本文關(guān)鍵詞：EGFR在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)及RNAi靶向作用的研究

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【摘要】：目的:1.研究表皮生長(zhǎng)因子受體(Epidermal growth factor receptor,EGFR)在卵巢上皮性腫瘤中的表達(dá)。2.探討RNA干擾EGFR基因的表達(dá)情況及對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖情況的影響。方法:1.選擇卵巢良性腫瘤20例(良性組),卵巢交界性腫瘤40例(交界組),卵巢上皮性癌40例(惡性組)。使用免疫組化檢測(cè)EGFR蛋白的表達(dá)情況。統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析各組EGFR基因的表達(dá)。2.構(gòu)建靶向EGFR基因干擾siRNA表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染入SKOV3細(xì)胞中。實(shí)驗(yàn)分為三組:對(duì)照組,空白質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組,特異性轉(zhuǎn)染組。RT-PCR檢測(cè)EGFR的基因表達(dá)情況。MTT法分析細(xì)胞的增殖情況。平板集落實(shí)驗(yàn)計(jì)算抑制率。結(jié)果:1.卵巢良性腫瘤,卵巢交界性腫瘤,卵巢上皮性癌中EGFR陽(yáng)性表達(dá)率分別為20.0%,47.5%,85.0%,惡性組陽(yáng)性表達(dá)率要高過(guò)另外兩組(P0.05),良性組與交界組對(duì)比不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。EGFR的陽(yáng)性表達(dá)率與臨床分期,病理分級(jí)及腫瘤的大小有關(guān)(P0.05),與患者的年齡無(wú)關(guān)(P0.05)。2.成功構(gòu)建靶向EGFR基因干擾siRNA表達(dá)載體,轉(zhuǎn)染SKOV3細(xì)胞,RTPCR分析表明特異性轉(zhuǎn)染組和空白質(zhì)粒組的細(xì)胞EGFR mRNA表達(dá)明顯受到抑制。將對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的不同組的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù),繪制MTT細(xì)胞生長(zhǎng)曲線,發(fā)現(xiàn)不同組細(xì)胞增殖情況存在差異,特異性轉(zhuǎn)染組的細(xì)胞生長(zhǎng)明顯低于空白質(zhì)粒組和對(duì)照組,細(xì)胞抑制率為61.8%。平板集落實(shí)驗(yàn)中,特異轉(zhuǎn)染組中細(xì)胞集落形成抑制率為59.9%。結(jié)論:1.EGFR蛋白在卵巢交界性腫瘤和卵巢上皮性癌都有表達(dá),表達(dá)逐步升高。提示EGFR基因可能是卵巢上皮性腫瘤形成發(fā)展的重要影響因素。2.靶向EGFR的基因的RNA干擾能降低SKOV3細(xì)胞EGFR的表達(dá),導(dǎo)致細(xì)胞凋亡,降低細(xì)胞的增殖。所以將靶向EGFR RNA干擾技術(shù)用于卵巢上皮性腫瘤的靶基因治療研究具有一定的實(shí)驗(yàn)室依據(jù)·。
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R737.31

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本文編號(hào)：1180037