本文關(guān)鍵詞：子宮內(nèi)膜異位癥性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細(xì)胞成熟的影響及內(nèi)異方的干預(yù)作用

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【摘要】：子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EM),是子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞和基質(zhì)細(xì)胞種植于子宮以外的一種雌激素依賴性疾病。EM在育齡期婦女中發(fā)病率高達(dá)10%~15%,與不孕癥高度相關(guān)。與其他不孕癥的患者相比,EM性不孕癥患者促排卵后正常獲卵率相對較低,其采用輔助生殖技術(shù)后的妊娠結(jié)局也相對較差,可能與卵泡成熟障礙、卵母細(xì)胞質(zhì)量受損等因素相關(guān)。卵泡液包圍卵母細(xì)胞并構(gòu)成排卵前的微環(huán)境,必然對卵母細(xì)胞的成熟過程和質(zhì)量造成影響。已有研究表明EM性不孕癥患者卵泡液中多種蛋白表達(dá)出現(xiàn)異常,還有研究者對具體異常表達(dá)的蛋白進(jìn)行了研究,他們認(rèn)為這有可能是除EM導(dǎo)致盆腔解剖結(jié)構(gòu)紊亂以外導(dǎo)致不孕癥發(fā)生的重要因素。中藥內(nèi)異方是臨床治療EM和EM性不孕癥的有效中藥復(fù)方。本實(shí)驗(yàn)旨在研究EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細(xì)胞成熟和質(zhì)量的影響及機(jī)制,篩查并驗(yàn)證EM性不孕癥患者卵泡液中明顯表達(dá)異常的細(xì)胞因子和蛋白質(zhì),探討中藥內(nèi)異方對EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細(xì)胞成熟的干預(yù)作用,為EM性不孕癥的理論研究和臨床治療提供新的思路和方法。研究目的1、了解EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細(xì)胞成熟和質(zhì)量的影響,并探討其機(jī)制。2、發(fā)現(xiàn)EM性不孕癥患者卵泡液中表達(dá)明顯異常的細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)。3、了解中藥內(nèi)異方藥物血清對EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細(xì)胞成熟的干預(yù)作用。研究方法1、通過在小鼠卵母細(xì)胞體外成熟的培養(yǎng)液加入EM性不孕癥患者卵泡液,觀察EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細(xì)胞成熟的阻礙作用;通過對成熟卵母細(xì)胞中紡錘體的熒光染色及形態(tài)觀察,了解EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細(xì)胞質(zhì)量的影響;通過檢測EM性不孕癥患者卵泡液參與體外培養(yǎng)的卵母細(xì)胞中氧化應(yīng)激的水平,了解EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細(xì)胞成熟和質(zhì)量的部分機(jī)制。2、通過對EM性不孕癥患者卵泡液的蛋白芯片檢測,篩查出表達(dá)異常(差異2倍或以上)細(xì)胞因子和蛋白;選擇其中與EM相關(guān)的細(xì)胞因子和蛋白,擴(kuò)大樣本進(jìn)行ELISA方法檢測并驗(yàn)證。3、在EM性不孕癥患者卵泡液參與小鼠卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)的基礎(chǔ)上,加入中藥內(nèi)異方藥物血清參與培養(yǎng),了解中藥內(nèi)異方藥物血清對EM性不孕癥患者卵泡液影響小鼠卵母細(xì)胞成熟的干預(yù)作用。研究結(jié)果1、EM性不孕癥患者卵泡液降低了小鼠卵母細(xì)胞體外成熟率,損傷卵母細(xì)胞紡錘體,增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)氧化應(yīng)激水平。2、EM性不孕癥患者卵泡液中ICAM-1表達(dá)明顯增多(P0.001),TECK表達(dá)明顯降低(P0.001);I-309、Lymphotactin(XCL1)、MMP-25、TSG-6等多種蛋白異常表達(dá)。3、中藥內(nèi)異方藥物血清能提高EM性不孕癥患者卵泡液降低的小鼠卵母細(xì)胞體外成熟率。結(jié)論1、子宮內(nèi)膜異位癥性不孕癥患者卵泡液增強(qiáng)小鼠卵母細(xì)胞內(nèi)的氧化應(yīng)激水平,阻礙其體外成熟。2、子宮內(nèi)膜異位癥性不孕癥患者卵泡液中ICAM-1過量表達(dá),或同時(shí)存在多種細(xì)胞因子和蛋白質(zhì)異常表達(dá),造成了卵泡液微環(huán)境異常。3、中藥內(nèi)異方藥物血清能改善子宮內(nèi)膜異位癥性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細(xì)胞體外成熟的阻礙作用。
【關(guān)鍵詞】：子宮內(nèi)膜異位癥 卵泡液 不孕癥 內(nèi)異方
【學(xué)位授予單位】：第二軍醫(yī)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R711.71
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• 英文摘要6-9
• 縮略詞表9-10
• 前言10-11
• 第一部分 EM性不孕癥患者卵泡液對小鼠卵母細(xì)胞體外成熟及質(zhì)量的影響11-18
• 一、材料11-12
• 二、方法12-15
• 三、結(jié)果15-18
• 第二部分 EM性不孕癥患者卵泡液中特異表達(dá)蛋白的篩選18-25
• 一、材料18-19
• 二、方法19-21
• 三、結(jié)果21-25
• 第三部分 EM性不孕癥患者卵泡液中特異表達(dá)蛋白的ELISA法驗(yàn)證25-33
• 一、材料25-26
• 二、方法26-28
• 三、結(jié)果28-33
• 第四部分 內(nèi)異方藥物血清對EM性不孕癥患者卵泡液阻礙小鼠卵母細(xì)胞成熟的干預(yù)機(jī)制研究33-39
• 一、材料33
• 二、方法33-36
• 三、結(jié)果36-39
• 討論39-47
• 參考文獻(xiàn)47-51
• 結(jié)論51-52
• 文獻(xiàn)綜述 子宮內(nèi)膜異位癥患者卵泡液微環(huán)境與不孕癥發(fā)生相關(guān)性研究進(jìn)展52-59
• 參考文獻(xiàn)56-59
• 在讀期間發(fā)表論文和參加科研工作59-60
• 致謝60

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