本文關(guān)鍵詞：白藜蘆醇抑制子宮內(nèi)膜癌的體內(nèi)實驗研究

  更多相關(guān)文章： 白藜蘆醇 miR-181a 子宮內(nèi)膜癌 裸鼠 組織 移植瘤

【摘要】：背景及目的目前在抗癌研究中,天然生物制劑治療腫瘤已經(jīng)成為腫瘤治療領(lǐng)域的最有前景的途徑之一。白藜蘆醇作為一種天然生物制劑抑瘤作用已有很多研究,而白藜蘆醇在子宮內(nèi)膜癌中如何起作用還未明確。本實驗主要觀察白藜蘆醇和microRNA-181 a(miR-181a)對子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤生長的作用。驗證該作用是否與體外實驗中白藜蘆醇和miR-181a對子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞作用一致,為臨床治療提供新的思路。方法1、收集2013年至2014年收治南京鼓樓醫(yī)院婦產(chǎn)科的子宮內(nèi)膜癌患者的內(nèi)膜癌組織20例(G1期8例,G2期4例、G3期5例,漿液性乳頭狀癌3例)及因非惡性原因行子宮全切除術(shù)患者(子宮肌瘤)的正常內(nèi)膜組織13例,Realtime-PCR及Western blot技術(shù)檢測miR-181a及SIRT1在子宮內(nèi)膜癌及正常內(nèi)膜組織中的表達(dá)情況。2、應(yīng)用體外擴增培養(yǎng)的Ishikawa細(xì)胞株建立子宮內(nèi)膜癌裸鼠皮下移植瘤模型。待腫瘤體積達(dá)到50mm3(約造模后2周)后,隨機將30只荷瘤裸鼠分為6組(每組5只),分別為A組(PBS瘤內(nèi)注射,10%羥甲基纖維素CMC灌胃)、B組(PBS瘤內(nèi)注射,白藜蘆醇灌胃)、C組(Ad-miR-181a瘤內(nèi)注射,10%CMC灌胃)、D組(Ad-miR-181a瘤內(nèi)注射,白藜蘆醇灌胃)、E組(空載腺病毒laz-miR-181a瘤內(nèi)注射,10%CMC灌胃)、F組(laz-miR-181a瘤內(nèi)注射,白藜蘆醇灌胃)。具體劑量：瘤內(nèi)注射1x PBS(10ul·只-1),Ad-miR-181a(2*10^8·只-1,約10ul·只-1),laz-miR-181a(2*10^8·只-1,約10ul.只-1),灌胃10% CMC(0.1ml·只-1.天-1),白藜蘆醇(50.0mg·kg-1天-1),成瘤后,腺病毒瘤內(nèi)注射每3天一次,共3次,白藜蘆醇每天灌胃,1個月后于最后一次治療后2天處死所有裸鼠。治療過程中,觀察統(tǒng)計移植瘤體積變化,計算抑瘤率；實時定量PCR (real time quantitative Polymerase Chain Reaction, real-time PCR)和Western Blotting方法檢測裸鼠移植瘤組織中miR-181a及SIRT1的mRNA和蛋白表達(dá)。結(jié)果1. miR-181a mRNA在腫瘤組織中表達(dá)高于正常內(nèi)膜組織,且與惡性程度呈正相關(guān),SIRT 1 mRNA及蛋白表達(dá)在腫瘤組織中均低于正常內(nèi)膜組縱。P-STAT 3、AC-STAT3蛋白在腫瘤組織中表達(dá)高于正常內(nèi)膜組織,而STAT3無明顯變化。2.成瘤到50mm3大概需要13-16天。白藜蘆醇及Ad-miR-181a干預(yù)的腫瘤生長明顯發(fā)生變化。與A組相比,B組、F組腫瘤體積明顯縮小(p0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,C組腫瘤體積明顯增大(p0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,D組體積增大(p=0.023),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,E組體積稍增大(p=0.252),差異無統(tǒng)計學(xué)意義,D組較C組、F組較E組與相比,腫瘤縮小(p0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,F組較B組,腫瘤體積稍增大(p=0.195),差異無統(tǒng)計學(xué)意義。miR-181a mRNA表達(dá)水平B組較A組miR-181a mRNA表達(dá)水平明顯降低(p0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,F組較A組降低(p=0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,C組、D組較A組miR-181a mRNA表達(dá)水平明顯上升(p0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,E組較A組(p=0.092)差異無統(tǒng)計學(xué)意義；D組較C組、F組較E組miR-181a mRNA表達(dá)水平明顯降低(p=0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,B組較F組(p=0.076),差異無統(tǒng)計學(xué)意義；SIRT 1蛋白相對表達(dá)水平上B組、D組、F組較A組蛋白相對表達(dá)水平明顯升高(p0.001),C組較A組SIRT1蛋白相對表達(dá)水平明顯下降(p=0.03),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,E組無明顯改變(p=0.926),差異無統(tǒng)計學(xué)意義,D組較C組、F組較E組：miR-181a mRNA表達(dá)水平明顯降低(p0.001),差異有統(tǒng)計學(xué)意義,B組較F組(p=0.911),差異無統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)論本研究表明]miR-181a mRNA在子宮內(nèi)膜癌組織中高表達(dá),且與惡性程度呈正相關(guān),SIRT 1 mRNA及蛋白在腫瘤組織中低表達(dá)。過表達(dá)：miR-181a可有效沉默SIRT1的表達(dá),顯著促進(jìn)人子宮內(nèi)膜癌裸鼠移植瘤生長,并降低腫瘤組織中SIRT1基因的表達(dá)。而白藜蘆醇對人子宮內(nèi)膜癌ishikawa細(xì)胞裸鼠移植瘤有明顯的抑制作用,并在一定程度上逆轉(zhuǎn)miR-181a轉(zhuǎn)染組的效果,可明顯下調(diào)miR-181a的表達(dá),上調(diào)SIRT1的mRNA及蛋白表達(dá)量。證明在體內(nèi)實驗中白藜蘆醇可通過miR-181a/SIRT 1/ STAT 3通路抑制子宮內(nèi)膜癌的生長。這些結(jié)論均提示miR-181a是調(diào)節(jié)子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展中的一個重要miRNA,并且有望成為新的治療靶點,為白藜蘆醇將來應(yīng)用于治療子宮內(nèi)膜癌提供了一定的基礎(chǔ)實驗資料。
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R737.33

