本文關(guān)鍵詞：宮內(nèi)膜干細(xì)胞在體外對(duì)U87細(xì)胞的趨化性研究

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【摘要】：本研究目的為探究MenSC(宮內(nèi)膜干細(xì)胞,Menstrual blood stem cell)在體外對(duì)腫瘤細(xì)胞U87的趨化性及其內(nèi)在作用機(jī)制。首先,我們通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)探究SDF-1α因子能否促進(jìn)MenSC對(duì)U87細(xì)胞的趨化性,結(jié)果發(fā)現(xiàn)隨著加入SDF-1α因子濃度的升高,MenSC的趨化能力對(duì)應(yīng)增強(qiáng)。并且我們通過(guò)敲低SDF-1α因子的受體CXCR4與CXCR7的表達(dá),發(fā)現(xiàn)沉默表達(dá)后的MenSC對(duì)U87細(xì)胞的趨化性明顯下降。由此可知,SDF-1α/CXCR4信號(hào)軸在MenSC對(duì)U87細(xì)胞的趨化過(guò)程中起著重要的作用。接著,我們?cè)贛enSC中加入100ng/ml的SDF-1α因子進(jìn)行刺激,分別對(duì)加入后不同時(shí)間點(diǎn)0min、1min、5min、15min、30min、60min的相關(guān)蛋白表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)p-Jak2和p-STAT3表達(dá)水平在加入SDF-1α因子后立即上升,并在5min表達(dá)水平達(dá)到最高,之后下降保持不變；P-ERK1/2表達(dá)水平在加入SDF-1α因子后逐漸升高,在30min表達(dá)水平達(dá)到最高,之后保持不變；P-AKT表達(dá)水平在加入S DF-1α因子后立即上升,并在5min表達(dá)水平達(dá)到最高,之后下降保持不變。并且我們用抑制劑阻斷Jak2/STAT3信號(hào)通路ERK信號(hào)通路,來(lái)觀察阻斷后是否影響MenSC對(duì)U87細(xì)胞的遷移能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn)阻斷Jak2/STAT3信號(hào)通路極顯著的抑制了MenSC對(duì)U87細(xì)胞的遷移能力；阻斷ERK信號(hào)通路也在一定程度上抑制了MenSC對(duì)U87細(xì)胞的遷移能力。由此結(jié)果可以表明Jak2/STAT3和ERK信號(hào)通路在MenSC對(duì)U87的趨化性過(guò)程中起著重要的作用。最后,我們通過(guò)在MenSC中加入100ng/ml的S DF-1α因子進(jìn)行刺激,分別對(duì)加入后不同時(shí)間點(diǎn)0min、1min、5min、15min、30min、60min的相關(guān)骨架蛋白表達(dá)水平進(jìn)行測(cè)定和細(xì)胞骨架熒光檢測(cè),發(fā)現(xiàn)p-FAK蛋白表達(dá)水平在加入SDF-1α因子后立即上升,并持續(xù)保持不變,p-Paxillin表達(dá)水平在加入SDF-1α因子后持續(xù)上升,并在15min達(dá)到最大水平,之后保持不變；細(xì)胞骨架在加入SDF-1α因子后伸展得到增強(qiáng),并在15min達(dá)到最大水平,之后保持不變。相反的,我們?cè)贛enSC中加入Jak2/STAT3和ERK抑制劑,來(lái)檢測(cè)相關(guān)骨架蛋白表達(dá)水平和進(jìn)行細(xì)胞骨架的熒光檢測(cè),結(jié)果發(fā)現(xiàn)Jak2/STAT3和ERK抑制劑都能夠抑制p-FAK和p-Paxillin的表達(dá)水平,并且能夠抑制MenSC骨架的伸展。綜上,我們研究證實(shí)了SDF-1α結(jié)合其受體CXCR4/7進(jìn)而激活Jak2/STAT3和ERK1/2信號(hào)通路,反過(guò)來(lái)調(diào)節(jié)FAKs引起肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的重塑,從而促進(jìn)MenSC的遷移�；谝陨�,我們認(rèn)為SDF-1α/CXCR4、Jak2/STAT3 和 ERK信號(hào)通路在MenSC對(duì)U87的趨化性過(guò)程中起著重要的作用。
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號(hào)】：R711

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本文編號(hào)：1201605