與滋養(yǎng)層細(xì)胞凋亡有關(guān)。胎兒的正常生長(zhǎng)發(fā)育依賴(lài)于完整的胎盤(pán)脈管系統(tǒng)和良好的子宮胎盤(pán)循環(huán)。缺血缺氧導(dǎo)致了子癇前期中血管生成因子的不平衡,為此我們進(jìn)行如下研究探討脂聯(lián)素和PLGF在重度子癇前期發(fā)病和發(fā)展中的意義。目的本研究通過(guò)比較脂聯(lián)素m RNA和PLGFm RNA在正常晚孕組和重度子癇前期組胎盤(pán)組織中的表達(dá)有無(wú)差異,免疫組化定位脂聯(lián)素和PLGF在兩組胎盤(pán)組織中的位置,初步探討脂聯(lián)素和PLGF在胎盤(pán)組織中的表達(dá)量與圍產(chǎn)兒結(jié)局的關(guān)系。材料和方法選擇于2014年2月至2014年10月在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院住院分娩的產(chǎn)婦100例,其中正常足月妊娠孕婦50例,重度子癇前期患者50例。重度子癇前期診斷標(biāo)準(zhǔn)按美國(guó)婦產(chǎn)科醫(yī)師協(xié)會(huì)標(biāo)準(zhǔn)(2002)。所有研究對(duì)象均排除慢性高血壓、糖尿病、腎病、多囊卵巢綜合征、胎兒畸形和多胎妊娠。參與該研究的所有對(duì)象均簽署知情同意書(shū);該研究經(jīng)鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院倫理委員會(huì)審核批準(zhǔn)。2方法胎盤(pán)取材:(1)待胎盤(pán)娩出后15分鐘內(nèi),立即在其母面中央取一1.0 cm×1.0cm×1.0 cm胎盤(pán)組織,以生理鹽水清洗3次后,放入10%中性福爾馬林液中固定,并制成石蠟塊;(2)另外取一0.5cm×0.5cm×0.5cm母面胎盤(pán)組織,生理鹽水清洗(盡量洗出血液)后,置于-80°C冰箱備用。取材時(shí)注意避開(kāi)出血、壞死及鈣化部位。采用Real-time PCR技術(shù),比較妊娠晚期重度子癇前期組和正常晚孕組胎盤(pán)組織中脂聯(lián)素和PLGFm RNA表達(dá)有無(wú)差異,免疫組化定位脂聯(lián)素和PLGF在子癇前期孕婦和正常孕婦胎盤(pán)組織中的位置。3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,計(jì)量資料采用x±s表示,符合正態(tài)分布的計(jì)量資料組間比較采用兩組獨(dú)立樣本t檢驗(yàn),不符合正態(tài)分布者采用秩和檢驗(yàn),相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)分析。以P0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果1重度子癇前期組和正常對(duì)照組孕產(chǎn)婦一般資料比較重度子癇前期組孕婦平均年齡和孕時(shí)體重指數(shù)(BMI)與正常對(duì)照組孕婦比較,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.05)。兩組孕婦的分娩孕周比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)(P0.05);兩組新生兒平均體重比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(分別為2144.2±656.13g,3349.8±386.36g,p0.05);兩組新生兒平均身長(zhǎng)分別為43.68±3.88cm,51.24±2.39cm,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05);兩組胎盤(pán)重量分別為378.52±56.54g,575.20±90.63g,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p0.05)。(見(jiàn)表3.1)2兩組胎盤(pán)組織中脂聯(lián)素、PLGFm RNA的表達(dá)2.1脂聯(lián)素m RNA在重度子癇前期組和對(duì)照組中的表達(dá)脂聯(lián)素m RNA在兩組胎盤(pán)組織中均有表達(dá),脂聯(lián)素m RNA相對(duì)表達(dá)量在重度子癇前期胎盤(pán)組表達(dá)高于正常組(分別為4.18±1.80,1.00±0.51),相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(P0.05)(表3.2,圖3.1)2.2重度子癇前期組與正常對(duì)照組胎盤(pán)組織中PLGFm RNA的表達(dá)PLGFm RNA在兩組胎盤(pán)組織中均有表達(dá),PLGFm RNA在重度子癇前期組胎盤(pán)組織中的相對(duì)表達(dá)量低于正常對(duì)照組(分別為1.00±0.50,3.19±1.09),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,P0.05)。(表3.3,圖3.2)3.重度子癇前期組與正常對(duì)照組晚孕期胎盤(pán)組織中脂聯(lián)素、PLGF蛋白的表達(dá)定位脂聯(lián)素和PLGF蛋白主要表達(dá)在胎盤(pán)合體滋養(yǎng)層細(xì)胞與細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞,本研究發(fā)現(xiàn),脂聯(lián)素和PLGF在兩組胎盤(pán)組織中均有表達(dá),脂聯(lián)素蛋白在重度子癇前期組中表達(dá)明顯高于正常組(P0.05),而PLGF蛋白在重度子癇前期組胎盤(pán)組織中的染色強(qiáng)度明顯低于正常對(duì)照組(P0.05)。(表3.4,表3.5,圖3.4,圖3.5)4.相關(guān)性分析在重度子癇前期孕婦胎盤(pán)組織中,脂聯(lián)素和PLGF表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(r=-0.575,P0.05);脂聯(lián)素m RNA相對(duì)表達(dá)量與新生兒體重成負(fù)相關(guān)(r=-0.580,P0.05);與BMI指數(shù)成正相關(guān)(r=0.261,P0.05);與年齡無(wú)相關(guān)性(r=0.242,P0.05)。PLGFm RNA相對(duì)表達(dá)量與新生兒體重成正相關(guān)(r=0.625,P0.05);與BMI指數(shù)成負(fù)相關(guān)(r=-0.374,P0.05);與年齡無(wú)相關(guān)性(r=0-0.146,P0.05)。(表4.1,表4.2)結(jié)論1.脂聯(lián)素m RNA及其蛋白在重度子癇前期胎盤(pán)組織的表達(dá)均高于正常對(duì)照組;在重度子癇前期胎盤(pán)組織中PLGFm RNA及蛋白表達(dá)低于正常組,提示脂聯(lián)素和PLGF可能參與了重度子癇前期的發(fā)病。2.脂聯(lián)素和PLGF在重度子癇前期中負(fù)相關(guān),提示它們可能通過(guò)某些相關(guān)分子機(jī)制影響重度子癇前期的發(fā)生發(fā)展;脂聯(lián)素和PLGF與BMI指數(shù)的相關(guān)性,提示二者與重度子癇前期患者孕期體重增加相關(guān);脂聯(lián)素和PLGF分別與新生兒體重均有相關(guān)性,提示脂聯(lián)素和PLGF與重度子癇前期圍產(chǎn)兒結(jié)局相關(guān)。
【學(xué)位授予單位】：鄭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類(lèi)號(hào)】：R714.244

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