【相似文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 張武,肖健存,崔立剛,王金銳,苗立英,賈建文;超聲引導(dǎo)瘤內(nèi)注射親細(xì)胞非均質(zhì)分子脂質(zhì)治療頭皮惡性腫瘤1例[J];中華超聲影像學(xué)雜志;2004年01期

2 劉德午 ,鄒蘇婭;腫瘤內(nèi)注射生物應(yīng)答修飾因子[J];日本醫(yī)學(xué)介紹;1989年08期

3 莊振武;高甬東;李麟蓀;張小勝;;超聲導(dǎo)引瘤內(nèi)注射乙酸治療大鼠肝內(nèi)移植性腫瘤[J];中華肝臟病雜志;1998年03期

4 劉振東;;重組人干擾素α-2B實體瘤內(nèi)注射治療效分析[J];中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用;2010年02期

5 付尚志;李萬平;;瘤內(nèi)注射或植入抗癌藥物治療癌癥研究現(xiàn)況[J];臨床軍醫(yī)雜志;2011年01期

6 殷香保;鄔林泉;傅華群;羅志強;方路;章永恩;;絲裂霉素纖維蛋白膠凝膠瘤內(nèi)注射治療裸鼠肝癌[J];重慶醫(yī)學(xué);2013年17期

7 廖興勝;肖紹文;張超元;譚源福;周全;;瘤內(nèi)注射乙醇手術(shù)切除海綿竇海綿狀血管瘤[J];廣西醫(yī)學(xué);2009年11期

8 陳金鳳;王振興;曾雅靜;;~(32)P-玻璃微球瘤內(nèi)注射抗腫瘤作用及對外周血白細(xì)胞的影響[J];檢驗醫(yī)學(xué)與臨床;2013年15期

9 于立堅,馬潤娣,朱娟莉;瘤內(nèi)注射活卡介苗抗瘤機理探討——Ⅱ 瘤內(nèi)注射卡介苗后小鼠對同種和不同種腫瘤的抵抗力[J];陜西新醫(yī)藥;1981年07期

10 于立堅,朱娟莉,馬潤娣;瘤內(nèi)注射活卡介苗抗瘤機理探討 Ⅲ、阻斷巨噬細(xì)胞機能對瘤內(nèi)注射活卡介苗小鼠對同種和不同種腫瘤抵抗力的影響[J];陜西新醫(yī)藥;1981年11期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 田艷明;楊勝;喬磊;閆希冬;李鵬;劉冠禹;高曉唯;;耳腦膠瘤內(nèi)注射輔助眶內(nèi)血管性腫瘤摘除(附5例報告)[A];第十四屆西北五省眼科學(xué)術(shù)大會論文集[C];2013年

2 卓忠雄;王紅衛(wèi);皋月娟;李京京;張霞;;瘤內(nèi)注射微泡超聲輻照下對空化效應(yīng)的影響[A];2007’促進(jìn)西部發(fā)展聲學(xué)學(xué)術(shù)交流會論文集[C];2007年

