坤泰膠囊改善控制性促排卵小鼠子宮內(nèi)膜容受性的實(shí)驗(yàn)研究
本文關(guān)鍵詞:坤泰膠囊改善控制性促排卵小鼠子宮內(nèi)膜容受性的實(shí)驗(yàn)研究
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【摘要】:背景由于工作節(jié)奏加快、全球環(huán)境污染加重,不孕癥的發(fā)生在世界范圍內(nèi)引起重視。輔助生殖技術(shù)的誕生與發(fā)展為不孕癥患者帶來前所未有的希望,另外促排卵藥物應(yīng)用,使優(yōu)質(zhì)卵子的獲得成為可能;但是與此同時(shí),臨床妊娠率卻始終維持在40%-60%,如何提高輔助生殖技術(shù)的成功率成為目前生殖醫(yī)學(xué)界需要解決的瓶頸問題,子宮對胚胎的接受能力以及胚胎與內(nèi)膜發(fā)育的同步性,成為各專家學(xué)者關(guān)注的焦點(diǎn)。目的1.探討控制性促排卵影響子宮內(nèi)膜容受性的機(jī)制;2.了解坤泰膠囊對子宮內(nèi)膜容受性的影響,并探討其作用機(jī)制,從而為治療促排卵藥物引起的子宮內(nèi)膜容受性降低提供新思路、新方法。方法將180只平均體重為(24-34g)6-8周齡的昆明雌鼠隨機(jī)分為三組(A組:控制性超排卵;B組:坤泰+控制性超排卵;C組:生理鹽水對照)。90只體重為(28-37g)8-10周的雄鼠,雌雄分籠飼養(yǎng),均自由食水。分別給予相應(yīng)藥物處理,雌:雄2:1合籠,檢查合籠次日晨陰栓,按天數(shù)記作d1-d6。每天每組處死4-6只雌鼠,取小鼠心臟血測定血清中激素水平;解剖取小鼠子宮,一部分縱行剖開刮取子宮內(nèi)膜放入-80℃冰箱,待行RT-PCR;另一部分未刮取內(nèi)膜的子宮組織,置入4%的多聚甲醛中固定待行HE染色和免疫組化處理,從而進(jìn)行各組間不同時(shí)間點(diǎn)激素水平、子宮內(nèi)膜組織學(xué)結(jié)構(gòu)、腺體數(shù)、LPAR3、COX-2表達(dá)的比較。結(jié)果1.激素測定:A、B兩組雌、孕激素明顯較同期C組升高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;B組較A組稍高,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2.HE染色:A組子宮內(nèi)膜較B、C兩組發(fā)育落后,間質(zhì)致密,血管不豐富,腺體發(fā)育差,腺腔小,腺體數(shù)目少,且差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;B、C兩組之間內(nèi)膜發(fā)育、腺體數(shù)均無明顯差異。3.免疫組化結(jié)果:LPAR3、COX-2表達(dá)有一定規(guī)律性。LPRA3在A組d1-d3表達(dá)逐漸增多,d3-d6逐漸減少,峰值出現(xiàn)在d3;B、C兩組與A組表達(dá)規(guī)律相似,但是LPRA的峰值出現(xiàn)在d4,較A組推遲一天,且B、C兩組峰值較A組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,B、C之間無明顯差異。COX-2均在三組LPRA3峰值出現(xiàn)之后開始出現(xiàn)并增多,表達(dá)的位置逐漸向子宮內(nèi)膜基底部及子宮肌層延伸;A組較B、C兩組COX-2出現(xiàn)并增多早一天。4.RT-PCR結(jié)果:根據(jù)監(jiān)測條帶的灰度值顯示,A組LPRA3在d1-d3天逐漸增多,d3-d6逐漸減少,峰值出現(xiàn)在d3,B、C兩組等峰值均出現(xiàn)在d4,且B、C兩組峰值較A組高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,B、C之間無明顯差異,與免疫組化蛋白表達(dá)呈現(xiàn)相同結(jié)果。A組COX-2于d3天在條帶上開始較多出現(xiàn),并隨著妊娠天數(shù)量逐漸增多。B、C組出現(xiàn)相同的規(guī)律,但是LPRA3峰值及COX-2的出現(xiàn)均較A組推遲一天,出現(xiàn)在d4。結(jié)論1.控制性促排卵可能由于LPAR3及COX-2的異常表達(dá),雌、孕激素異常升高降低了子宮內(nèi)膜容受性;2.坤泰膠囊不影響促排卵后小鼠的雌、孕激素的水平,可能通過對LPRA3、COX-2的改善來提高小鼠子宮內(nèi)膜的容受性。
【關(guān)鍵詞】:坤泰膠囊 控制性促排卵 子宮內(nèi)膜容受性 溶血磷脂酸受體-3 環(huán)氧合酶-2
【學(xué)位授予單位】:新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R714.8
【目錄】:
- 摘要5-7
- Abstract7-9
- 引言9-11
- 第一部分 控制性促排卵對小鼠子宮內(nèi)膜容受性的影響11-22
- 1. 實(shí)驗(yàn)材料11-12
- 2. 實(shí)驗(yàn)方法12-16
- 3. 結(jié)果16-19
- 4. 討論19-21
- 5. 結(jié)論21-22
- 第二部分 坤泰膠囊對控制性促排卵小鼠子宮內(nèi)膜容受性降低 的改善22-25
- 1. 實(shí)驗(yàn)材料22
- 2. 實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)內(nèi)容22
- 3. 結(jié)果22-23
- 4. 討論23-24
- 5. 結(jié)論24-25
- 參考文獻(xiàn)25-27
- 綜述27-41
- 參考文獻(xiàn)35-41
- 附錄 1: 附圖41-43
- 附錄 2: 英文縮略詞43-44
- 攻讀學(xué)位期間發(fā)表文章情況44-45
- 致謝45-46
- 個(gè)人簡歷46
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,本文編號:1132043
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