3 卓忠雄;王紅衛(wèi);皋月娟;李京京;張霞;;瘤內(nèi)注射微泡超聲輻照下對空化效應(yīng)的影響[A];中國超聲醫(yī)學(xué)工程學(xué)會第七屆全國腹部超聲學(xué)術(shù)會議學(xué)術(shù)論文匯編[C];2007年

4 陳潔;金震東;李兆申;江月萍;湛先保;王洛偉;;超聲內(nèi)鏡引導(dǎo)下瘤內(nèi)注射重組人p53腺病毒治療胰腺癌的短期臨床觀察[A];中華醫(yī)學(xué)會第七次全國消化病學(xué)術(shù)會議論文匯編（上冊）[C];2007年

5 潘建平;張明徽;倪衛(wèi)琴;王青青;夏大靜;張立煌;余海;曹雪濤;;瘤內(nèi)注射γ—干擾素基因修飾的樹突狀細(xì)胞的抗腫瘤作用及其免疫學(xué)機制[A];中國免疫學(xué)會第四屆學(xué)術(shù)大會會議議程及論文摘要集[C];2002年

6 張森林;孟昭業(yè);壽柏泉;;手術(shù)聯(lián)合平陽霉素瘤內(nèi)注射治療巨大舌部淋巴管畸形[A];2007'全國口腔頜面部脈管性疾病學(xué)術(shù)研討會論文集[C];2007年

7 羅榮城;李愛民;廖旺軍;張軍一;丁雪梅;;~(131)I-S_(102)瘤內(nèi)注射治療晚期肝癌的臨床研究[A];第七屆全國腫瘤生物治療學(xué)術(shù)會議論文集[C];2001年

8 李貴平;汪勇先;黃凱;張輝;;~(188)Re-Hereceptin瘤內(nèi)注射對HER-2/neu瘤基因高表達(dá)的鼻咽癌裸鼠模型的放免治療研究[A];第二屆全國核素顯像及治療學(xué)術(shù)會議論文摘要匯編[C];2004年

9 郭新會;馮廣森;;肝動脈化療栓塞結(jié)合B超下經(jīng)皮肝穿瘤內(nèi)注射醋酸治療原發(fā)性肝癌的臨床療效觀察(附加23例報告)[A];中華醫(yī)學(xué)會放射學(xué)分會第八屆全國心胸影像學(xué)術(shù)大會暨河南省第十二次放射學(xué)術(shù)會議論文匯編[C];2006年

10 郭新會;;肝動脈化療栓塞結(jié)合B超下經(jīng)皮肝穿瘤內(nèi)注射醋酸治療原發(fā)性肝癌的臨床療效觀察(附加23例報告)[A];中華醫(yī)學(xué)會第十三屆全國放射學(xué)大會論文匯編（下冊）[C];2006年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 馮蕾;瘤內(nèi)注射化療藥物對微波消融肝腫瘤的增敏作用[D];中國人民解放軍軍醫(yī)進(jìn)修學(xué)院;2006年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 婁雪峰;三維診斷超聲聯(lián)合瘤內(nèi)注射微泡增強多柔比星化療效果的實驗研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

2 徐琳;白藜蘆醇抑制子宮內(nèi)膜癌的體內(nèi)實驗研究[D];東南大學(xué);2015年

3 王紅衛(wèi);超聲輻照瘤內(nèi)注射微泡的生物學(xué)效應(yīng)及其對局部化療增效作用研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2007年

4 司曉燕;異種抗原免疫及瘤內(nèi)注射對荷瘤小鼠脾淋巴細(xì)胞免疫功能影響的研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2009年

5 劉容;超聲引導(dǎo)卡鉑/乳酸羥基乙酸共聚物微球瘤內(nèi)注射治療肝癌實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

6 郭俏;貝伐單抗與恩度聯(lián)合伊立替康瘤內(nèi)注射治療鼠結(jié)腸癌模型的研究[D];中南大學(xué);2014年

7 駱嵐;貝伐單抗聯(lián)合5-FU瘤內(nèi)注射治療鼠結(jié)腸癌模型的觀察[D];中南大學(xué);2013年

8 許婷婷;實時三維超聲激勵瘤內(nèi)注射微泡增強VX2移植瘤化療[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

9 張麗麗;瘤內(nèi)注射奧曲肽溫敏凝膠治療小鼠Hca-F肝癌的實驗研究[D];大連醫(yī)科大學(xué);2012年

10 鄧偉;超聲引導(dǎo)卡鉑/乳酸羥基乙酸共聚物微球瘤內(nèi)注射治療胰腺癌實驗研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2003年

，

本文編號：1190698